[发明专利]一种新的人毛发蛋白及其编码序列

说明书

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种新的人基因核苷酸序列。更具体地说，本发明涉及新的人毛发蛋白HP(Hair Protein，毛发蛋白)的cDNA序列，该cDNA编码的蛋白是小鼠HGT 1α(High-glycine/tyrosine protein type 1α，1α型高甘氨酸/酪氨酸蛋白)的同系物。本发明还涉及由该核苷酸序列编码的多肽，这些多核苷酸和多肽的应用，以及所述多核苷酸和所述多肽的生产方法。

毛发是一种角质化组织，它由毛囊内生成，并具有外层角质鞘(cuticle sheath)、内层皮质(inner cortex)和中央髓质(central medulla)这一普遍结构。构成毛发的主要结构蛋白是角蛋白，这些角蛋白以及其它一些相关蛋白间相互交联从而构成毛发的主干。

组成毛发的蛋白据估计有50-100种之多，这些蛋白可能分属于至少10个不同的家族(Powell BC et al．Ann NY Acad Sci 1991，642：1-20)。角蛋白同样是由几个多基因家族构成：角蛋白可以被分为中间丝(intermediate filaments，IF)和中间丝相联蛋白(intermediate filament-associated proteins，IFAP)。而后者，又可以细分为高硫(high sulfur)蛋白，超高硫(ultra-high sulfur)蛋白和高甘氨酸/酪氨酸蛋白(high-glycine/tyrosine proteins，HGTps)。

HGTps是角蛋白中最小的一类蛋白，多数分子量小于10000Da。根据HGTps的氨基酸组成来看，它们又可进一步分为Ⅰ型蛋白和Ⅱ型蛋白，其中I型相对而言含半胱氨酸较少而含苯丙氨酸较多，Ⅱ型则相反，两种类型都不含有甲硫氨酸(Powell BC et al.Ann NY Acad Sci 1991，642：1-20)。

由于毛发蛋白种类繁多，其命名也因些比较复杂。因此，有必要对其命名有一统一规定。1990年，有文献对其命名提出建议(MacKinnon，P.J.J.Cell Biol.1990，111：2587-2600)。在这一建议中，HGTps中的Ⅰ型被细分并分别称为KRTAP7和8(或简称为KAT7，8)，Ⅱ型则被称为KAP6。

不同物种的毛发中，HGTps(或KAPs)的含量相差非常大，从人和Lincoln sheep中的少于3％，到美利奴羊毛中的13％，到echidna quill中的高达30-40％(Gillespie JM，Comp.Biochem.Physiol.1972，41B：723-734)。这种含量的差异性有可能有不同的解释，其中之一是从人毛发中提取蛋白是极其困难的，有时抽提到的只有总蛋白的5％(即可能由实验误差所致)(Gillespie JM，et al．1991 in Physiology，Biochemistry，and Molecular Biology of the Skin(Goldsmith LA ed)2nd Ed，pp.625-659，Oxiford University Press，New York)。

因此，为了治疗和美容的目的，开发和研究人的毛发蛋白具有重要意义。

本发明的一个目的是提供一种新的多核苷酸，该多核苷酸编码小鼠HGT 1α的同系物，本发明的cDNA被命名为人HP基因，它是一种毛发蛋白基因。

本发明的另一个目的是提供一种新的人的小鼠HGT 1α同系物，该蛋白被命名为人HP蛋白，它是人的高甘氨酸/酪氨酸蛋白。

本发明的再一个目的是提供一种利用重组技术生产所述的新的人HP多肽的方法。

本发明还提供了这种人HP核酸序列和多肽的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，它包括：编码具有人HP蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸1-246位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.3中从核苷酸1-246位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码一多肽，该多肽具有SEQID NO.4所示的序列。更佳地，该序列具有SEQID NO.3中从核苷酸1-246位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离的人HP蛋白多肽，它包括：具有SEQID NO.4氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO.4序列的多肽。