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[发明专利]一种能高效分化成脂的规模化3D低氧间充质干细胞培养体系-CN202110806426.6有效
发明人：刘中民;贾文文;朱羚;朱邯豫;汤红明 -专利权人：上海东方星际干细胞科技有限公司;南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2021-07-16 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明提供了一种人脐带间充质干细胞3D低氧培养以及分化成脂的方法，属于细胞培养技术领域，3D低氧培养人脐带间充质干细胞的方法，包括以下步骤：1）将人脐带间充质干细胞在2D条件下培养至P2~P4代；2）将获得的P2~P4代脐带间充质干细胞接种3D环境中进行扩增培养至P5~P7代；步骤2）中所述3D环境以玻璃微球为载体；所述3D环境中的氧分压为3%~8%。本发明提供的方法培养获得的人脐带间充质干细胞生长状况良好，细胞形态呈梭形和多棱形；细胞增殖速度快，具有较高成脂分化能力，成脂分化效率高，成脂分化出现时间较早。
一种高效化成规模化低氧间充质干细胞培养体系

[实用新型]一种细胞培养用片状载体及培养皿-CN202121303267.X有效
发明人：朱学仁;朱羚 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2021-06-10 - 公布日： 2022-12-27 - 主分类号： C12M3/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞培养用片状载体及培养皿，其中所述载体为至少两层结构，每层结构由多孔高分子材料和网格高分子材料交替叠加分布，每层结构之间采用物理方法粘接。多孔高分子材料和网格高分子材料至少由一种聚合物组成，其中聚合物是：从聚酰胺、聚碳酸酯、聚砜、聚酯、聚乙烯、聚丙烯、和聚氯乙烯中挑选出来的聚合物。所述载体可以包含至少一种涂层，以促进细胞的附着和生长，其中至少有一种涂层是从蛋白质和聚赖氨酸中挑选出来的。本实用新型多层不同高分子材料交替的结构，不仅表面积大，片与片之间不会粘连，而且利于细胞洗脱，可以为固定床的放大培养提供大规模的传代细胞。
一种细胞培养片状载体培养皿

[实用新型]干细胞生产用无菌连续离心装置及应用该装置的生产系统-CN202221743601.8有效
发明人：朱学仁;朱羚 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2022-07-07 - 公布日： 2022-10-28 - 主分类号： B04B5/04 文献下载
摘要：本申请涉及干细胞生产用无菌连续离心装置及应用该装置的生产系统，其涉及一种离心设备，其中离心装置包括机架，所述机架上设有用于供细胞液进入的离心罐，所述机架上设有用于驱动离心罐转动的动力组件，所述离心罐上设有罐盖件，所述罐盖件上设有进料管，所述进料管远离所述罐盖件的一端伸入离心罐，所述离心罐靠近所述罐盖件的一侧设有排料口，所述进料管伸入离心罐的一端与所述排料口错开设置，所述罐盖件上设有供液体输出的出料口，所述出料口与所述排料口连通设置。本申请具有的效果在于可以持续大批量的生产，有利于提高干细胞生产效率。
干细胞生产无菌连续离心装置应用系统

[实用新型]一种可重复使用的免疫细胞培养罐-CN202121301219.7有效
发明人：朱学仁;朱羚 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2021-06-10 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本实用新型提供一种可重复使用的免疫细胞培养罐，包括罐盖、罐体和底板，罐体的顶部和底部分别连接有上压板和下压板，罐盖位于上压板的顶部，底板位于下压板的底部，罐体、下压板和底板形成一个容纳空间，罐盖覆盖在容纳空间上，底板的顶部安装有镂空的支撑板，支撑板上铺设有双层膜，双层膜的上层为亲水膜、下层为疏水膜，罐体、下压板和底板通过密封圈密封。本申请的免疫细胞培养罐为可重复使用的免疫细胞培养罐，可拆卸、可清洗、可蒸汽灭菌、可重复使用，容积不受限制，并配有多种在线检测电极，更有利于实时检测细胞的生长环境数据，优化NK细胞生长条件，有利于细胞的生长，提高细胞质量，减少批次间差异。
一种重复使用免疫细胞培养

[实用新型]一种基于生化分析仪的在线取样器-CN202121300772.9有效
发明人：朱学仁;朱羚 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2021-06-10 - 公布日： 2021-12-31 - 主分类号： G01N1/14 文献下载
摘要：本实用新型提供一种基于生化分析仪的在线取样器，包括取样管、套管、不锈钢管和压盖，套管安装在取样管的底部，不锈钢管贯穿取样管和套管，套管位于压盖和取样管之间，不锈钢管贯穿套管中间，上下端由密封圈密封，压盖为中空的，不锈钢管管穿过压盖，不锈钢管末端与螺帽连接密封，不锈钢管上自下而上均匀地分布若干小孔。本实用新型不锈钢管自下而上均匀地分布若干小孔，孔径自下而上由粗变细，可以使套管上的抽吸力均匀分布，且分散到套管上的吸力很小，但可使液体均匀的流经套管从管内抽出，不会产生短路现象，也不会因为吸力大而使得细胞等物质吸附在套管上。本实用新型结构设计简单合理，使用方便快捷，具有很强的实用性。
一种基于生化分析在线取样

[实用新型]一种用于大规模培养干细胞及免疫细胞的微流道载体结构-CN201922372737.7有效
发明人：朱羚;朱学仁 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-12-26 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于大规模培养干细胞及免疫细胞的微流道载体结构，该微流道载体结构包括多个微球（1），微球（1）的直径为0.5mm～2.7mm，微球（1）堆积在固定床式生物反应器（2）中形成固定床（3），由固定床（3）构成微流道载体结构，该微流道载体结构中的相邻微球（1）之间的最大直线空间尺寸L为0.183mm～0.988mm。本实用新型的微流道载体结构通过多个微球堆积而成，微流道载体结构中的微流道能为细胞提供更加接近人体组织内的微观环境，便于细胞之间、细胞与细胞外基质之间的交互作用及信号的传递，有利于细胞的扩增，能够将细胞的同时培养数量扩展至1000亿～2000亿个。
一种用于大规模培养干细胞免疫细胞微流道载体结构

[实用新型]一种固定床式外循环生物反应器-CN201921687738.4有效
发明人：朱羚;朱学仁 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-10-10 - 公布日： 2020-08-11 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种固定床式外循环生物反应器，包括反应器（1），所述反应器（1）的下部设置载体（2）且载体（2）上方的区域构成培养基混合池（3），反应器（1）底部的排出管（4）上连接有外循环机构（5），该外循环机构（5）的外循环管路上安装有泵（51）和流量计（52），该外循环管路的一端与排出管（4）的出口相连接、另一端与反应器（1）的罐盖上的回流管（53）相连接，且回流管（53）的出口位于培养基混合池（3）内。本实用新型的生物反应器能够精准控制培养基通过固定床的流速，对干细胞的营养传递和剪切力进行有效控制，以实现间充质干细胞的大规模培养；提高培养基的循环效率且能够提高干细胞的培养质量并降低生产成本。
一种固定床循环生物反应器

[实用新型]用于固定床式生物反应器的搅拌系统-CN201921686851.0有效
发明人：朱羚;朱学仁 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-10-10 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于固定床式生物反应器的搅拌系统，包括反应器（1）和位于反应器（1）内的载体（4）和培养基混合池（5），其特征在于：所述的反应器（1）上分别设有载体搅拌器（6）和培养基搅拌器（8），所述载体搅拌器（6）的载体搅拌桨（7）位于载体（4）内且所述培养基搅拌器（8）的培养基搅拌桨（9）位于培养基混合池（5）内。本实用新型的固定床式生物反应器通过载体搅拌器的设置能够有效帮助细胞从载体上洗脱下来；进一步通过限定培养基搅拌器的位置，不但能够使得培养基搅拌均匀，且能够使得培养基搅拌桨的转速能够与培养基回流管的回流速度相匹配，从而对干细胞的营养传递和剪切力进行有效控制，提高生产效率。
用于固定床生物反应器搅拌系统

[实用新型]用于固定床式生物反应器的外循环系统灭菌机构-CN201921687537.4有效
发明人：朱羚;朱学仁 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-10-10 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： A61L2/07 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于固定床式生物反应器的外循环系统灭菌机构，外循环系统灭菌机构包括分别位于外循环系统（2）进口端的排出三通阀（F5）以及出口端的灭菌三通阀（F4），排出三通阀（F5）的一端与外循环系统（2）的进口端相连接、排出三通阀（F5）的一端与反应器（1）底部的排出管（3）上的排出阀（F3）的出口端相连接且排出三通阀（F5）的第三端通过管道与疏水器（4）相连接，灭菌三通阀（F4）能够通入纯蒸汽，纯蒸汽流经灭菌三通阀（F4）、外循环系统（2）、排出三通阀（F5）后排出至疏水器（4），对外循环系统（2）进行灭菌。本实用新型的灭菌机构能够在不拆卸外循环系统的情况下进行在线灭菌，提高生产效率。
用于固定床生物反应器循环系统灭菌机构

[实用新型]用于固定床式生物反应器的外循环系统-CN201921686856.3有效
发明人：朱羚;朱学仁 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-10-10 - 公布日： 2020-06-23 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于固定床式生物反应器的外循环系统，其特征在于：所述的外循环系统包括泵（4），泵（4）的进口通过排出管（3）与反应器（1）底部的封头（2）相连通，泵（4）的出口连接有带流量计（6）的回流管（5）且回流管（5）的出口位于培养基混合池（9）内。本实用新型通过在固定床式生物反应器上配置能够精准控制培养基通过固定床流速的外循环系统，该外循环系统通过流量计测量培养基的回流实时流速，泵根据流量计的测量值实时控制培养基的回流量以控制培养基的流速，使得间充质干细胞能够进行大规模培养，同时能够提高干细胞的培养质量并降低生产成本。
用于固定床生物反应器循环系统

[实用新型]用于大规模生产间充质干细胞的固定床生物反应器系统-CN201921686879.4有效
发明人：朱羚;朱学仁 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-10-10 - 公布日： 2020-06-23 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于大规模生产间充质干细胞的固定床生物反应器系统，该系统包括生物反应器（1）、外循环机构（2）、收集机构（3），其中生物反应器（1）用于扩增间充质干细胞；外循环机构（2）用于接收生物反应器（1）底部排出的培养基并输送至生物反应器（1）上部的培养基混合池（11）中以实现培养基的循环，所述的外循环机构（2）中带有流量计（22）以监测培养基的流速并根据该流速调控培养基的物质交换；收集机构（3）能够分别收集生物反应器（1）培养出来的间充质干细胞以及间充质干细胞培养时产生的废液。本实用新型通过培养基的外部循环能够精准控制培养基通过固定床的流速，以实现间充质干细胞的大规模培养。
用于大规模生产间充质干细胞固定床生物反应器系统

[发明专利]一种用于大规模培养干细胞及免疫细胞的微流道载体结构-CN201911363629.1在审
发明人：朱羚;朱学仁 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-12-26 - 公布日： 2020-03-24 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于大规模培养干细胞及免疫细胞的微流道载体结构，该微流道载体结构包括多个微球（1），微球（1）的直径为0.5mm～2.7mm，微球（1）堆积在固定床式生物反应器（2）中形成固定床（3），由固定床（3）构成微流道载体结构，该微流道载体结构中的相邻微球（1）之间的最大直线空间尺寸L为0.183mm～0.988mm。本发明的微流道载体结构通过多个微球堆积而成，微流道载体结构中的微流道能为细胞提供更加接近人体组织内的微观环境，便于细胞之间、细胞与细胞外基质之间的交互作用及信号的传递，有利于细胞的扩增，能够将细胞的同时培养数量扩展至1000亿～2000亿个。
一种用于大规模培养干细胞免疫细胞微流道载体结构

[实用新型]用于大规模培养细胞的立式旋转罐生物反应器-CN201920581654.6有效
发明人：朱学仁;朱羚 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-04-26 - 公布日： 2020-03-20 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了用于大规模培养细胞的立式旋转罐生物反应器，包括可旋转的培养罐，培养罐的罐口密封设置有罐盖；培养罐的底部下方设置有旋转驱动装置，旋转驱动装置能够驱动培养罐沿其竖向中心轴线旋转；培养罐罐盖固定不旋转，罐盖上开有若干个接口，罐盖与罐口之间设置有旋转接头，旋转接头实现培养罐的密闭旋转；罐盖上的接口还连接有电极、进/出料管路、在线细胞检测系统、搅拌系统、灌流系统和通气系统。本实用新型适用细胞治疗制剂的整个制备过程，包括细胞分离、磁选转染、扩增、浓缩、洗涤、配置到分装都可在本实用新型一个全密闭、全自动控制的生物反应器中完成的。
用于大规模培养细胞立式旋转生物反应器

[实用新型]离心分选生物反应器-CN201920581436.2有效
发明人：朱学仁;朱羚 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-04-26 - 公布日： 2020-02-18 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开一种离心分选生物反应器，该离心分选生物反应器，包括加料系统、离心分离系统和成像分选系统；加料系统包括蠕动泵、气泡感应器、若干储液袋及管夹阀；离心分离系统包括离心电机和可旋转的反应罐；离心电机驱动反应罐围绕其中心轴线高速旋转产生离心力，将反应罐内物质离心分层；所述成像分选系统包括微型摄像、步进电机、分离管、蠕动泵、气泡感应器、储液袋和管夹阀；所述成像分选系统能够实时采集反应罐中的液体分层情况；通过控制系统对比成像，由步进电机带动分离管旋转，控制系统控制管路中蠕动泵和管夹阀的开关，收集分层中的所需成分。本实用新型直接在生物反应器中实现离心分层和分装，操作简单，避免污染。
离心分选生物反应器

[实用新型]熔断式自动封装装置-CN201920581423.5有效
发明人：朱学仁;朱羚 -专利权人： 南京比瑞生物科技有限公司
申请日： 2019-04-26 - 公布日： 2020-01-10 - 主分类号： B65B51/10 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种熔断式自动封装装置，其熔断式自动封装装置，包括蠕动泵、夹管阀、熔断器及组合式分装袋，所述组合式分装袋包括一根进液总管、若干个支管、冻存袋和机架，每个支管均与进液总管连接贯通；进液总管与生物反应器通过无菌接头连接，在进液总管和支管的每个T型交叉处设置有两个管夹阀，两个管夹阀分别夹持住进液总管和对应支管的交叉处的下游端，每组管夹阀等距离排列于机架上，由控制系统自动控制其开关；在支管管夹阀和冻存袋之间设置有熔断器。本实用新型实现自动化无人密封分装，且与生物反应器直接连接，避免中间环节，减少设备接触污染，且本实用新型分装高效。
进液总管支管本实用新型自动封装装置生物反应器冻存袋分装袋管夹阀交叉处熔断器熔断式组合式分装等距离排列减少设备接头连接控制系统中间环节夹管阀蠕动泵下游端夹持无菌组管密封自动化贯通污染

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