本发明公开了7α‑羟基类固醇脱氢酶及其编码基因与应用。本发明所提供的7α‑羟基类固醇脱氢酶其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，还公开了所述的7α‑羟基类固醇脱氢酶的基因的核苷酸序列SEQ ID NO.2所示。该7α‑羟基类固醇脱氢酶能够催化底物牛磺胆酸(TCA)生成牛磺7‑酮胆酸(T7K‑CA)、催化底物甘氨胆酸(GCA)生成甘氨7‑酮胆酸(G7K‑CA)、催化底物牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)生成牛磺7‑酮石胆酸(T7K‑LCA)、催化底物甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA)生成甘氨7‑酮石胆酸(G7K‑LCA)、催化底物苯甲酰甲酸乙酯(Ethyl benzoylformate，EB)生成苯甲醇甲酸乙酯(Ethyl 2‑hydroxy‑2‑phenylacetate)，并且具有更好的催化活性，对TCDCA、GCDCA、EB的催化活性分别为撒丁岛梭菌7α‑HSDH的10倍、5倍、3倍，具有很大的工业应用价值。
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种撒丁岛梭菌7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体K179M，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，是核酸序列为SEQ ID NO：1的7α‑羟基类固醇脱氢酶的第179位氨基酸由赖氨酸变为甲硫氨酸所得。该突变体对TCDCA的催化比活力是野生型的2.9倍。本发明的K179M突变体在生物转化TCDCA获得TUDCA的工业生产过程中具有巨大的应用潜力。
本发明涉及羟基类固醇脱氢酶，具体涉及一种7α‑羟基类固醇脱氢酶基因S1‑a‑2。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码一种7α‑羟基类固醇脱氢酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，能够催化鹅去氧胆酸(CDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)生成7‑酮石胆酸(7K‑LCA)、牛磺7‑酮石胆酸(T7K‑LCA)，对CDCA或TCDCA的催化活性约为撒丁岛梭菌7α‑HSDH的2倍，具有很大的工业应用价值。
本发明涉及羟基类固醇脱氢酶，具体涉及一种7α‑羟基类固醇脱氢酶基因S1‑a‑1。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码一种7α‑羟基类固醇脱氢酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，能够催化鹅去氧胆酸(CDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)生成7‑酮石胆酸(7K‑LCA)、牛磺7‑酮石胆酸(T7K‑LCA)，其中对CDCA的催化活性约为撒丁岛梭菌7α‑HSDH的5倍，对TCDCA的催化活性约为撒丁岛梭菌7α‑HSDH的2.5倍多，具有巨大的工业应用价值。
本发明涉及羟基类固醇脱氢酶，具体涉及一种7α‑羟基类固醇脱氢酶基因Y1‑a‑1。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码一种7α‑羟基类固醇脱氢酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，能够催化鹅去氧胆酸(CDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)生成7‑酮石胆酸(7K‑LCA)、牛磺7‑酮石胆酸(T7K‑LCA)，对CDCA或TCDCA的催化活性为现有撒丁岛梭菌7α‑HSDH的2倍多，具有很大的工业应用价值。
