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[发明专利]一种阻断叶柄韧皮部鉴定信号交流的方法-CN202010826239.X在审
发明人： 李天忠;王胜男;王圣元;郝理 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2020-08-17 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及一种阻断叶柄韧皮部鉴定信号交流的方法，本发明利用农杆菌侵染叶片瞬时表达基因的方式，通过叶柄环剥技术切断韧皮部筛管系统，阻断韧皮部信号分子运输，之后对叶柄进行mRNA分子或蛋白检测，实现快速验证韧皮部信号分子交流，同时也可验证互作基因或蛋白对信号分子长距离运输之间影响的问题，具有能够普遍应用于韧皮部与木质部分明的其他植物的特点。解决了果树等木本植物两个基因共转化困难的问题，能够快速、灵敏、简便、准确的验证不具有组织特异性的mRNA及蛋白等信号分子可否通过韧皮部长距离运输，克服了果树通过转基因技术验证信号分子交流较难、耗时长且不方便等问题。
一种阻断叶柄韧皮部鉴定信号交流方法

[发明专利]基于SSR标记的‘惠’自花结实性后代的高效选育试剂盒-CN201911200051.8有效
发明人： 李天忠;刘春生;刘志;姜峰;李洋;于杰 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2019-11-29 - 公布日： 2020-11-24 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于SSR标记的‘惠’自花结实性后代的高效选育试剂盒，公开一种与‘惠’自花结实性有关的SSR分子标记Ch04d02。在‘惠’自花结实性后代中表现114bp：126bp基因分型。本发明还提供一种用于鉴定上述SSR分子标记的引物，通过该分子标记及引物建立高效的分子标记辅助选择育种体系，能够在‘惠’后代中高效筛选出具有自花结实性的苹果种质，从而创制自花结实性的苹果品种。
基于 ssr 标记结实后代高效选育试剂盒

[实用新型]一种用于果树栽培过程的远程监测装置-CN201921928470.9有效
发明人：王爱德;谭冬梅;袁晖;刘志;吕天星;宋国柱;李天忠 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2019-11-08 - 公布日： 2020-09-04 - 主分类号： A01G17/00 文献下载
摘要：本实用新型公开的属于远程监测装置技术领域，具体为一种用于果树栽培过程的远程监测装置，包括底板、电动伸缩杆、太阳能电板、固定杆和PC工控主机，所述底板的顶部中央位置固定安装有电动伸缩杆，所述电动伸缩杆的顶部固定安装有支撑杆，所述支撑杆的前侧壁顶部固定安装有太阳能电板，所述支撑杆的左侧顶部固定安装有转换器，所述太阳能电板与转换器电性连接，所述支撑杆的前侧壁设置有固定杆，所述固定杆的右侧设置有摄像机，所述电动伸缩杆的右侧固定安装有PC工控主机，该远程检测装置能够有效的对果树栽培过程中进行监测，同时也能提供电力，降低使用成本，同时在室外也不会出现雷击的现象，提高该装置的使用寿命。
一种用于果树栽培过程远程监测装置

[发明专利]一种高砧分枝大苗的培育方法-CN202010370621.4在审
发明人：刘志;李天忠;吕天星;姜峰;王冬梅 -专利权人：辽宁省果树科学研究所;中国农业大学
申请日： 2020-04-29 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： A01G17/00 文献下载
摘要：本发明提供一种高砧分枝大苗的培育方法，具体按照以下步骤实施：选用抗寒、抗旱、根系发达砧木，繁育过程中按宜机化栽植，定植当年将砧木培养成高度1.2m，70cm处茎粗1.0‑1.2cm的健壮苗木，翌年春季采用舌接方式嫁接，嫁接高度距地面70cm，接后采用微喷灌水，保证土壤含水量和圃内空气相对湿度，采用立架绑扶接穗新梢，防接穗劈裂，应用半叶法促发分枝，一年连续进行3‑4次，保证新梢5个以上。本发明采取的技术措施，实现2年内繁育出苗木高度大于1.5m，接穗粗度大于1cm，有效分枝数8个以上，根系发达健壮，苗木成花比例20％以上的适于山地旱区集约栽培应用的分枝大苗。应用该苗木建园，树体成形早，2年见果，3年丰产。
一种分枝培育方法

[发明专利]‘寒富’杂种后代自花结实性的SNP分子标记及应用-CN201911189115.9有效
发明人： 李天忠;于杰;刘志;姜峰;李洋;刘春生 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2019-11-28 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明涉及‘寒富’杂种后代自花结实性的SNP分子标记及应用。‘寒富’杂种后代自花结实性的SNP位点对应于金冠苹果基因组GDDH13v1.1版本参考序列4号染色体上的第25831655位突变。本发明还提供一种用于鉴定上述SNP分子标记的引物，通过该分子标记及引物建立高效准确的分子标记辅助育种，通过优选该SNP分子标记的优势等位基因，能够选择‘寒富’杂种后代中自花结实性高的品系，从而培育出具有自花结实性的苹果品种。
杂种后代结实 snp 分子标记应用

[发明专利]一种HMGR基因mRNA在梨属砧穗间传递的分子鉴定方法-CN201610390843.6有效
发明人： 李天忠;郝理;王胜男;王圣元 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2016-06-02 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开了HMGR基因mRNA在梨属砧穗间传递的分子鉴定方法，包括如下步骤：(1)鸭梨为接穗，杜梨为砧木进行试管苗微嫁接；(2)分别提取杜梨、鸭梨以及嫁接后砧木与接穗的总RNA，反转录成cDNA，PCR扩增HMGR基因的全长，以此为模板进行第二次PCR，得到各自的HMGR基因片段；两次PCR的上下游引物序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示；(3)限制性内切酶对第二次PCR产物进行酶切，比较嫁接前后的酶切谱图鉴定传递情况。本发明提供的方法快速、灵敏，准确性高，简便，能够应用于其他梨属植物。
一种 hmgr 基因 mrna 梨属砧穗间传递分子鉴定方法

[发明专利]与苹果斑点落叶病抗性相关的SNP分子标记及其应用-CN201611209258.8有效
发明人： 李天忠;张秋雷;张懿 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2016-12-23 - 公布日： 2020-06-30 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供一种与苹果斑点落叶病抗性相关的SNP分子标记，所述SNP分子标记位于用于调控苹果斑点落叶病抗性的miRNA初级转录本Md‑MIRLn12‑277的启动子上，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，该序列的378bp处碱基为T的苹果品种对苹果斑点落叶病的抗性显著高于此处碱基为G的苹果品种。可将其作为苹果属栽培品种对苹果斑点落叶病抗性的分子标记，用于筛选苹果斑点落叶病抗性资源和选育抗性苹果品种。
苹果斑点落叶抗性相关 snp 分子标记及其应用

[发明专利]一种标记植物花粉微丝微管细胞骨架的方法及其试剂盒-CN201710081736.X有效
发明人： 李天忠;杨清;顾钊宇;李威;李洋;于杰;刘春生 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2017-02-15 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供一种用于标记植物花粉微丝微管细胞骨架的试剂盒，包括花粉固定液试剂A，花粉洗涤液试剂B，花粉微丝染料试剂组合C，以及花粉微管染料试剂组合D。本发明还提供利用该试剂盒标记植物花粉微丝微管细胞骨架的方法，具体流程如下：培养花粉—固定花粉管—洗涤花粉管—微丝染料室温染色花粉管—微管染料室温染色花粉管—激光共聚焦显微镜观察。本方法可实现快速、灵敏、准确性高、简便地观察木本植物花粉管内微丝微管骨架结构与排列方式，为直观观察木本植物花粉管内微丝微管骨架结构与排列方式提供技术支持。
一种标记植物花粉微管细胞骨架方法及其试剂盒

[发明专利]一种FT mRNA分子在同属植物砧穗间传递的分子鉴定方法-CN201810445842.6有效
发明人： 李天忠;郝理;王胜男;王圣元;徐超然 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2018-05-11 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及一种FT mRNA分子在同属植物砧穗间传递的分子鉴定方法，本发明提供的方法可实现快速、灵敏、准确性高、简便、经济实惠地去鉴定同源性很高的基因在砧木和接穗间能否进行长距离传递，具有广阔的市场前景。该方法过程简单，要求不高，耗时短，工作量较小，工作周期较小，效率高，花费便宜，一方面可为科研者节约金钱，另一方面，缩短实验时间，提高工作效率，且具有应用的广泛性与普遍性，可以大范围在同属植物上应用，解决了一般实验室无法通过聚丙烯酰胺凝胶以及垂直电泳槽对同属植物砧木和接穗间同源性很高的基因进行RT‑PCR‑dCAPS鉴定的问题，省去了转基因所耗费的时间，而RT‑PCR‑CAPS对基因序列要求也高，一般基因难以满足。
一种 ft mrna 分子植物砧穗间传递鉴定方法

[实用新型]一种水果提质保鲜的冷藏装置-CN201922008559.X有效
发明人：谭冬梅;王爱德;袁晖;尹赜鹏;刘志;李天忠;宋国柱 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2019-11-19 - 公布日： 2020-06-12 - 主分类号： F25D11/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种水果提质保鲜的冷藏装置，包括冷藏柜，所述冷藏柜内设有冷藏室，所述冷藏柜的一侧壁上对称转动连接有两个柜门，两个所述柜门远离冷藏室的一侧壁上均设有把手，所述冷藏室内呈等间距设有多个置物板。本实用新型在需要从冷藏室内取出少量水果时，仅需打开相应位置的窗门即可在不打开柜门的情况下将水果取出，由于不需要打开柜门，而且打开窗门时打开面积也很小，因此在拿取水果的过程中，冷藏室内冷气的逸出量非常少，能够有效的减少不必要的能耗，并能通过定期向冷藏室内补水，提升冷藏保鲜水果的质量，防止水果在长时间冷藏的过程中因失水而变得干瘪。
一种水果质保冷藏装置

[发明专利]一种苹果花柱S-RNase的高效纯化方法-CN201910566320.6有效
发明人： 李天忠;李洋;吴传宝;于杰;刘春生 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2019-06-27 - 公布日： 2020-06-02 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明涉及一种苹果花柱S‑RNase的高效纯化方法，摘取苹果大气球期至盛花期的花朵，将花柱组织摘取后速冻，花柱组织放置在1.5ml EP管中，丙酮浸没，玻璃杵在避免空气接触的情况下磨碎花柱组织，脱去色素，沉淀用蛋白提取Buffer重悬，0.22μm硝酸纤维素膜过滤杂质后上阳离子交换柱，用Buffer A洗阳离子交换柱后高盐梯度洗脱，即可获得高纯度的S‑RNase蛋白。本发明提供了高效获得苹果花柱内源S‑RNase蛋白的方法，缩短了纯化时间，提高了蛋白得率。本发明提供的方法可以提高苹果自交不亲和性分子机制的研究效率，推动苹果自交不亲和性的研究进程，最终服务苹果育种。
一种苹果花柱 rnase 高效纯化方法

[发明专利]四种梨病毒病病原实时荧光定量PCR检测方法-CN202010016904.9在审
发明人：程玉琴;姜峰;黄闻霆;马磊;郝理;李天忠 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2020-01-08 - 公布日： 2020-05-19 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及四种梨病毒病病原实时荧光定量PCR检测方法。根据GenBank公布的苹果茎沟病毒、苹果茎痘病毒、苹果褪绿叶斑病毒的CP基因和苹果锈果类病毒的全基因组的保守序列设计引物，建立了SYBR Green荧光定量PCR检测这四种病毒和进行阴阳性判断的方法。本发明的方法具有特异性强，检测准确，重复性好且成本低廉等特点。相比常规的逆转录聚合酶链式扩增反应检测技术，检测灵敏度提高100倍以上。
四种梨病毒病原实时荧光定量 pcr 检测方法

[发明专利]一种提取木本植物花粉管核蛋白的方法及其试剂盒-CN201710179402.6有效
发明人： 李天忠;顾钊宇;李威;杨清;李洋;于杰;刘春生 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2017-03-23 - 公布日： 2020-05-19 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明提供一种提取木本植物花粉管核蛋白的方法及其试剂盒。所述试剂盒中包括试剂A、试剂B和试剂C；所述试剂A中含有纤维素酶和离析酶，所述试剂B中含有Hepes、NaCl、MgCl2、NaF、PMSF和DTT，所述试剂C中含有丙三醇、TritonX‑100、DTT和PMSF。本发明以苹果花粉管为试材，通过收集、酶解花粉管壁后，进行核蛋白提取。采用本发明的方法可以提取大量、相对纯净的花粉管核蛋白，为直观鉴定木本植物花粉管内核蛋白的表达及定量提供技术体系。
一种提取木本植物花粉管核蛋白方法及其试剂盒

[实用新型]一种用于果园环境检测的远程监控装置-CN201921928469.6有效
发明人：王爱德;袁晖;谭冬梅;刘志;宋国柱;李天忠 -专利权人：沈阳农业大学
申请日： 2019-11-08 - 公布日： 2020-04-28 - 主分类号： H04L29/08 文献下载
摘要：本实用新型公开的属于远程监控技术领域，具体为一种用于果园环境检测的远程监控装置，包括底座、电动伸缩杆、数据箱、图像采集装置，通过设置有土壤温湿度传感装置、风速传感装置、光照强度传感装置和图像采集装置，能够对果园内土壤温湿度、风速、光照强度和植物生长情况图像进行采集，并通过控制器传输给外界终端进行显示，能够方便进行远程观察果园内环境，更加方便，通过设置有太阳能充电板，能够将外界的光能转换为电能为该装置进行供电，替代了传统的使用外接电源的方式，更加节能、环保，通过设置有信号增强模块，能够在向外界终端传输数据时对信号进行增强，避免因信号不好而导致信息传输较慢，从而影响工作效率，提高了实用性。
一种用于果园环境检测远程监控装置

[发明专利]一种杜梨的扦插育苗方法-CN201911138635.7在审
发明人：姜峰;王宝安;李天忠;王圣元;孙玉现 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2019-11-20 - 公布日： 2020-04-21 - 主分类号： A01G2/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种杜梨的扦插育苗方法，包括如下步骤：步骤⑴准备扦插苗床；步骤⑵插条预处理；步骤⑶扦插；步骤⑷扦插后管理；步骤⑸炼苗移栽。采用本发明所述方法得到的扦插枝条生根效果好，侧根较多、根系质量好，所得幼苗合格率高，生长状况整齐一致，有效的提高了杜梨扦插成活率，为将扦插技术应用于杜梨实际生产打下坚实基础。
一种杜梨扦插育苗方法