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[发明专利]一种饲草高粱-巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法-CN202211281389.2在审
发明人：钟小仙;毛峥沣;薛文韬;刘智微;钱晨;吴娟子 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2022-10-19 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： A01G7/06 文献下载
摘要：本发明属于植物‑微生物交叉技术领域，具体涉及一种饲草高粱‑巨大芽孢杆菌共生体良种繁育方法；所述方法包括如下步骤：在母本柱头抽出2~3 d时，用巨大芽孢杆菌菌液喷雾于柱头，再用父本花药抽出后2~5 d的花粉授粉，收获成熟种子，即可。本发明还保护一种快速鉴定巨大芽孢杆菌BM18‑2的CAPS标记，主要包括针对SNP位点设计的引物对及内切酶BspT104 I，所述引物对的上游引物和下游引物分别如SEQ ID No：1~2所示。本发明提供了首个含内生巨大芽孢杆菌饲草高粱良种繁育方法，生产的种子能显著提高盐含量≤8‰土壤中生长的植株生物量、粗蛋白、可溶性糖含量和粗饲料分级指数GI；本发明的鉴定巨大芽孢杆菌BM18‑2的CAPS标记能够实现巨大芽孢杆菌BM18‑2的快速定性鉴定。
一种饲草高粱巨大芽孢杆菌共生良种繁育方法

[发明专利]一株具有抑菌能力的耐硼赖氨酸芽孢杆菌及其应用-CN202110650187.X有效
发明人：钟小仙;夏学峰;钱晨;张雪寒;吴娟子;刘智微 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2021-06-10 - 公布日： 2022-08-12 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株具有抑菌能力的耐硼赖氨酸芽孢杆菌及其应用。一株具有良好抑菌能力的耐硼赖氨酸芽孢杆菌LBS‑2018，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CGMCC No.21392，保藏日期为2020年12月17日。本发明所述的耐硼赖氨酸芽孢杆菌LBS‑2018在制备抑制大肠杆菌的制剂中的应用，优选在制备抑制耐药大肠杆菌的制剂中的应用。LBS‑2018对革兰氏阴性菌(大肠杆菌为典型代表)，尤其对耐药菌株具有显著的抑菌效果，生长速度快于枯草芽孢杆菌，通过竞争方式抑制耐药菌。相比其他耐硼赖氨酸芽孢杆菌菌株具有更强抑制大肠杆菌黏附细胞的作用，抑制率61％‑81％。
具有能力赖氨酸芽孢杆菌及其应用

[发明专利]一种设施大棚果园间作苏牧2号象草的周年供草养獭兔方法-CN201811215608.0在审
发明人：钟小仙;吴娟子;刘智微;潘玉梅 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-10-18 - 公布日： 2019-01-15 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种设施大棚果园间作苏牧2号象草的周年供草养獭兔方法，涉及畜牧学牧草生产与养殖领域。该方法利用设施大棚果园间作牧草，通过发挥大棚冬春季的增温功能，在大棚果园中的空地进行优质高产苏牧2号象草生产，及其调制加工，改善土壤景观，满足獭兔养殖业对牧草周年供应的需要。在鲜草供应期和产草量方面，与大田种植苏牧2号象草相比，鲜草供应期延长≥100d，产草量提高≥18％。在种草养兔方面，饲喂产仔母兔，仔兔成活率提高2.0‑3.47％、断奶个体重提高0.03‑0.06kg/只，每只母兔带6只仔兔节本增效率≥9％；可提早青年兔出栏≥25d；按青年兔全价颗粒料配方，苏牧2号象草替代20‑40％紫花苜蓿制成的颗粒料，饲喂獭兔增重无显著差异，约3.0kg出栏饲料成本下降≥5％。
象草獭兔设施大棚果园间作产草量供应期颗粒料大棚母兔饲喂鲜草仔兔牧草大田种植牧草生产饲料成本显著差异周年供应紫花苜蓿畜牧学产仔养兔增温增重种草成活率调制空地配方养殖业高产土壤景观替代养殖加工生产

[发明专利]一株富集镉促生长的杂交狼尾草内生巨大芽孢杆菌BM18-2及其应用-CN201810143961.6有效
发明人：钟小仙;钱晨;刘智微;吴娟子;张建丽;潘玉梅 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-02-12 - 公布日： 2018-10-12 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株富集镉促生长的杂交狼尾草内生巨大芽胞杆菌BM18‑2及其应用。一种富集镉促生长的杂交狼尾草内生巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)BM18‑2，2017年11月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:M2017679。所述的巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)BM18‑2制备的杂交狼尾草富集镉促生菌剂。本发明所述的BM18‑2在促进镉污染土壤中杂交狼尾草生长中的应用。利用该菌株浸染杂交狼尾草，能够促进其在镉污染土壤环境中健康成长，提高杂交狼尾草的镉含量和生物量，增强对重金属镉污染土壤的修复效率。
杂交狼尾草保藏芽胞杆菌富集促生长镉污染土壤中国典型培养物重金属镉污染应用促生菌剂修复效率生物量浸染菌株制备生长土壤健康

[发明专利]一种御谷保健酒的酿造方法-CN201510966834.2有效
发明人：钟小仙;马艳弘;顾洪如;李亚辉;刘智微;钱晨;吴娟子;张建丽 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2015-12-21 - 公布日： 2018-05-25 - 主分类号： C12G3/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种御谷保健酒的酿造方法，该方法包括以下步骤)浸泡打浆，2)酶解破壁，3)液化与糖化，4)微波杀菌，5)接种发酵，6)陈酿，7)澄清过滤处理。本发明采用酵前酶解破壁提高淀粉溶出率；采用α‑中温淀粉酶和糖化酶高效降解淀粉，提高了淀粉出酒率；采用瞬时高功率微波处理杀菌和生料发酵工艺克服了传统酿酒工艺中高温对多酚、黄酮等活性物质的破坏，为终端产品的营养保健功能提供保障；采用低温微波组合催陈技术极大地缩短了陈酿时间，降低了生产成本；采用澄清稳定处理技术，使酒体澄清透亮。按照本发明方法最终获得色泽金黄、清澈透亮、香气浓郁、集营养与保健于一体的高品质御谷保健酒。
保健酒淀粉酶解破壁陈酿酿造澄清糖化传统酿酒工艺营养保健功能高功率微波中温淀粉酶打浆澄清过滤低温微波高效降解活性物质接种发酵生料发酵微波杀菌稳定处理终端产品出酒率高品质溶出率糖化酶中高温催陈多酚黄酮酒体液化杀菌香气生产成本浸泡

[发明专利]一种苏丹草体外诱导管胞的方法-CN201410364395.3有效
发明人：钟小仙;刘兆明;刘智微;马钟杰;钱晨;张建丽;吴娟子 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2014-07-28 - 公布日： 2016-10-26 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种苏丹草体外诱导管胞分化的方法，属于植物细胞工程技术领域。以苏丹草种子组织培养诱导的淡黄色颗粒状愈伤组织为外植体，在不含植物生长激素的基本培养基中，添加1.0～9.0g/L活性炭，在黑暗、每日16h和24h的散射光下培养5～21d，培养室温度26～28℃，体外诱导获得了管胞。本发明建立的苏丹草体外诱导管胞分化的方法，管胞分化率最高达到47.23％，本发明的优点是：操作简便，诱导效率高，为苏丹草次生细胞壁木质素调控机制研究和定向改良提供了技术支撑。
一种苏丹草体诱导管胞方法

[发明专利]一种杂交狼尾草水栽旱管高产栽培方法-CN201410698980.7有效
发明人：戚永奎;钟小仙;葛兆建;吴娟子;费跃;朱明;杨华;顾洪如;陈建平 -专利权人：江苏沿海地区农业科学研究所
申请日： 2014-11-28 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： A01G1/00 文献下载
摘要：本发明公开了属于植物栽培技术领域的一种杂交狼尾草水栽旱管高产栽培方法。该方法包括育苗，分苗选苗，耕地整地，灌水排水，适时移栽，施肥，田间管理等步骤。本发明的方法移栽成活率高，成活率达到95％以上，采用水田栽插，小苗水管，大苗旱管，产量高，每公顷杂交狼尾草相当于3-5公顷玉米或者大麦和小麦，改善生态环境，改良土壤，保持水土，可生产生物质炭、气、油等再生能源。
一种杂交狼尾草水栽旱管高产栽培方法

[实用新型]负压式花粉采集器-CN201320073760.6有效
发明人： 吴娟子;钟小仙;束元;张建丽 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2013-02-17 - 公布日： 2013-09-04 - 主分类号： A01D93/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及农业机械领域，涉及负压式花粉采集器。负压式花粉采集器，主要包括动力装置、采集装置、集粉装置、背负装置四个功能部分；动力装置主要包括由汽油机及油箱组成的汽油机动力装置主体及汽油机动力装置散热孔；采集装置主要包括旋风装置、旋风花粉通道、软管、硬质空心手柄、吸粉头；集粉装置主要由集粉袋套管和集粉袋组成；动力装置与采集装置通过旋风装置相连接；动力装置与集粉装置通过集粉袋套管相连接，动力装置与背负装置通过减震弹簧相连接。本实用新型所提供的负压式象草花粉采集器结构简单、易于加工制作、成本不高，操作简便舒适，使用该花粉采集器采粉效率高、采集的花粉成活率高，具有作为大田作业农具推广的前景。
负压式花粉采集

[发明专利]一种鉴定外来入侵物种互花米草种群的DNA分子标记方法-CN201310046894.3无效
发明人：陈建群;许颖;王强;丁静;吴娟子 -专利权人：南京大学
申请日： 2013-02-05 - 公布日： 2013-06-12 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种鉴定外来入侵物种互花米草种群的DNA分子标记方法，本方法根据高通量转录组测序筛选得到目标基因，通过PCR反应、PCR产物测序得到多个单核苷酸多态性（SNP）位点。再由所有有效的单核苷酸多态性位点组成单倍体型用于分子标记以达到遗传分型。本发明在一次实验中，即可得到丰富的多态性信息。单核苷酸多态性标记遗传稳定，可用于不同来源的样本，适宜高通量自动化分析。
一种鉴定外来入侵物种互花米草种群 dna 分子标记方法

[发明专利]互花米草种群的SNP标记的分型方法-CN201310046929.3无效
发明人：陈建群;丁静;王强;许颖;吴娟子 -专利权人：南京大学
申请日： 2013-02-05 - 公布日： 2013-06-12 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种互花米草种群的SNP标记的分型方法，本方法根据高通量转录组测序筛选得到目标基因，通过PCR反应、PCR产物测序得到多个SNP位点。再由所有有效的SNP位点组成单倍体型用于分子标记以达到遗传分型。本发明在一次实验中，即可得到丰富的多态性信息。SNP标记遗传稳定、操作简便，适合用物种溯源。
互花米草种群 snp 标记方法

[发明专利]一种基于单核苷酸多态性标记的互花米草遗传分型方法-CN201310048133.1无效
发明人：王强;许颖;陈建群;丁静;吴娟子 -专利权人：南京大学
申请日： 2013-02-05 - 公布日： 2013-05-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于单核苷酸多态性标记的互花米草遗传分型方法，本方法根据高通量转录组测序筛选得到目标基因，通过PCR反应、PCR产物测序得到多个单核苷酸多态性位点。再由所有有效的单核苷酸多态性位点组成单倍体型用于分子标记以达到遗传分型。本发明操作简便、通量灵活、单核苷酸多态性标记遗传稳定可靠，可在生物学、遗传学研究中推广应用。
一种基于核苷酸多态性标记互花米草遗传方法

[发明专利]用狼尾草人造板加工剩余物改善其产品表面性能方法-CN201310087992.1无效
发明人：张洋;周定国;王思群;江华;钟小仙;吴娟子;吴羽飞;李文定;阮重坚;吴英山;黄润州;周兆兵;贾翀;崔举庆;吴燕;刘聪;田野 -专利权人：南京林业大学;江苏省农业科学院
申请日： 2013-03-20 - 公布日： 2013-05-22 - 主分类号： B27N3/00 文献下载
摘要：本发明是用狼尾草人造板加工剩余物改善其产品表面性能方法，工艺步骤：1）利用豆胶或脲醛胶狼尾草人造板加工过程中产生微小颗粒状剩余物，制造狼尾草纳米纤维素；2）先采用亚硫酸钠溶液，处理狼尾草人造板加工剩余物；3）再采用稀碱液处理；4）再通过高压纳米均质器，制备出分散在水中的狼尾草纳米纤维素材料；5）在光敏涂料中添加狼尾草纳米纤维素；6）将光敏涂料施加在狼尾草人造板产品表面；使狼尾草人造板产品表面具有一定的色彩。优点：纳米纤维素具有很高的强度，其弹性模量达到150GPa，可用来增强无醛豆胶或脲醛胶狼尾草人造板产品表面耐磨强度和耐老化性能，使狼尾草附加值提高、无醛豆胶或脲醛胶狼尾草人造板产品用途扩大。
用狼尾草人造板加工剩余物改善产品表面性能方法

[发明专利]自交不结实海雀稗秋水仙素诱导体细胞突变体的筛选方法-CN201110074147.1无效
发明人：钟小仙;吴娟子;刘智微;常盼盼;许映君;周和锋 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2011-03-28 - 公布日： 2011-09-14 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种自交不结实海雀稗秋水仙素诱导体细胞突变体的筛选方法，属于农业生物技术领域。海雀稗颗粒状愈伤组织在愈伤组织继代培养基上增殖培养20d～25d，转到添加500~1000g/L秋水仙素的愈伤组织继代培养基中诱变培养24h，转到分化培养基上培养35d~40d，绿苗和绿芽再转到分化培养基上继续生长，具有3张完整叶的再生植株移栽至大田或盆钵，移栽第2年成熟期，检查结实性获得可自交结实的体细胞突变体植株，收获的种子播种后能100%发芽长成具有完整根、茎、叶的植株，并能正常分蘖和成坪。本发明适用于海雀稗新品种选育，具有操作简便、周期短和选择效率高的优点。
结实海雀稗秋水仙素诱导体细胞突变体筛选方法

[发明专利]利用内含肽反式剪接模式化生产融合蛋白质-CN200910027339.X无效
发明人：王强;陈建群;袁慧中;丁静;张鹏飞;王斌;吴娟子;刘静 -专利权人：南京大学
申请日： 2009-05-27 - 公布日： 2010-12-01 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用内含肽反式剪接模式化生产融合蛋白质的方法，可用于基因工程、酶的生产、医药生产、食品工业和农牧业等领域。本发明主要是利用内含肽反式剪接将有特定生物学功能的目的蛋白部分与通用功能的辅助蛋白连接在一起，从而得到融合蛋白质。选择目的蛋白T，辅助蛋白P1、P2，两种互不兼容的内含肽A和B(如蓝藻Synechocystis sp.PCC6803的DnaE和DnaB)，将内含肽A和B分别分解为氨基末端(N端)与羧基末端(C端)，即An、Ac、Bn、Bc。构建不同的载体系统分别经宿主表达后得到蛋白片段Ac-T-Bn，P1-An，Bc-P2，An，Bc。将得到的蛋白片段混合，进行内含肽反式剪接，生成融合蛋白P1-T-P2，P1-T或T-P2。
利用内含反式剪接模式化生融合蛋白质

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