本发明涉及一种烟草钾离子通道基因NtKAT3,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的一种烟草钾离子通道基因NtKAT3,通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术,构建了用于敲除NtKAT3基因的CRISPR/Cas9编辑载体,经遗传转化后获得了NtKAT3基因发生编辑的烟草植株。在MS培养条件下,所述基因发生编辑的成熟期烟草植株的打顶株高、腰叶长、腰叶宽及自然株高均低于基因未发生编辑的烟草植株。同时对NtKAT3基因编辑植株中钾含量进行测定,发现在现蕾期、打顶期、成熟期基因编辑植株中钾含量均低于基因未发生编辑的烟草植株。这为研究烟草生长发育与产量品质相关基因功能提供了遗传材料和理论依据。