本发明属于基因工程领域,具体涉及一种调控甘蓝型油菜粒色的转基因表达载体及其构建方法和应用,所述甘蓝型油菜粒色的转基因表达载体为RNAi‑BnMYB47转基因表达载体,所述RNAi‑BnMYB47转基因表达载体的RNAi片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,通过克隆BnMYB47基因的RNAi片段,然后与pFGC5941M质粒连接、转化并抽提质粒制得。本发明所提供的BnMYB47基因的RNAi片段和表达载体可应用于调控甘蓝型油菜粒色,克服了甘蓝型油菜粒色性状不稳定,难以获得稳定的黄籽油菜育种的困难,为获得稳定遗传的甘蓝型油菜转基因黄籽新种质材料创造了条件,对油菜黄籽育种和对基因工程进行油菜品质的遗传改良和育种实践具有重要指导意义。