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[发明专利]一种调控硬基质上细胞力测定灵敏度的方法-CN202310292727.0在审
发明人： 周铁安;黄靓圆;周珍;李文蔚;潘炜松;黄复深;谭成方;李智;张健;韩雪飞;杨绥 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2023-03-23 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： G01N33/483 文献下载
摘要：本发明公开了一种调控硬基质上细胞力测定灵敏度的方法。所述方法包括如下步骤：（1）在AT切石英晶体和BT切石英晶体表面被上纳米层厚度导电薄膜，所述导电薄膜材料为与细胞生物相容的金等金属材料及既导电又透明、允许光学显微镜观察的ITO材料；(2)在石英晶体白片或导电薄膜上修饰促进细胞黏附的材料；所述AT切石英晶体与BT切石英晶体具有相同频率、表面形态和/或修饰了相同的表面黏附分子；（3）将步骤（2）修饰后的AT切与BT切石英晶体置于检测池内，将待测定的内片细胞或原代心肌细胞放入检测池，通过公式测定不同厚度导电薄膜下内皮细胞粘附过程所产生的细胞牵引力或原代心肌细胞搏动时伴随的细胞收缩和舒张力△St。
一种调控基质细胞测定灵敏度方法

[发明专利]一种测定原代心肌细胞的力学搏动性能的方法-CN202211708695.X在审
发明人： 周铁安;周珍;李嘉丽;彭涵阁;陈芷卉;涂博轩;郑浩楠;霍静怡;黄复深 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2022-12-29 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： G01N33/487 文献下载
摘要：本发明公开了一种测定原代心肌细胞搏动力学性能的方法。所述方法包括如下步骤：(1)对由AT切石英晶体和BT切石英晶体表面的导电薄膜修饰促进心肌细胞黏附与搏动的材料；所述导电薄膜材料为与心肌细胞生物相容的金等金属材料及既导电又透明、允许光学显微镜观察的ITO材料；所述促进心肌细胞黏附与搏动的材料为细胞外基质材料与分子，如纤粘连蛋白、胶原，细胞外基质模拟材料或分子，如明胶、RGD黏附多肽、聚赖氨酸等；所述AT切石英晶体与BT切石英晶体具有相同频率、表面形态和/或修饰了相同的表面黏附分子；(2)将步骤(1)修饰后的金电极或ITO电极置于检测池内，检测池内装有心肌细胞培养基，将待测定的原代心肌细胞放入检测池，通过公示测定原代心肌细胞的如下力学搏动性能：细胞收缩和舒张力△St、细胞存储模量G′与细胞损耗模量G″、细胞粘弹性指数CVI。
一种测定心肌细胞力学搏动性能方法

[发明专利]一种基于双谐振压电技术鉴别细胞焦亡与凋亡的细胞力学方法-CN202211709846.3在审
发明人：李文蔚;周铁安;吴艳阳;李静;范训安 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2022-12-29 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： G01N27/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于双谐振压电技术鉴别细胞焦亡与凋亡的细胞力学方法。本发明通过石英晶体微天平技术实时监测粘附于AT切、BT切双切型石英晶体芯片表面的、无明显细胞‑细胞间相互作用的HeLa和HUVECs细胞群在发生焦亡、凋亡全过程中引起的石英晶体频率、电阻变化，从而测得HeLa和HUVECs细胞焦亡、凋亡过程中细胞群对石英晶体施加的表面应力的实时变化，建立了通过细胞力学响应差异鉴别细胞焦亡与凋亡的方法。
一种基于谐振压电技术鉴别细胞力学方法

[发明专利]一种稳定共表达CACNA2D1、GRIN1和GRIN2B的人胚肾细胞株及其构建方法-CN201911296184.X有效
发明人：陈金军;唐威;杨圣梅;潘惠麟;张学文;周铁安 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2019-12-17 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种稳定共表达CACNA2D1、GRIN1和GRIN2B的人胚肾细胞株及其构建方法，所述人胚肾细胞株的分类命名为人胚肾细胞系HEK293T‑NMDAR‑α2δ1，所述人胚肾细胞株能同时稳定表达CACNA2D1、GRIN1和GRIN2B三个基因，所述CACNA2D1的基因序列如SEQ ID NO.1所示，所述GRIN1的基因序列如SEQ ID NO.2所示，所述GRIN2B的基因序列如SEQ ID NO.3所示。本发明应用慢病毒感染技术构建了一种人胚肾细胞株，其构建方法简单，构建的人胚肾细胞株可同时表达CACNA2D1、GRIN1和GRIN2B三种基因，为研究CACNA2D1、GRIN1和GRIN2B三种基因在神经性疼痛的发病机理中的研究提供基本而有力的工具；且该人胚肾细胞株可作为模型在模拟病理条件下形成α2δ‑1‑NMDAR复合物，用于α2δ‑1‑NMDAR复合物的分子机制研究。
一种稳定表达 cacna2d1 grin1 grin2b 人胚肾细胞株及其构建方法

[发明专利]一种用于影响心肌细胞收缩或舒张的药物及其测定方法-CN202111523713.2在审
发明人：周珍;周铁安;陈芷卉;霍静怡;张笑雨;朱云龙 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2021-12-14 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： A61K36/752 文献下载
摘要：本发明属于药物测定技术领域，公开了一种用于影响心肌细胞收缩或舒张的药物及其测定方法，本发明提供的用于影响心肌细胞收缩或舒张的药物效果好，反应明显；同时，本发明提供的测定方法可以对细胞黏附过程及包括药物等作用下细胞牵引力的实时、连续、动态测定，依据的是对高频AT与BT切石英晶体频率的监测，无需使用光学显微镜，测量的为数字频率信号，采样速度快(可达0.1秒一组数据)。本发明可适用于不同细胞数目或不同细胞‑细胞作用下细胞群总的牵引力大小与方向的定量测定。
一种用于影响心肌细胞收缩舒张药物及其测定方法

[发明专利]高通量压电谐振芯片及测量系统-CN201610881227.0有效
发明人： 周铁安;沈海波;苏招红;赵文魁;潘炜松;胡家金;赵立军;徐鹏飞;张健;张琳琳;韩雪飞 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2016-10-09 - 公布日： 2019-12-27 - 主分类号： H03H9/205 文献下载
摘要：本发明公开了一种高通量压电谐振芯片及其测量系统。该高通量压电谐振芯片制备方法包括一基片(108)，基片上置入多个压电谐振片(101)，各压电谐振片用相同批次材料和工艺制作而成，各压电谐振片的上、下两面分别经铬或钛粘附层(102)连接工作电极(103)及背面电极(104)，工作电极及背面电极的一端经低温导电银胶(105)与接口端子(107)连接，且各压电谐振片周围使用柔性粘合层(106)连接基片。本发明不仅可消除压电谐振片之间的干扰，且可消除或大大减小安装过程中产生的应力与阻尼，从而实现稳定性高、灵敏度高、操作简便、精度较高、免标记、连续监测、无相互干扰高通量压电谐振传感器的制造。
通量压电谐振芯片制备方法测量系统

[发明专利]一种超薄生物质碳的制备方法-CN201710636104.5有效
发明人：苏招红;徐孝林;赵艳;李瑞莲;周铁安;王辉宪;蒋红梅 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2017-07-31 - 公布日： 2019-10-01 - 主分类号： C01B32/05 文献下载
摘要：本发明涉及一种超薄生物质碳的制备方法，其包括步骤为：将能催化碳低温石墨化的金属离子盐加水溶解，加入到经悬浮培养得到的植物细胞或经酶解得到的植物原生质体中，然后在惰性气氛保护下于高温炉中加热处理，将高温处理得到的产物经酸洗、过滤、烘干得到超薄生物质碳。本发明方法工艺简单、原料来源广泛且制备简单、成本低、易于实现超薄生物质碳规模化和工业化生产。
生物质碳制备惰性气氛保护植物原生质体低温石墨化金属离子盐热处理高温处理悬浮培养植物细胞高温炉规模化烘干加水酶解酸洗催化过滤溶解

[发明专利]一种细胞牵引力的实时与定量测定方法-CN201610755868.1有效
发明人： 周铁安;周珍;熊伦;鲍冬芹;黄复深;邬克彬;赵佳;黄靓园;洪彬 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2016-08-29 - 公布日： 2019-02-19 - 主分类号： G01N29/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞牵引力的实时与定量测定方法。所述方法是将AT切石英晶体与BT切石英晶体置于培养皿或检测池内，所述AT切石英晶体与BT切石英晶体具有相同频率、表面形态和/或修饰了相同的表面黏附分子；向培养皿或检测池中加入待测细胞，通过如下公式测定出细胞牵引力ΔS：ΔS＝(K_AT‑K_BT)^‑l[t_q^ATΔf^AT/fr^AT‑tq^BTΔf^BT/fr^BT]；式中，K_AT＝2.75×10^‑^l2cm²dyn^‑1，K_BT＝‑2.65×10^‑l2cm²dyn^‑1分别为AT切石英晶体与BT切石英晶体的应力系数；fr^AT为AT切石英晶体的谐振频率、fr^BT为BT切石英晶体的谐振频率，tq^AT为AT切石英晶体的厚度、tq^BT为BT切石英晶体的厚度，均为常数。tq^AT＝1.661/fr^AT；tq^BT＝2.536/fr^BT。
一种细胞牵引力实时定量测定方法

[发明专利]一种抗蛋白质粘附涂层的制备方法-CN201610853403.X有效
发明人： 周铁安;苏招红;马艳;张凤;张娜;宋东成;赵文魁 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2016-09-27 - 公布日： 2018-09-25 - 主分类号： C09D171/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种抗蛋白质粘附涂层的制备方法，其步骤为：合成PEG‑HQ；将PEG‑HQ分散在磷酸缓冲溶液中，得到PEG‑HQ的混合溶液；采用三电极体系对上述的PEG‑HQ混合液进行电聚合，得到PEG‑HQ的电化学聚合涂层，通过调控单体浓度、聚合圈数、聚合时间等参数得到不同厚度的聚PEG‑HQ涂层修饰的电极，即在工作电极上得到抗蛋白质粘附涂层。该制备方法的优点在于合成工艺简单温和、绿色、环保，快捷，而且抗蛋白质粘附涂层的厚度可以自由调控，并能应用于不同大小和几何形状的所有导电与半导体材料表面。
一种蛋白质粘附涂层制备方法

[发明专利]一种细胞牵引力与粘弹性的同时定量测定方法-CN201710398017.0有效
发明人： 周铁安;熊伦;周珍;黄靓圆;沈海波;黄复深;邬克彬;赵佳;洪彬 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2017-05-31 - 公布日： 2018-04-17 - 主分类号： G01N29/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞牵引力与粘弹性的同时定量测定方法。所述方法是将AT切石英晶体与BT切石英晶体置于培养皿或检测池内，所述AT切石英晶体与BT切石英晶体具有相同频率、表面形态和/或修饰了相同的表面黏附分子；向培养皿或检测池中加入待测细胞，通过如下公式(I)测定出细胞牵引力ΔSΔS＝(KAT‑KBT)‑l[tqATΔfAT/frAT‑tqBTΔfBT/frBT](I)，细胞粘弹性由如下公式(II)与(III)定量和/或由公式(IV)半定量表征。细胞存储模量G′＝π2Zq2(ΔR2/16π2Lq2‑Δf2)/ρliqfr2(II)，细胞损耗模量G″＝‑πZq2ΔfΔR/2Lqρliqfr2(III)，细胞粘弹性指数CVI＝ΔR/Δf(IV)。本发明可用于研究细胞处于不同内外环境激励下细胞力与粘弹性的动态变化规律，如药物的影响，药物可在细胞黏附前或黏附后加入。本发明适用于所有贴壁细胞，包括原代细胞与传代细胞。
一种细胞牵引力粘弹性同时定量测定方法

[发明专利]直接甲醇燃料电池电催化剂的制备方法-CN201510367588.9有效
发明人：苏招红;李朝荣;周文新;姜令芸;熊远福;周铁安 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2015-06-26 - 公布日： 2018-02-06 - 主分类号： B01J31/30 文献下载
摘要：本发明涉及一种直接甲醇燃料电池电催化剂的制备方法，包括步骤将导电聚合物复合材料和硫醇反应，得到巯基化的导电聚合物复合材料，其中导电聚合物复合材料为导电聚合物负载在碳载体上的复合材料，其中导电聚合物具有电子共轭结构；将巯基化的导电聚合物复合材料及金属盐在乙二醇中发生金属盐的还原反应，得到直接甲醇燃料电池电催化剂，其中直接甲醇燃料电池电催化剂为负载金属粒子的巯基化的导电聚合物复合材料。该制备方法利用巯基化的导电聚合物复合材料原位还原金属盐，操作步骤简单，效率高，绿色环保，提高了金属粒子的分散性和稳定性，其金属颗粒分散性高、粒径小为2‑5nm，可用于直接甲醇燃料电池，且具有高电活性和高稳定性。
直接甲醇燃料电池催化剂制备方法

[发明专利]直接甲醇燃料电池电催化剂的制备方法-CN201510362707.1有效
发明人：苏招红;罗艺;周文新;李朝荣;蒋贵友;周铁安 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2015-06-26 - 公布日： 2017-06-16 - 主分类号： H01M4/88 文献下载
摘要：本发明涉及一种直接甲醇燃料电池电催化剂的制备方法，包括步骤将氧化石墨烯和单体分散在HAc‑NaAc缓冲溶液中，得到单体和氧化石墨烯的混合液；对单体和氧化石墨烯的混合液进行循环伏安扫描，得到负载导电聚合物的还原氧化石墨烯复合材料修饰的电极；并以此为工作电极，硫醇溶液为电解液，采用三电极体系进行循环伏安扫描，得到负载巯基化导电聚合物的还原氧化石墨烯复合材料修饰的电极；及以此为工作电极，金属盐溶液为电解液，采用三电极体系进行恒电位还原，在工作电极上得到直接甲醇燃料电池电催化剂。该制备方法采用电化学方法，操作步骤简单，其得到的催化剂金属颗粒分散性高、粒径小，且具有高电活性和高稳定性。
直接甲醇燃料电池催化剂制备方法

[实用新型]高通量压电谐振芯片及测量系统-CN201621104733.0有效
发明人： 周铁安;沈海波;苏招红;赵文魁;潘炜松;胡家金;赵立军;徐鹏飞;张健;张琳琳;韩雪飞 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2016-10-09 - 公布日： 2017-04-05 - 主分类号： H03H9/205 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种高通量压电谐振芯片及其测量系统。该高通量压电谐振芯片包括基片(108)，基片上置入多个压电谐振片(101)，各压电谐振片用相同批次材料和工艺制作而成，各压电谐振片的上、下两面分别经铬或钛粘附层(102)连接工作电极(103)及背面电极(104)，工作电极(103)及背面电极(104)的一端经低温导电银胶(105)与接口端子(107)连接，且各压电谐振片周围使用柔性粘合层(106)连接基片。本实用新型不仅可消除压电谐振片之间的干扰，且可消除或大大减小安装过程中产生的应力与阻尼，从而实现稳定性高、灵敏度高、操作简便、精度较高、免标记、连续监测、无相互干扰高通量压电谐振传感器的制造。
通量压电谐振芯片测量系统

[发明专利]多孔石墨烯的制备方法-CN201510406071.6有效
发明人：苏招红;姜令芸;周文新;李朝荣;周铁安 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2015-07-13 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C25B1/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种多孔石墨烯的制备方法，其包括步骤为将石墨烯和氧化石墨烯分散在磷酸缓冲溶液中，得到石墨烯和氧化石墨烯的混合液；采用三电极体系对石墨烯和氧化石墨烯的混合液进行循环伏安扫描，得到多孔石墨烯修饰的工作电极，即在工作电极上得到多孔石墨烯。该制备方法操作简单、步骤少、快捷、成本低。
多孔石墨制备方法

[发明专利]一种常温下简便合成氧化石墨烯的方法-CN201510343691.X有效
发明人：苏招红;赵成云;周文新;谭文龙;吴安军;周春姣;周铁安 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2015-06-19 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： C01B32/198 文献下载
摘要：一种常温下简便合成氧化石墨烯的方法，其包括基于hummers法，采用浓硫酸和高锰酸钾在常温下对石墨粉进行一步法氧化，反应过程采用低功率超声波辅助剥离反应，进而得到氧化的石墨混合溶液；然后将得到的氧化石墨混合溶液在10‑300C的常温下于80‑300W的低功率超声波条件下加入H2O2水溶液，直到产品颜色变为亮黄色；接着将得到的产品用体积浓度为1mol/L的HCl溶液洗涤沉积物3次，再用去离子水洗涤至中性，最后透析，即得到氧化石墨烯水溶液。本发明将Hummers法中的低温、中温、高温处理过程简化为简单的常温处理，并使用低功率超声波辅助，操作简单、步骤少、易控制、快捷、成本低。
一种常温简便合成氧化石墨方法

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