本发明公开了检测血清4型禽腺病毒变异株的微滴式数字PCR引物探针组合及其应用。本发明公开的引物探针组合由引物F1、R1与探针组成，两条引物分别为序列表中SEQ IDNo.1‑SEQ ID No.2所示的单链DNA，探针的序列为SEQ ID No.3。本发明的引物探针组合特异性好，可特异性检测FAdV‑4变异株，与其它血清型禽腺病毒和常见禽病病原体无交叉反应；敏感性好，可以检测浓度为2copies/μL血清4型禽腺病毒变异株；重复性好，批内与批间重复性试验的变异系数均小于2％；准确性好。本发明的引物探针组合可以用于检测血清4型禽腺病毒变异株，具有很好的应用前景。
本发明公开了检测血清4型禽腺病毒变异株的荧光定量PCR引物探针组合及其应用。本发明公开的引物探针组合由引物F1、R1、F2、R2与探针P1、P2组成，四条引物分别为序列表中SEQ ID No.1‑SEQ ID No.4所示的单链DNA，两条探针的序列分别为SEQ ID No.5和SEQ ID No.6。本发明的引物探针组合特异性好，可鉴别检测血清4型禽腺病毒及其变异株；敏感性好，可以检测浓度为20copies/μL血清4型禽腺病毒及其变异株；重复性好，批内和批间试验的变异系数均小于0.8％。本发明的引物探针组合可以用于鉴别检测血清4型禽腺病毒及其变异株，为FAdV‑4的防控提供了技术支撑。
本发明公开了一种检测禽腺病毒4型的纳米PCR方法和试剂盒，纳米PCR的反应体系中添加Ag/Au/Fe3O4纳米粒子和SEQ ID No.1‑2所示引物，并对反应体系和反应条件进行了优化。本发明采用Ag/Au/Fe3O4纳米复合材料不仅提高了PCR的扩增效率，灵敏度提高10倍，还有效的抑制了非特异性扩增，弥补了引物特异性不足的缺陷。
