本发明提供了一种能识别肠道病毒A种群病毒结构蛋白VP1的广谱单克隆抗体及其应用,属于分子生物学和免疫分析技术领域。该单克隆抗体包含以下六个CDR区:重链的CDR区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1~No.3所示;轻链的CDR区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.4~No.6所示。本发明还提供了编码该单克隆抗体的核苷酸片段、包含该核苷酸片段的重组载体和工程细胞系、抗体偶联物以及他们的用途。该单克隆抗体为IgG1亚型非中和抗体,可广谱结合肠道病毒A种群病毒的结构蛋白VP1,可用于制备检测、抑制、预防或/和治疗肠道病毒A种群病毒的产品。