本发明提供一种曼氏无针乌贼TNF基因及其用途，属于基因工程技术领域，曼氏无针乌贼TNF基因具有SEQ ID NO:1的碱基序列，该基因编码的TNF蛋白具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列。本发明曼氏无针乌贼TNF基因在曼氏无针乌贼脾脏、胰腺、腮、心脏、脑、视叶、肝脏和肠等8种组织中的都有表达，其在肝脏中的表达量最高；该基因对嗜水气单胞菌或副溶血性弧菌感染后的识别较为敏感且反应迅速；该基因的表达载体和编码的蛋白质为曼氏无针乌贼用免疫增强剂，能够提高曼氏无针乌贼的免疫力，尤其是提高曼氏无针乌贼对嗜水气单胞菌或副溶血性弧菌的免疫力。
本发明涉及非洲爪蟾B淋巴细胞增殖诱导配体TNFSF13基因和蛋白质制备及应用。非洲爪蟾增值诱导配体cDNA具有SEQ ID NO.1所示的序列。其克隆方法如下：提取脾脏总RNA并进行逆转录；设计引物扩增该基因的中间片段，然后根据中间片段再分别设计引物扩增3’和5’末端序列，测序正确后进行序列拼接，得到全长cDNA序列。将胞外可溶段连接到SUMO原核质粒中并转到大肠杆菌Rosseta(DE3)中表达，Ni+-NTA柱纯化后得到的重组蛋白His6-XsAPRIL。所述的非洲爪蟾B淋巴细胞增殖诱导配体TNFSF13（APRIL）的cDNA可通过现有基因工程的方法，生产重组蛋白，用于进一步的研究。
本发明涉及一种可溶性突变BAFF蛋白及其编码基因与应用，属于生物技术技术领域。本发明所述的可溶性突变BAFF蛋白，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码该可溶性突变BAFF蛋白的基因，核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明所述的突变的smBAFF保留结合BAFF受体能力而丧失活化受体的能力，因而不刺激B细胞增殖活化，作为B细胞靶向载体更为安全；编码smBAFF的基因，非常适合在大肠杆菌中表达，同时通过发酵与纯化工艺优化，提高表达量，具有高表达、高稳定的优点。本发明获得保留受体结合活性而缺失受体活化活性的人BAFF突变体-smBAFF，并可高效、简便、低成本的制备重组人smBAFF。
