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[发明专利]针对O型口蹄疫病毒的免疫血清抗体的单克隆抗体及其应用-CN202211726115.X在审
发明人：马磊;雷宇平;孙圣福;但汉并;周云朵;柯文婷;董晓辉;徐高原 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种针对O型口蹄疫病毒的免疫血清抗体的单克隆抗体及其应用，涉及动物病毒学与动物传染病学检测技术领域。本发明使用vp1蛋白做为免疫原，分别使用含B细胞抗原表位的多肽与灭活抗原做为筛选原，筛选出能与O型口蹄疫病毒灭活疫苗和合成肽疫苗免疫背景血清均有竞争作用的单克隆抗体，并建立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA试剂盒，大幅缩短了检测时间，提高了试剂盒敏感性、特异性以及稳定性。
针对口蹄疫病毒免疫血清抗体单克隆抗体及其应用

[发明专利]禽流感病毒H5、H7、H9亚型三重RT-PCR检测的引物及试剂盒-CN201811600557.3有效
发明人：马磊;邹维华;但汉并;周云朵;范俊青;贾慧勤;李盼盼;张弛;董晓辉;徐高原 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2018-12-26 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开禽流感病毒H5、H7、H9亚型三重RT‑PCR检测的引物，包括3对特异性引物，分别为引物对1：H5‑F和H5‑R，引物对2：H7‑F和H7‑R，引物对3：H9‑F和H9‑R，其分别具有有序列表SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.6的碱基序列。针对当前流行的H5、H7、H9三种亚型的禽流感病毒的HA基因，经序列比对，设计了三对特异性引物，组合成禽流感病毒H5、H7、H9亚型三重RT‑PCR检测试剂盒，同时采用反转录和PCR扩增一步法反应，扩增结束后通过琼脂糖凝胶电泳直观地得到检测结果，可以一管中简便快速的检测出H5、H7、H9三种亚型的病原，从而进行禽流感亚型鉴别。
禽流感病毒 h5 h7 h9 三重 rt pcr 检测引物试剂盒

[发明专利]一种H7亚型禽流感病毒单克隆抗体及应用-CN201711071799.3有效
发明人：范俊青;但汉并;贾慧勤;周云朵;韦奇勇;李盼盼;董俊;王园园;董晓辉 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2017-11-03 - 公布日： 2021-06-15 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种H7亚型禽流感病毒单克隆抗体及应用，所述的单克隆抗体由杂交瘤细胞6B3分泌得到，该杂交瘤细胞已送至CCTCC保藏，保藏编号为：CCTCC NO：C2017204。所述的单克隆抗体效价高，特异性好，并且具有竞争效果，基于该单克隆抗体制备了H7亚型禽流感病毒竞争ELISA抗体检测试剂盒及检测方法，该方法具有快速、稳定、特异性高、灵敏度高的特点，利用该试剂盒对样品进行测试，本方法与HI试验有99％以上的符合率，敏感性为98.7％，特异性为99.3％，相对HI试验，缩短了试验时间，操作步骤更简单，可快速检测样品中是否含有H7亚型禽流感抗体，适合应用于家禽养殖场是否含有H7亚型禽流感病毒抗体的大批量检测。
一种 h7 禽流感病毒单克隆抗体应用

[发明专利]一种H7禽流感病毒单克隆抗体及应用-CN201710592411.8有效
发明人：范俊青;但汉并;贾慧勤;周云朵;韦奇勇;李盼盼;董晓辉;徐高原 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2017-07-19 - 公布日： 2020-01-17 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明属于临床免疫学技术领，具体公开了一种H7禽流感病毒单克隆抗体及应用，所述的单克隆抗体由杂交瘤细胞1H11分泌得到，该杂交瘤细胞已送至CCTCC保藏，保藏编号为：CCTCC NO：C2017112。所述的单克隆抗体效价高，特异性好，并且具有阻断效果，可用于制备H7亚型禽流感阻断ELISA抗体检测试剂盒，利用该试剂盒对待检样品进行测试，与HI试验有98%以上的符合率，相对HI试验，缩短了试验时间，操作步骤更简单。
单克隆抗体杂交瘤细胞保藏抗体检测试剂盒禽流感病毒免疫学禽流感试剂盒可用效价分泌制备测试试验应用

[发明专利]一种辣根过氧化物酶标记抗体的稀释稳定剂的制备方法及其应用-CN201910444278.0在审
发明人：徐高原;王园园;范俊青;但汉并;徐蓉;明凡;张丽华 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2019-05-27 - 公布日： 2019-08-30 - 主分类号： G01N33/535 文献下载
摘要：本发明公开了一种辣根过氧化物酶标记抗体的稀释稳定剂的制备方法，采用先制备PBST缓冲液，再将胰蛋白酶消化酪蛋白、PEG‑6000、青‑链霉素加入其中混匀过滤除菌制得。这种稀释稳定剂能够有效地延缓酶标抗体的生物活性降低，用于禽流感病毒H7亚型竞争ELISA抗体检测试剂盒中酶标抗体的稀释稳定，经稀释的酶标抗体可在2～8℃保存至少15个月而活性基本不发生改变，当禽流感病毒H7亚型阳性参考血清稀释至64倍时，仍能被检测出阳性，敏感性很强；此外，这种稀释稳定剂对一些常见的酶标抗体的生物活性也具有比较好的效果。
稀释酶标抗体稳定剂辣根过氧化物酶标记抗体制备禽流感病毒生物活性抗体检测试剂盒阳性参考血清胰蛋白酶消化竞争ELISA 过滤除菌酪蛋白链霉素有效地混匀延缓保存检测应用

[发明专利]一种检测猪流行性腹泻病毒的胶体金试纸条-CN201910159376.X在审
发明人：贾慧勤;孙圣福;但汉并;董晓辉;李盼盼;张弛;马磊;范俊青;周云朵 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2019-03-04 - 公布日： 2019-06-28 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明公开一种检测猪流行性腹泻病毒的胶体金试纸条，胶体金结合垫上喷涂有抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体A‑胶体金标记物，硝酸纤维素膜上喷涂有抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体B的检测线和山羊抗鼠IgG的质控线，单克隆抗体A由编号为10F10的杂交瘤细胞分泌产生，单克隆抗体B由编号为4A11的杂交瘤细胞分泌产生。本发明的试纸条使用双单抗检测，检测快速、灵敏度高且特异性强，检测结果清晰易于判断，整个检测过程无需任何仪器、操作人员无需任何专业培训；试纸条的使用操作简单，适于现场诊断使用。
猪流行性腹泻病毒单克隆抗体胶体金试纸条杂交瘤细胞试纸条种检测喷涂分泌检测胶体金标记物胶体金结合垫硝酸纤维素膜检测结果山羊抗鼠特异性强现场诊断专业培训检测线灵敏度质控线单抗清晰

[发明专利]一种快速检测猪流行性腹泻病毒的荧光试纸及制备和应用-CN201910160544.7在审
发明人：张弛;周艳君;但汉并;董晓辉;贾慧勤;李盼盼;范俊青;周云朵 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2019-03-04 - 公布日： 2019-06-28 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明公开一种快速检测猪流行性腹泻病毒的荧光试纸，包括硬质聚氯乙烯底板、硝酸纤维素膜、样品垫、荧光标记物垫、吸水纸，荧光标记物垫上喷涂有抗PEDV的单克隆抗体Ⅰ－量子点荧光标记物，硝酸纤维素膜上喷涂有抗PEDV的单克隆抗体Ⅱ检测线和山羊抗鼠IgG的质控线；抗PEDV的单克隆抗体Ⅰ由杂交瘤细胞10F10分泌产生，抗PEDV的单克隆抗体Ⅱ由杂交瘤细胞4A11分泌产生。本发明还提供了上述试纸的制备方法和应用方法，制备的试纸操作简单、检测快速、灵敏、特异性强、结果清晰易于判断，仅需要一个简易的激发设备，无需专业人员操作，适用于现场诊断。
单克隆抗体试纸荧光标记物猪流行性腹泻病毒硝酸纤维素膜杂交瘤细胞快速检测喷涂荧光分泌制备方法和应用底板硬质聚氯乙烯专业人员操作制备和应用激发设备山羊抗鼠特异性强现场诊断检测线量子点吸水纸样品垫质控线制备灵敏简易清晰检测

[发明专利]一种检测猪伪狂犬病毒和口蹄疫病毒的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒及其应用-CN201610954527.7在审
发明人：陈斌;但汉并;徐高原;尹争艳;陈关平 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2016-10-27 - 公布日： 2018-05-04 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明属于动物疫病检测领域，具体涉及一种检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括包被有猪伪狂犬病毒和口蹄疫病毒3B多肽的抗原检测板、含有酶标抗伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体和酶标抗口蹄疫病毒3ABC蛋白单克隆抗体的混合液、猪伪狂犬病毒gE蛋白酶标单抗显色体系、口蹄疫病毒3ABC蛋白酶标单抗显色体系、阴性/阳性对照、样品稀释液和洗涤液。本发明使两个独立的ELISA反应在前两个步骤同时进行，再使用独特的显色体系，使前一个酶的显色与终止不影响下一个酶的反应，实现了一份血清，一次样品孵育，一次二抗孵育，得到两个ELISA结果。
一种检测狂犬病毒口蹄疫病毒二联阻断 elisa 抗体试剂盒及其应用

[发明专利]一种猪伪狂犬病病毒gE蛋白抗体竞争ELISA检测试剂盒及检测方法-CN201710991735.9有效
发明人：韦奇勇;但汉并;范俊青;贾慧勤;周云朵;李盼盼;邹维华;张弛;马磊;董俊;董晓辉;徐高原 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2017-10-18 - 公布日： 2018-03-23 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测猪伪狂犬病病毒gE蛋白抗体的竞争ELISA检测试剂盒，包括辣根过氧化物酶标记的猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体，所述单克隆抗体由杂交瘤细胞株4E12分泌产生，所述杂交瘤细胞株4E12的保藏号为CCTCC NOC2017205，试剂盒还包括阴性对照、阳性对照、抗原包被板、底物液A、底物液B、终止液、样品稀释液、洗涤液，该试剂盒具有特异性强、敏感性高的特点。本发明还提供了所述试剂盒的检测方法，该方法特异性强、敏感性高、重复性好、与进口试剂盒检测符合率达96.11%，且1h之内获得结果，大幅度缩短检测时间，具有良好的应用前景。
种猪狂犬病病毒 ge 蛋白抗体竞争 elisa 检测试剂盒方法

[发明专利]一种检测猪血清中伪狂犬病病毒gE蛋白抗体的试纸卡及制备方法和应用-CN201510059481.8有效
发明人：吴斌;李慧;但汉并;彭忠;胡睿铭;汤细彪;董晓辉;何启盖;陈焕春 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2015-02-04 - 公布日： 2017-07-21 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测猪血清中伪狂犬病病毒gE蛋白抗体的试纸卡及其制备方法和应用，试纸卡是由免疫胶体金试纸条和卡体组成。免疫胶体金试纸条是将硝酸纤维素膜粘贴在纸条底板上，在硝酸纤维膜的一端粘贴有金标结合垫和样品垫，硝酸纤维素膜的另一端粘贴有吸水垫；硝酸纤维膜上设有包被有猪伪狂犬病病毒鄂A株的检测线和包被有羊抗鼠IgG质控线，检测线与质控线相互平行，检测线靠近金标结合垫一端，质控线靠近吸水垫一端。免疫胶体金试纸条放置于试纸卡的卡体中，检测线和质控线设置在其检测窗孔所对应的位置。该试纸卡用于猪血清中伪狂犬病病毒gE蛋白抗体的快速检测，其结构简单，操作方便，灵敏度高、结果清晰。
一种检测猪血清中伪狂犬病病毒 ge 蛋白抗体试纸制备方法应用

[发明专利]一种猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位模拟肽及制备方法和应用-CN201610179886.X在审
发明人： 但汉并;王艳伟;董晓辉;徐高原;金梅林;陈焕春 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2016-03-25 - 公布日： 2016-12-07 - 主分类号： C07K14/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位模拟肽及制备方法和应用，其步骤：A、以杆状病毒表达的猪瘟病毒E2蛋白免疫BALB/C小鼠，制备针对E2蛋白的单抗克隆抗体，经筛选鉴定获得一株具有阻断效果的单抗4A7。B、将此单抗纯化并包被在酶标板上，利用噬菌体12肽库进行筛选，每轮筛选加大筛选压力，最后获得高亲合力的阳性克隆，C、经DNA测序并进行序列比较分析，与原猪瘟病毒E2蛋白序列并不完全一致；D、利用合成肽技术将筛选得到的12个氨基酸序列进行化学合成。一种猪瘟病毒E2蛋白的模拟肽在制备治疗或预防猪瘟ELSIA抗体药物检测试剂盒中的应用。合成的短肽可做为包被抗原可用于猪瘟抗体的检测。大规模生产具有成本低，纯度高的优势。
一种猪瘟病毒 e2 蛋白抗原模拟制备方法应用

[发明专利]一种口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA试剂盒及检测方法-CN201610180011.1在审
发明人：王艳伟;但汉并;范俊青;贾慧琴;周云朵;韦奇勇;李盼盼;董晓辉;徐高原 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2016-03-25 - 公布日： 2016-06-15 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明的目的是在于提供了一种口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA试剂盒，该试剂盒的优点在于使用了合成肽为包被抗原和辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体，减少了非特异性反应，提高了检测的灵敏性和特异性。本发明的另一个目的是在于提供了一种口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA试剂盒的检测方法，该方法敏感性强、特异性好与其荷兰Ceditest试剂盒的总符合率为91.06%，有着很好的应用前景。
一种口蹄疫病毒结构蛋白 abc 抗体阻断 elisa 试剂盒检测方法

[发明专利]一种鸭IgG单克隆抗体及应用-CN201610035541.7在审
发明人：范俊青;但汉并;董晓辉;徐高原;金梅林 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2016-01-19 - 公布日： 2016-04-27 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸭IgG单克隆抗体及应用，本发明提供了一种鸭IgG单克隆抗体，该单克隆抗体特异性高，而且能够大量生产，该单抗能够特异性识别鸭血清IgG的表面蛋白，特异性好，灵敏度高，为建立鸭血清IgG相关检测试剂盒提供基础。该单克隆抗体由杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株4C7，保藏编号为：CCTCC NO：C201608。本发明还提供了基于该鸭IgG单克隆抗体制备的鸭坦布苏病毒抗体的ELISA检测试剂盒，以HRP-小鼠抗鸭IgG单抗作为试剂盒二抗，可大大提高检测结果的特异性和敏感性，可对目前我国流行的鸭坦布苏病毒病病进行有效的诊断，为鸭坦布苏病毒病的防治和流行情况的掌握提供一种快速简便的检测方法。
一种 igg 单克隆抗体应用

[发明专利]一种猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒及应用-CN201410744993.3有效
发明人：华俊清;王艳伟;但汉并;周明光;董晓辉;徐高原;金梅林;陈焕春 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2014-12-09 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒及应用，试剂盒包括：利用杆状病毒表达系统及细胞悬浮培养工艺表达出猪瘟病毒E2蛋白，将其纯化后作为包被板抗原，同时作为免疫原，制备出抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体并标记辣根过氧化物酶（杂交瘤细胞株 4A7 CCTCC NO.C2014229），抗原包被板、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、洗涤液、显色液A、显色液B、终止液；一种猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒在检测猪瘟病毒抗体中的应用。试剂盒检测瘟病毒属中除猪瘟病毒以外的其它阳性血清，无交叉反应，特异性强，灵敏度高，检测时间短，重复性好，与进口试剂盒相比，检测符合率达95%以上。
一种猪瘟病毒阻断 elisa 抗体检测试剂盒应用

[发明专利]猪流感病毒H3亚型胶体金检测试剂盒及其制备方法和应用-CN201310234084.0有效
发明人：金梅林;明晓;但汉并;李淑云;王盛羽;郭学波;张安定;周红波 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2013-06-13 - 公布日： 2013-10-02 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪流感病毒H3亚型胶体金检测试剂盒，包括检测试纸，所述检测试纸包括PVC底板、滤样纸、免疫胶体金垫、免疫硝酸纤维素膜和吸水纸，所述免疫胶体金垫上包被有胶体金标记的单克隆抗体2B8和4H9，所述免疫硝酸纤维素膜上设有包被有单克隆抗体1F6和3D1的检测线和包被有抗鼠IgG抗体的质控线。本发明的试剂盒能直接对猪流感病毒H3亚型的临床样品进行检测，具有特异性强，灵敏度高，检测时间短等特点。
流感病毒 h3 胶体检测试剂盒及其制备方法应用

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