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[发明专利]产生基因修改的动物的方法-CN202310377436.1在审
发明人：杨璐菡 -专利权人： E开创生物技术股份有限公司
申请日： 2018-04-20 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N15/877 文献下载
摘要：本公开提供了产生多重基因修改的动物的方法，例如，猪内源性逆转录病毒(PERV)失活的猪。本公开还提供了提高多重转基因动物出生率的方法。在一些实施方式中，本公开涉及猪细胞的产生和使用，其中猪内源性逆转录病毒(PERV)部分已灭活。在一些实施方式中，克隆无PERV或PERV减少的猪细胞以产生猪胚胎。在一些实施方式中，无PERV或PERV减少的胚胎可生长为成年猪，从中可提取器官和/或组织并用于异种移植到例如人类的非猪动物中。
产生基因修改动物方法

[发明专利]一种利用血清阳离子蛋白递送核酸的方法-CN202310316804.1在审
发明人：曾科;刘佳辰;梁宏伟 -专利权人：南京大学
申请日： 2023-03-24 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用血清阳离子蛋白递送核酸的方法。该方法是将核酸与血清中的阳离子蛋白混合形成纳米颗粒，纳米颗粒与细胞混合孵育从而实现向细胞中递送核酸。发明人基于血清富含的阳离子蛋白可以主动的吸附环境中的带负电的核酸并形成纳米颗粒，并将其中的核酸递送入靶细胞中，开发了一种利用血清阳离子蛋白包裹核酸进行转染，并使核酸在细胞内发挥相应的生物功能的方法。该方法不仅能够避免常用的病毒载体和非病毒载体在进行基因转染过程中可能产生的副作用，而且还能够提高基因转染的效率。
一种利用血清阳离子蛋白递送核酸方法

[发明专利]一种在草鱼中双gRNA位点敲除runx2b基因的方法及应用-CN202211436647.X在审
发明人：高泽霞;聂春红;张东洋;吴亚明;董强 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2022-11-16 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种在草鱼中双gRNA位点敲除runx2b基因的方法及应用，该方法设计靶位点gRNA‑1序列和靶位点gRNA‑2序列；体外转录并纯化分别获得gRNA‑1和gRNA‑2；再以pT3TS‑nCas9n线性化质粒为模板，体外转录合成Cas9mRNA；将gRNA‑1、gRNA‑2和Cas9mRNA混合显微注射到草鱼1细胞期的受精卵中；培育草鱼至三个月时，筛选出有突变的草鱼培育成亲本F0代；继续繁殖培育得到突变品系。该方法简单易行，操作简单，获得草鱼基因突变品系，具有开展水产生物基因功能研究，揭示其遗传发育规律，发掘和利用遗传资源培育高产、抗病抗逆品种等重要的科学意义。
一种草鱼 grna 位点敲 runx2b 基因方法应用

[发明专利]一种基于碳量子点基因传递平台的植物花色调控方法-CN202310366998.6在审
发明人：李永;谭前龙;李自迁;袁奕清;吴海媚;闫文德 -专利权人：中南林业科技大学
申请日： 2023-04-07 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种基于碳量子点基因传递平台的植物花色调控方法。CQDs是利用双氰胺和柠檬酸钠作为碳源，通过水热法合成的带正电颗粒。它可以快速与负电性的siRNA结合形成复合物siRNA‑CQDs。siRNA‑CQDs能够通过细胞壁进入植物细胞，介导RNAi沉默花色调控基因，从而实现植物花色改变。与传统的遗传转化方法以及病毒介导的基因沉默相比，本发明的基于碳量子点基因传递平台的花色调控技术具备多种独特的特点，包括合成的碳量子带有正电荷、花色变化明显、操作简单易行、适用范围广泛等等。因此，该技术为植物花色改变提供了全新的途径，并且具有广阔的应用前景。
一种基于量子基因传递平台植物花色调控方法

[发明专利]通过介孔二氧化硅纳米颗粒递送外源核酸到植物细胞-CN202210026544.X在审
发明人：曹宇虹;蔡垚;刘祝江 -专利权人：国家纳米科学中心
申请日： 2022-01-11 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于介孔二氧化硅纳米颗粒(MSN)向植物细胞递送质粒DNA和RNA的方法。所述的介孔二氧化硅纳米颗粒能够高效负载质粒DNA和RNA，能够将其递送至植物例如烟草叶片及水稻愈伤组织细胞中，并实现报告基因的表达。本发明提供的介孔二氧化硅纳米颗粒具有可控且较小的粒径。10‑30nm的MSN无需任何外力，只需直接侵染烟草叶片或与愈伤组织共同孵育即可实现外源核酸序列的递送，可作为有效递送基因编辑工具的方法。
通过二氧化硅纳米颗粒递送核酸植物细胞

[发明专利]使用阳离子性脂质的转染心肌细胞的方法-CN201980052837.1有效
发明人：吉田善纪;三木健嗣;松本悟 -专利权人：国立大学法人京都大学;武田药品工业株式会社
申请日： 2019-08-08 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明提供向心肌细胞导入核酸的效率优良的手段、特别是转染方法。本发明的向心肌细胞转染核酸的方法包括使含有式(I)所示的化合物或其盐、结构脂质和核酸的组合物与包含心肌细胞的细胞群接触的步骤。n1表示2～6的整数，n2表示0～2的整数，n3表示0～2的整数，L表示‑C(O)O‑或‑NHC(O)O‑，Ra表示直链状C5‑13烷基、直链状C13‑17烯基或直链状C17链二烯基，Rb表示直链状C2‑9烷基，Rc表示氢原子或直链状C2‑9烷基，Rd表示氢原子或直链状C2‑9烷基，Re表示直链状C2‑9烷基，Rf表示直链状C2‑9烷基。
使用阳离子性脂质转染心肌细胞方法

[发明专利]一种带有血小板仿生功能的基因编辑系统在体内诱导CAR-T细胞靶向治疗肿瘤的应用-CN202310421474.2在审
发明人：吴小艳;胡振华 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属协和医院
申请日： 2023-04-19 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种带有血小板仿生功能的基因编辑系统在体内诱导CAR‑T细胞靶向治疗肿瘤的应用，属于免疫肿瘤学领域。所述带有血小板仿生功能的基因编辑系统包括具有高转染活性的内核和包裹所述内核的血小板膜，其中，所述具有高转染活性的内核由以下两部分混合组装而成：(1)基因编辑工具；(2)与所述基因编辑工具带相反电荷的无机物、聚合物或者脂质；所述基因编辑工具包括ZFN系统、TALEN系统或转座子系统。本发明利用血小板膜的仿生功能递送具有基因编辑功能的工具进肿瘤部位，在肿瘤原位捕获T细胞进行编辑，诱导产生体内CAR T细胞对肿瘤进行治疗。
一种带有血小板仿生功能基因编辑系统体内诱导 car 细胞靶向治疗肿瘤应用

[发明专利]基于靶向区域辅助支撑的卵母细胞显微操作系统及方法-CN201810486077.2有效
发明人：黄海波;闫肃;周飞;金国庆;刘吉柱;王则涵;郭浩;孙立宁 -专利权人：苏州大学
申请日： 2018-05-18 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/873 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于靶向区域辅助支撑的卵母细胞显微操作系统及方法，所述显微操作系统包括：真空吸附式悬浮细胞夹持装置，包括旋转平台、设于旋转平台上的螺旋电极、以及设于旋转平台上的真空泵，所述螺旋电极中心设有用于对卵母细胞进行真空吸附的操作区域，所述真空泵控制所述操作区域对卵母细胞进行真空吸附；卵母细胞靶向区域辅助支撑装置，用于对卵母细胞靶向区域透明带进行辅助支撑；压电超声卵母细胞显微操作装置，用于对卵母细胞进行辅助支撑后对卵母细胞的具体显微操作。本发明由于卵母细胞透明带靶向区域有了辅助支撑，透明带穿刺时可以精确定位，结合显微视觉技术，可以真正实现细胞内定点化操作。
基于靶向区域辅助支撑细胞显微操作系统方法

[发明专利]编码GLP-1受体激动剂融合物的病毒载体和其在治疗代谢性疾病中的用途-CN202180072447.8在审
发明人： J·M·维尔松;C·欣德雷尔;堀内真 -专利权人：宾夕法尼亚州大学信托人
申请日： 2021-08-24 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：提供了用于治疗受试者的代谢性疾病的组合物和方法。提供了一种病毒载体，所述病毒载体包含核酸分子，所述核酸分子包括编码GLP‑1受体激动剂融合蛋白的序列和指导其表达的调控序列。
编码 glp 受体激动剂融合病毒载体治疗代谢性疾病中的用途

[发明专利]一种降低叶蝉对植物趋向性的方法及其在茶田防治叶蝉中的应用-CN202310084326.6在审
发明人：张正群;张瑞瑞;伦晓月;张瑜 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2023-02-09 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种降低叶蝉对植物趋向性的方法及其在茶田防治叶蝉中的应用，属于基因干扰技术领域。本发明降低叶蝉对植物趋向性的方法，是通过RNA干扰的方法使叶蝉EonuOR7、EonuIR25a、EonuGR1和/或EonuOR2基因表达沉默，降低叶蝉对植物的趋向性。本发明以叶蝉嗅觉受体为靶标，通过干扰EonuOR7、EonuIR25a、EonuGR1和/或EonuOR2基因的表达，降低叶蝉的嗅觉能力，从而减弱叶蝉对苯乙醛、苯乙酮、苯乙醇等挥发性物质的反应率。这对于富含苯乙醛、苯乙酮、苯乙醇等挥发性物质的植物的虫害防治而言，具有显著而有效的意义。
一种降低植物向性方法及其防治中的应用

[发明专利]核酸递送载体及功能协同的药物组合物应用-CN202210865687.X在审
发明人：黄渊余;张天 -专利权人：苏州炫景生物科技有限公司
申请日： 2022-07-21 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明涉及医药技术领域，公开了一种核酸递送载体及功能协同的药物组合物应用。该载体的结构如式(I)所示，其制备方法包括：在反应溶剂I存在的条件下，将式(II)所示的化合物、2,2‑双(溴甲基)‑1,3‑丙二醇、双(2‑羟乙基)二硫化物与L‑赖氨酸二异氰酸酯混合进行反应I，再与甲氧基聚乙二醇‑羟基混合进行反应II得到反应物P1；在反应溶剂II存在的条件下，将反应物P1与式(IV)所示的化合物混合进行反应III。药物组合物含有siRNA以及核酸递送载体。该载体在光刺激下可有效诱发免疫源性细胞死亡效应，药物组合物具有内涵体逃逸能力，进行核酸高效递送，实现基因治疗、光动力和免疫治疗的有机协同，有效抑制多种肿瘤细胞的增殖。
核酸递送载体功能协同药物组合应用

[发明专利]高效细胞电转染缓冲液及其制备方法、应用-CN202310277170.3在审
发明人：刘实;朱应;聂龙宇;黄玙;佘应龙 -专利权人：武汉大学
申请日： 2023-03-17 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效细胞电转染缓冲液及其制备方法。本发明在传统的电转染缓冲液中添加三磷酸腺苷二钠盐可以防止经过电转后的细胞的细胞质泄露，有助于细胞膜上的穿孔闭合。加入碳酸氢钠可以维持缓冲体系的稳定，增强对细胞的保护从而增加细胞存活。另外加入的葡萄糖可以为细胞增加营养也可以增加细胞存活率。与传统的电转染缓冲液相比，本发明可以提高外源基因在目标细胞的电转染效率并能提高细胞存活率。本发明的配置方法简单，经济实惠，适用于多种电转染仪器。
高效细胞转染缓冲液及其制备方法应用

[发明专利]一种基于植物细胞的活体功能材料及其制备方法-CN202310276952.5在审
发明人：余子夷;王渝捷;张静;孙紫彤;邸正傲 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-03-21 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于植物细胞的活体功能材料，所述的活体功能材料由两部分组成，第一部分是作为活性单元的植物细胞，第二部分是尺寸在500纳米到1000纳米的颗粒水凝胶；植物细胞通过在颗粒水凝胶的生长构建活体功能材料。本发明利用植物细胞在颗粒凝胶中生长特性，基于颗粒凝胶提供植物细胞生长的场所，并利用颗粒凝胶的生物相容性和可注射性，对其进行生物打印赋型，采用本发明，可以实现植物细胞的三维培养，同时可以通过颗粒凝胶为载体增大细胞与培养基的接触面积，促进营养物质交换，实现植物细胞活体功能材料构建，在生物催化、生物传感、环境修复等方面具有潜在的用途。
一种基于植物细胞活体功能材料及其制备方法

[发明专利]一种基于改性聚苯乙烯微塑料的基因传递平台的植物花色调控方法-CN202310366996.7在审
发明人：李永;吴海媚;李自迁;冯晓鑫;谭前龙;闫文德 -专利权人：中南林业科技大学
申请日： 2023-04-07 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种基于改性聚苯乙烯微塑料基因传递平台的植物花色调控方法，所述的改性聚苯乙烯微塑料是指利用聚乙烯酰胺修饰的聚苯乙烯微塑料，其带正电，能够与负电性的siRNA迅速结合。siRNA‑PS复合物可越过植物的细胞壁进入细胞，介导RNAi沉默花色调控基因，实现植物花色改变。本发明改变了微塑料是污染物的传统观念，探索了微塑料的其他有利用途，使花色改变显著，方法简便，易操作，为纳米载体载运siRNA提供了一种新思路，实现污染物再利用。
一种基于改性聚苯乙烯塑料基因传递平台植物花色调控方法

[发明专利]一种基于细菌外膜囊泡的蛋白质递送的方法-CN202310092773.6在审
发明人：禾立春;王欢;王冠;赵小玲;刘买利 -专利权人：中国科学院精密测量科学与技术创新研究院;湖北光谷实验室
申请日： 2023-02-10 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于细菌外膜囊泡的蛋白质递送的方法，该方法先将含目的蛋白的分泌表达型质粒导入细菌中培养，再通过IPTG诱导表达使目的蛋白包裹进入细菌外膜囊泡，随后细菌外膜囊泡与细胞共培养，将包裹的目的蛋白递送进胞质。本发明拓宽了细菌外膜囊泡包裹的异源蛋白的种类和数量，保证了多种异源蛋白向胞质的高效递送，为胞内成像及纳米抗体等治疗性蛋白的胞内靶点的开发提供了可行性方案。
一种基于细菌外膜囊泡蛋白质递送方法