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[发明专利]五龙鹅的融合催乳素主动免疫提高产蛋率的方法-CN201510106534.7在审
发明人：李明义;刘阳;李晓林;李彦凤;赵航 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2015-03-12 - 公布日： 2015-05-27 - 主分类号： A61K39/00 文献下载
摘要：本发明公开了五龙鹅的融合催乳素主动免疫提高产蛋率的方法，包括以下步骤：（1）cRNA第一链合成及扩增；（2）PRL原核表达载体的建立、筛选和鉴定；(3)重组PRL蛋白诱导表达及破碎；（4）重组PRL蛋白的SDS-PAGE检测及浓度测定；(5)重组PRL蛋白纯化、回收；(6)重组PRL蛋白注射针剂制备；(7)主动免疫及观察记录。本发明可提高五龙鹅的就巢性和产蛋率，进而可提高五龙鹅的生产性能和市场价值。
五龙鹅融合催乳素主动免疫提高产蛋率方法

[发明专利]一种鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白初步纯化方法-CN201410812737.3在审
发明人：李明义;单学强;刘阳;李晓林;赵航 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2014-12-24 - 公布日： 2015-05-06 - 主分类号： C07K14/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白初步纯化方法，包括以下步骤：(1)菌体处理；(2)向上清中添加硫酸铵至20％饱和度，冰上搅拌至硫酸铵完全溶解静置过夜后，8000rpm，在4℃温度下离心15min，收集上清；(3)向步骤2的上清中加入硫酸铵至50％饱和度，冰上搅拌至硫酸铵完全溶解静置过夜后，8000rpm，在4℃温度下离心15min，收集沉淀；(4)真空干燥，之后即为获得的重组鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白。本发明的提供一种操作简单、成本低廉的方法。
一种传染性法氏囊病毒 vp2 蛋白初步纯化方法

[发明专利]一种检验原儿茶酸可溶性粉在禽病治疗方面应用的新方法-CN201410811749.4在审
发明人：李朝阳;赵锋祥;乔彦良;马广斌;李广森;吴庆海;薛希娟 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2014-12-23 - 公布日： 2015-04-22 - 主分类号： A61K31/192 文献下载
摘要：本发明提供了一种检验原儿茶酸在禽病治疗方面评价应用的新方法，包括以下步骤：(1)原儿茶酸可溶性粉的稀释得到至少两种稀释度原儿茶酸可溶性粉稀释液；(2)所述原儿茶酸可溶性粉稀释液与禽病毒混合作用得到至少两种混合物；(3)将所述至少两种混合物置37℃作用30-60min，每隔5min轻轻摇动一次；(4)将步骤(3)中所述至少两种混合物接种于9-10日龄无特定病原体SPF鸡胚，每个稀释度6-10枚，0.2ml/枚；(5)接种好的SPF鸡胚置于孵化箱中培养，每日观察鸡胚死亡情况，检测HA，做出详细统计，本方法操作简单易行，成本较低，省去人工饲养试验鸡的繁琐工作。
一种检验儿茶可溶性治疗方面应用新方法

[发明专利]鸭病毒性肝炎精制蛋黄抗体的制备方法-CN201410815354.1在审
发明人：李朝阳;赵锋祥;乔彦良;吴庆海;薛希娟 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2014-12-23 - 公布日： 2015-04-22 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明提供鸭病毒性肝炎精制蛋黄抗体的制备方法，包括以下步骤：分离鸭病毒性肝炎毒株和制备灭活疫苗；所述灭活疫苗免疫无病产蛋鸡群得到高免蛋，分离蛋黄后经酸化处理、辛酸处理、离心、板框过滤、灭活、超滤、配液、过滤除菌后得到鸭病毒性肝炎精制蛋黄抗体。将鸭病毒性肝炎1型和鸭病毒性肝炎3型毒株单独做苗，分开免疫健康产蛋鸡群，避免了两种抗原在同一机体中的免疫应答竞争影响的因素，每种血清型的抗体效价单独控制，避免因一种血清型抗体效价不高时，再次免疫二联疫苗对另一种血清型抗原造成免疫耐受的后果。该技术得到了无类脂物质、无任何外源微生物污染的高效价精制蛋黄抗体。
病毒性肝炎精制蛋黄抗体制备方法

[发明专利]一种噬菌体展示表达圆环病毒抗原疫苗的制备方法-CN201410515139.X在审
发明人：李明义;高江明;刘阳;李晓林;单学强;张伦;冯晶晶;李佳棋;孙化露;葛栋;郭春丽 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2014-09-29 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： A61K39/12 文献下载
摘要：本发明提供一种噬菌体展示表达圆环病毒抗原疫苗的制备方法，包括以下步骤：提取猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)RNA，反转录，聚合酶链式反应(PCR)扩增获取猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因开放阅读框片段，并铆定定向插入T4噬菌体；利用免疫筛选的方法获取具有ORF2基因的T4噬菌体；经纯化后重新侵染X-Blue ST1(CCTCC M 2014397)宿主细胞；发酵培养获得的X-BlueST1宿主细胞，诱导表达灭活后培养物作为抗原；ELISA标定抗原效价，并用生理盐水倍比稀释抗原终浓度为10⁷U/ml；1:2.5的比例加入疫苗佐剂，即为疫苗。本发明利用噬菌体表达猪圆环病毒Ⅱ型抗原并制备疫苗，避免了弱毒疫苗毒力返强风险，且采用发酵培养利于大规模工业化生产，成本远低于通过细胞培养的方式生产疫苗。
一种噬菌体展示表达圆环病毒抗原疫苗制备方法

[发明专利]抗鸡新城疫病毒特异性转移因子及口服液制备方法和用途-CN201310539580.7无效
发明人：薛希娟;李朝阳;乔彦良;吴庆海;赵锋祥 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2013-11-04 - 公布日： 2014-02-26 - 主分类号： A61K35/28 文献下载
摘要：本发明提供了一种抗鸡新城疫病毒特异性转移因子的制备方法，包括：选择健康鸡作为实验鸡进行新城疫灭活疫苗强化免疫；监测实验鸡体内新城疫病毒疫苗免疫抗体水平，在抗体水平达到28～29时，无菌取实验鸡的脾脏；处理所述鸡的脾脏得到抗鸡新城疫病毒特异性转移因子。本发明的抗鸡新城疫病毒特异性转移因子可以提高鸡体对新城疫病毒抗原的特异性免疫效应，能保护正常机体细胞免受病毒感染，因此使用本发明的转移因子可以起到预防鸡新城疫病毒感染，保护正常机体细胞免受鸡新城疫病毒侵害的作用，从而降低发病率；同时对于遭到鸡新城疫病毒感染的鸡使用转移因子进行治疗，可有效的改善临床症状，提高治愈率，降低死亡率。
新城疫病特异性转移因子口服液制备方法用途

[发明专利]适应鸡新城疫病毒增殖的BHK细胞系的建立方法及其应用-CN201310120764.X无效
发明人：李明义;陈欢;刘阳;冯晶晶;单学强;张伦;郭春丽;李佳琪 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2013-04-02 - 公布日： 2013-10-02 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种适应鸡新城疫病毒增殖的BHK细胞系的建立方法以及在鸡新城疫病毒的增殖中的应用。本发明通过改进新城疫病毒培养方式、优化培养参数、筛选传代细胞，建立传代细胞疫苗生产工艺，生产工艺流程将大大简化，生产过程更加可控。
适应新城疫病增殖 bhk 细胞系建立方法及其应用

[发明专利]一种猪脾转移因子注射液的制备方法-CN201310136476.3有效
发明人：李朝阳;乔彦良 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2013-04-18 - 公布日： 2013-07-24 - 主分类号： A61K38/19 文献下载
摘要：一种猪脾转移因子注射液的制备方法，包括：将检验合格的猪脾脏预处理后，初绞1～3遍；将初绞的猪脾脏精绞研磨1.5～8分钟，制成匀浆；在所述匀浆中加入甲醛溶液灭活；将灭活的匀浆反复冻融6～10次；将反复冻融的匀浆经离心分离、过滤与超滤，得到半成品；向检验合格的半成品中加入注射用水，得到成品。本发明工艺简单，成本低，可大大缩短生产周期，周期为4天，节省了大量的人力物力，提高了转移因子的生产效率。
种猪转移因子注射液制备方法

[发明专利]一种提取ε-聚赖氨酸的方法-CN201310087351.6无效
发明人：李朝阳;李常青;乔彦良 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2013-03-18 - 公布日： 2013-06-19 - 主分类号： C08G69/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种提取ε-聚赖氨酸的方法，将发酵液经硅藻土吸附后离心得到清滤液，然后将清滤液碱化再加入树脂吸附柱中进行吸附，经洗涤饱和树脂、解析，得解析液，用活性炭将解析液脱色，过滤、浓缩，后经喷雾干燥或结晶干燥即得ε-聚赖氨酸纯品。本发明所用原料、仪器取材容易，工艺简单，成本低；所得产品收率高，纯度高。
一种提取赖氨酸方法

[发明专利]一种治疗畜禽细菌性疾病的药物及其制备方法-CN201310082473.6有效
发明人：李朝阳;杨小勇;孙娟 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2013-03-14 - 公布日： 2013-06-12 - 主分类号： A61K38/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种治疗畜禽细菌性疾病的药物及其制备方法，每100mL所述药物中含有抗菌肽0.5～2.0g，质量比为1:1～1:4的泊洛沙姆407和泊洛沙姆188共0.2～1.0g，三乙醇胺0.3-1.2g，甘油1.5～3.5g，吐温-80为1.0-3.0g，二叔丁基羟基甲苯0.01-0.03g，尼泊金乙酯0.01～0.03g和蒸馏水。本发明制备的药物药效迅速、持久，缓释效果好，剂量容易控制。
一种治疗畜禽细菌性疾病药物及其制备方法

[发明专利]一种表达猪传染性胃肠炎病毒基因工程菌菌种-CN201210525750.1无效
发明人：李朝阳;李明义;石乔 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2012-12-07 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达猪传染性胃肠炎病毒基因工程菌菌种，它是保藏在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为乳酸乳球菌 MG1363/pMG36e-S CCTCC M 2012355。乳酸乳球菌是人和大多数动物肠道内的常见细菌，本身具有抑菌抗菌、抗腹泻等特点，可以广泛开展活菌口服疫苗研究。本发明构建成的重组乳酸乳球菌MG1363/pMG36e-S能稳定可靠的表达具有活性的TGEV的S蛋白；该重组菌可用来生产基因工程亚单位疫苗和基因工程活载体疫苗，用于TGE的预防提供一个新方法；生产成本较低。
一种表达传染性胃肠炎病毒基因工程菌种

[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒基因工程亚单位口服疫苗的制备方法-CN201210509320.0有效
发明人：李朝阳;李明义;石乔 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2012-12-04 - 公布日： 2013-03-27 - 主分类号： A61K39/215 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒基因工程亚单位口服疫苗的制备方法，包括以下步骤：1)合成M基因；2)表达载体的构建；3)蛋白的诱导表达；4)重组菌保存实验；5)疫苗的制备。口服免疫的优点是可有效地刺激肠道局部免疫细胞产生分泌型IgA，这尤其适应于肠道粘膜传染病，避免了常规注射疫苗所引起的应激及疫苗吸收问题，作为安全无毒，能在肠道粘膜定居的活载体系统，乳酸乳球菌是最合适的载体系统。口服疫苗通过胃肠黏膜进行抗原递呈，经不同的免疫通路产生与常规注射类似的免疫反应。
种猪流行性腹泻病毒基因工程单位口服疫苗制备方法

[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒基因工程亚单位口服疫苗-CN201210509229.9无效
发明人：李朝阳;李明义;石乔 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2012-12-04 - 公布日： 2013-03-27 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒基因工程亚单位口服疫苗，它是保藏在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为乳酸乳球菌 MG1363/pMG36e-M CCTCC M 2012354。口服免疫的优点是可有效地刺激肠道局部免疫细胞产生分泌型IgA，这尤其适应于肠道粘膜传染病，避免了常规注射疫苗所引起的应激及疫苗吸收问题，作为安全无毒，能在肠道粘膜定居的活载体系统，乳酸乳球菌是最合适的载体系统。口服疫苗通过胃肠黏膜进行抗原递呈，经不同的免疫通路产生与常规注射类似的免疫反应。
种猪流行性腹泻病毒基因工程单位口服疫苗

[发明专利]一种猪II型圆环病毒ORF2蛋白的制备方法-CN201210509316.4无效
发明人：李朝阳;李明义;石乔 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2012-12-04 - 公布日： 2013-03-27 - 主分类号： C12N15/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪II型圆环病毒ORF2蛋白的制备方法，将编码PCV2核衣壳蛋白的Cap基因连接到pET-28a(+)质粒上构建成表达质粒pET-28-Cap，转化BL21(DE3)感受态细胞，得到基因工程菌种pET-28-Cap/BL21。通过诱导表达及检测表明该重组蛋白具有良好的反应原性。可进一步用来作为诊断抗原或制备亚单位疫苗。产物在大肠杆菌中以可溶性形式表达，表达量大且避免了蛋白变性再复性的繁琐过程，降低了蛋白的损耗和生产成本。
种猪 ii 圆环病毒 orf2 蛋白制备方法

[发明专利]一种表达猪传染性胃肠炎病毒基因工程菌制备方法-CN201210525749.9无效
发明人：李朝阳;李明义;石乔 -专利权人： 山东信得科技股份有限公司
申请日： 2012-12-07 - 公布日： 2013-03-13 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达猪传染性胃肠炎病毒基因工程菌制备方法，包括以下步骤：1).总RNA的提取；２).S基因的克隆；３).表达载体的构建。乳酸乳球菌是人和大多数动物肠道内的常见细菌，本身具有抑菌抗菌、抗腹泻等特点，可以广泛开展活菌口服疫苗研究。本发明构建成的重组乳酸乳球菌MG1363/pMG36e-S能稳定可靠的表达具有活性的TGEV的S蛋白；该重组菌可用来生产基因工程亚单位疫苗和基因工程活载体疫苗，用于TGE的预防提供一个新方法；生产成本较低。
一种表达传染性胃肠炎病毒基因工程制备方法

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