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[发明专利]一种蛇足石杉离体组织培养、繁殖与保存的方法-CN201910127856.8有效
发明人：罗向东;杨燕;戴亮芳;董丽敏;陈雅玲;谢建坤 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2019-02-20 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛇足石杉离体组织培养、繁殖与保存的方法，建立了蛇足石杉组织培养过程中最佳快速繁殖体系，包括最适宜的外植体的选择方法，高效的多重灭菌方法；解决了不同基因型的蛇足石杉离体生长繁殖与保存等关键技术问题，最终实现蛇足石杉在短时间内大量、快速、高质量的繁殖与保存。本发明可离体再生来源不同省份、不同基因型的蛇足石杉，离体的蛇足石杉组织能产石杉碱甲。这可以有效地满足人们对蛇足石杉日益增长的需求，进而减少人们对野生蛇足石杉的破坏，有利于野生蛇足石杉的保护，具有巨大的科研价值、经济价值和生态价值。
一种蛇足石杉离体组织培养繁殖保存方法

[发明专利]一种建立农杆菌介导蛇足石杉叶状体遗传转化体系的方法-CN202010806996.0有效
发明人：罗向东;白李唯丹;戴亮芳;董丽敏;涂艺声 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2020-08-12 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种建立农杆菌介导蛇足石杉叶状体遗传转化体系的方法，蛇足石杉叶状体遗传转化体系包括预培养、浸染、共培养、推迟筛选、筛选、叶状体增殖和阳性植株的鉴定步骤，通过农杆菌介导向蛇足石杉叶状体中转入pBI121表达载体，pBI121连接了GUS基因和抗潮霉素基因。本发明方法不仅包括得到转基因植株的步骤，还包括对转基因植株的验证，形成了完整的转基因体系，为蛇足石杉基因功能组学的研究和育种奠定基础，同时也对后续的基因工程研究奠定了重要基础，从而培育出高产石杉碱甲的蛇足石杉新资源。
一种建立杆菌蛇足叶状遗传转化体系方法

[发明专利]一种濒危羊踯躅离体组织培养繁殖与保存的方法-CN201610012027.1有效
发明人：罗向东;刘梦露;戴亮芳;刘李珠;杨雪琴;余尚耘 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2016-01-09 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种濒危羊踯躅离体组织培养繁殖与保存的方法，建立了羊踯躅组织培养过程中最佳快速繁殖体系和保存体系，包括最适宜的外植体的选择方法，高效的多重灭菌方法，羊踯躅离体生长繁殖与保存的最适宜培养基组份以及不定芽生根、驯化移栽条件的控制等关键技术问题，最终实现羊踯躅在短时间内大量、快速、高质量的繁殖。本发明可使羊踯躅试管苗的分化率达到达100％，不定芽增殖系数月增殖倍数达8‑10.5，40d后生根率和驯化成活率均在85％以上。这可以有效地满足人们对羊踯躅日益增长的需求，进而减少人们对野生羊踯躅的破坏，有利于濒危野生羊踯躅的保护，具有巨大的科研价值、经济价值和生态价值。
一种濒危踯躅组织培养繁殖保存方法

[发明专利]一种濒危羊踯躅多态性SSR分子标记开发与应用的方法-CN201510883572.3有效
发明人：罗向东;程马龙;戴亮芳;田欢;谢建坤 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2015-12-04 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种濒危羊踯躅多态性SSR分子标记开发与应用的方法，利用简化基因组测序技术开发得到11,687对羊踯躅SSR分子标记，从中鉴定获得了16对多态性SSR分子标记，它们能够检测到羊踯躅基因组的SSR位点信息，其有效等位基因数范围为3‑15个，杂合度(He)范围为0.489‑0.908。本发明提供一批可用于群体遗传学、系统发生学及保护生物学等研究的SSR引物，应用这些多态性SSR分子标记能评估分析濒危羊踯躅遗传多样性和遗传结构，为该物种的保护提供科学依据和参考。
一种濒危踯躅多态性 ssr 分子标记开发应用方法

[发明专利]羊踯躅提取物的抗癌活性检测方法及其应用-CN201910067474.0在审
发明人：罗向东;张金;陈敏娜;戴亮芳;刘见;宗露野 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2019-01-24 - 公布日： 2019-04-09 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明提供了羊踯躅提取物的抗癌活性检测方法及其应用。羊踯躅提取物的抗癌活性检测方法包括挖掘与检测羊踯躅提取物对不同癌细胞的抑制活性、羊踯躅提取物抑制癌细胞克隆形成的检测、羊踯躅提取物诱导细胞凋亡引起周期阻滞的分析、羊踯躅提取物对癌症凋亡及周期相关基因表达的分析等步骤。本发明为开发羊踯躅治疗癌症药物提供技术支持和科学依据。
羊踯躅提取物抗癌活性检测癌细胞诱导细胞凋亡治疗癌症药物技术支持相关基因周期阻滞凋亡应用癌症分析克隆挖掘开发

[发明专利]一种羊踯躅提取物的抗炎活性检测方法和应用-CN201810848571.9在审
发明人：罗向东;张金;戴亮芳;刘见;董丽敏;谢建坤 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2018-07-28 - 公布日： 2019-01-04 - 主分类号： G01N33/50 文献下载
摘要：本发明涉及羊踯躅提取物的抗炎活性检测方法和应用，包括建立羊踯躅提取物的制备方法，构建羊踯躅提取物抗炎活性细胞检测模型，建立羊踯躅提取物抑制炎症细胞中炎症因子及相关基因表达的分析方法。本发明结果显示，羊踯躅叶片甲醇提取物有较强的抗炎活性，能够明显抑制由脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7细胞中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子‑α(TNF‑α)和白介素1β(IL‑1β)等炎症因子的分泌及其基因的表达，也显著抑制炎症相关通路中两个关键酶基因iNOS和COX‑2的表达。
提取物羊踯躅抗炎活性白介素1 β 炎症因子肿瘤坏死因子关键酶基因甲醇提取物细胞检测相关基因炎症细胞一氧化氮脂多糖检测构建制备分泌叶片应用基因刺激分析

[发明专利]基于RAD-seq开发濒危羊踯躅SSR引物的方法-CN201510007534.1有效
发明人：罗向东;程马龙;戴亮芳;周艳超;谢建坤 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2015-01-08 - 公布日： 2018-08-10 - 主分类号： G06F19/22 文献下载
摘要：本发明提供一种基于RAD‑seq开发濒危羊踯躅SSR引物的方法。本发明包括构建羊踯躅基因组文库，经双末端测序及后续处理后获得Raw Data 7.653G，过滤后的Clean data 7.513G；利用cd‑hit‑est聚类软件对含有酶识别位点的reads进行聚类，将RAD测序时Reads2捕获一致的区域聚在一起；Reads2之间最多允许3个碱基的错配，通过Reads2的序列相似性把RAD‑tag相近的reads聚集到一个类中，用VelvetOptimiser组装软件对筛选过后的每类测序数据进行局部组装，最终从中挑取最好的congtig用于SSR收索；contig过滤后共得到11,961个可用于之后设计SSR引物的SSR片段；用Primer3设计SSR引物，应用本方法成功设计了11,687对SSR引物；从中随机选取60对引物对来源于不同地理分布的6份羊踯躅DNA进行多态性检测。为羊踯躅ssR引物开发提供了新思路。
基于 rad seq 开发濒危踯躅 ssr 引物方法

[实用新型]一种实用型培养基分装器-CN201420789397.2有效
发明人：罗向东;赵俊;戴亮芳;程马龙;谢建坤 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2014-12-15 - 公布日： 2015-06-17 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：一种实用型培养基分装器，分装器杯体的侧壁底端开有出液孔，所述出液孔连接可插拔的液体供应管，液体供应管上设有可调式手动控制阀。本实用新型的技术效果是：（1）采用本装置配制培养基不需预先熬制熔化琼脂粉，而是依靠搅拌装置的持续搅拌，使常温下不溶解的琼脂粉分散均匀；（2）本装置安装了可调式定量加液阀门，可实现培养基的连续定量分装，（3）配制培养基时营养成分不易被破坏和流失，实验更精确。（4）配制培养基的流程简单、省时、节能、高效。
一种实用型培养基分装

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