本发明提供一种高表达和高活性纤连蛋白突变体及其应用,涉及生物医药技术领域。所述高表达和高活性纤连蛋白突变体的编码序列如SEQ ID NO.1,且该纤连蛋白突变体为选取纤连蛋白与细胞粘附活性密切相关的结构域,构建纤连蛋白突变体D8910,并将纤连蛋白突变体D8910采用翻译暂停理论设计编码纤连蛋白的核苷酸序列,在不改变纤连蛋白氨基酸序列的情况下,将纤连蛋白密码子中翻译速度较快的密码子替换成翻译速度较慢的密码子,制造翻译暂停位点来优化获得。本发明克服了现有技术的不足,由此纤连蛋白突变体建重组载体、表达、纯化得到的重组纤连蛋白,能够有效促进细胞增殖活性和粘附活性。
本申请涉及生物技术领域,具体公开了一种重组人源化III型胶原蛋白及其制备方法和应用。所述重组人源化III型胶原蛋白的核苷酸序列如(a)或(b)所示:(a)核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;(b)在(a)中的核苷酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有胶原蛋白活性的由(a)衍生的蛋白质。本申请设计的重组人源化III型胶原蛋白稳定性及活性均较佳,并且,重组人源化III型胶原蛋白能够显著促进成纤维细胞的迁移,且呈现一定的剂量依赖。