本发明属于蛋白的基因工程领域,具体涉及一种响应肿瘤酸度的谷糠胰蛋白酶抑制剂融合肽及其应用。本发明设计的融合肽pFBTI的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该融合肽pFBTI由响应肿瘤酸度的低pH插入肽(pHLIP)和具有抗肿瘤活性的谷糠胰蛋白酶抑制剂FMB‑BBTI两部分组成,本发明首次构建并成功原核表达具有响应肿瘤酸度的谷糠胰蛋白酶抑制剂FMB‑BBTI(pFBTI),该融合肽能够特异性地靶向肿瘤酸性微环境,进而在三阴乳腺癌细胞内发挥抗肿瘤活性。研究结果证明,pFBTI通过抑制细胞活力、细胞增殖及使细胞凋亡发挥显著的抗三阴乳腺癌活性,有潜力进一步开发为抗三阴性乳腺癌的相关医药产品。