本申请涉及一种用于对28种HPV亚型进行单管分型检测的组合物及试剂盒。该组合物包括检测结果采用熔解曲线进行判读的引物组合物和检测结果采用扩增曲线进行判读的引物探针组合物;引物组合物中包括18对上、下游引物;所述18对上、下游引物的碱基序列分别如SEQ ID NO:1~36所示;引物探针组中包括1条通用上游引物、1条通用下游引物和10条探针;所述1条通用上游引物的碱基序列如SEQ ID NO:37所示,1条通用下游引物的碱基序列分别如SEQ ID NO:38所示,10条探针的碱基序列分别如SEQ ID NO:41~50所示。利用该特异性组合物,可以一管检测28种不同的HPV病毒亚型,实现实时荧光PCR扩增检测技术与熔解曲线技术的联合分析,检测通量高、特异性强、耗时短且灵敏度高。