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- [发明专利]一种动物皮肤成纤维细胞原代分离方法-CN201510869899.5在审
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葛啸虎;陈海佳;王一飞;吴子杰;李平
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广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
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2015-11-30
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2016-03-30
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C12N5/071
- 本发明公开了一种动物皮肤成纤维细胞原代分离方法,它通过选取消毒后的动物皮肤,做一个全层皮肤伤口;皮肤损伤3-5天内,取下损伤后皮肤区域,将皮下组织和多余血管去除干净,用含2%双抗的PBS清洗皮肤2~3次;将皮肤剪碎至0.1mm3~0.5mm3大小组织块;倒入含1%双抗的PBS,1000rpm/min低速离心5min,去除残留的漂浮组织块和上清液;将离心后的组织块,均匀接种在已包被了0.2%明胶的细胞培养皿中,加入培养基2ml DMEM+10%FBS+2%双抗的细胞培养液,放至37℃、5%CO2培养箱中进行培养。本发明利用皮肤损伤愈合机制,选择合适的愈合时段,得到大量增殖型的成纤维细胞,同时去除皮下组织有利真皮层的成纤维细胞爬出,可以增加细胞数量,同时细胞更容易爬出,缩短细胞爬出周期,加强贴壁效率。
- 一种动物皮肤纤维细胞分离方法
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