[发明专利]用于工业发酵生产赤霉素A4及A7的藤仓赤霉菌突变株

权利要求书

1、藤仓赤霉菌菌株y-08，其菌丝呈白色，略产紫色色素，能产生卵圆形至长圆形小分生孢子，该菌株于1997年10月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNO.0325。

2、如权利要求1所述的藤仓赤霉菌菌株，其特征在于，所述的菌株在藤仓赤霉菌的正常发酵条件下发酵产生赤霉素A₄、A₇及A₃产物的比例为70-80∶10-13∶7-20(重量比)。

3、一种大规模发酵生产赤霉素A₄和A₇的方法，包括如下步骤：

(1)将权利要求1的菌株接种在摇瓶中的含有1％淀粉、1.5％豆饼粉、1％葡萄糖、0.05％(NH₄)₂SO₄、0.12％KH₂PO₄、0.1％MgSO₄的液体种子培养基中，28℃振荡培养约48小时得到一级种子培养物；

(2)将一级种子培养物以0.1-2％(体积比)的比例接种入种子罐中的种子培养基中，28℃通气搅拌培养约30小时，得到二级种子培养物；

(3)将二级种子培养物以5-10％(体积比)的比例接种入发酵罐中的含有7％淀粉、0.9％豆饼粉、0.3％花生饼粉、0.05％(NH₄)₂SO₄、0.08％KH₂PO₄、0.05％MgSO₄、0.001％硼酸，pH5.8的发酵培养基中，于28℃通气搅拌培养约150-168小时，收集发酵液；

(4)过滤发酵液，用大孔吸附树脂柱吸附，用丙酮洗脱吸附树脂柱，浓缩得到含赤霉素类物质的浓缩液；

(5)将浓缩液pH调整为约pH6，加乙酸乙酯萃取，浓缩乙酸乙酯萃取液得到GA₄结晶和母液；

(6)将步骤(5)提取GA₄后的萃余液的pH调节至约pH4.4-4.5，加乙酸乙酯萃取，浓缩乙酸乙酯萃取液得到GA₇结晶和母液。

4、如权利要求2所述的方法，其中步骤(3)用如下步骤取代：将接种后的发酵培养基于28℃培养48小时后，加入CaCO₃悬浮液，调整pH至约pH6，并将罐温升至34℃，继续培养约120小时，收集发酵液。