本发明公开了一种基于蛋白定向进化的快速热启动酶及其应用，涉及体外检测生物技术领域。本发明提供的基于蛋白定向进化的快速热启动酶，在SEQ ID NO.1所示的序列中，具有下述的一个或多个氨基酸位置上的氨基酸取代：第59位、第339位、第459位、第507位、第515位、第626位、第638位、第688位、第707位、第708位、第743位、第749位。实验证明，本发明提供的基于蛋白定向进化的快速热启动酶在qPCR条件下扩增速度不低于1kb/3s，延伸5s的扩增性能不低于野生型延伸30s，解决了Taq酶在扩增时延伸时间长的问题，在不影响qPCRCt的情况下减少整体扩增时间；比市场上其他Taq酶能更快的完成诊断时间。
本发明提供了一种ZnT8重组蛋白及其制备方法和应用，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，本发明通过分析筛选目的片段、优化编码序列和载体，转染Expi 293真核细胞，稳定表达具有抗原活性的蛋白，提供了一种既能保留天然蛋白的生物活性又能降低生产成本的制备方法，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。
