[发明专利]T细胞抗原受体V区域蛋白及其制备方法

权利要求书

1、一种生产重组全长T细胞抗原受体V区域蛋白的方法，包括：

(a)用含编码全长T细胞抗原受体V区域蛋白的区域和可诱导性细菌启动子的重组表达载体转化感受态细菌宿主细胞；

(b)诱导a步骤中被转化细菌宿主细胞中的可诱导细菌启动子；和

(c)回收重组全长T细胞抗原受体V区域蛋白。

2、权利要求1的方法，其中，该可诱导性细菌启动子选自化学调节启动子和热调节启动子。

3、权利要求2的方法，其中该表达载体还含有选自lacI基因或lacI^q基因的调节基因序列。

4、权利要求2的方法，其中该表达载体包括lacIts基因。

5、权利要求4的方法，其中lacIts基因取向与T细胞抗原受体V区域蛋白编码区相同。

6、权利要求1的方法，其中该细菌启动子选自lac启动子、tac启动子和trc启动子。

7、权利要求6的方法，其中该重组表达载体还含有前导序列。

8、权利要求7的方法，其中该前导序列选自来自大肠杆菌的热稳定性肠毒素STII前导和来自胡萝卜欧文氏杆菌的pelB前导。

9、权利要求8的方法，其中该重组表达载体还含有衍生自大肠杆菌的STII前导序列的前导序列，该感受态细菌宿主细胞是不带有lacI或lacI^q基因的细胞。

10、权利要求9的方法，其中该细菌宿主菌株是一蛋白酶缺陷菌株。

11、根据权利要求10的方法，其中该蛋白酶缺陷菌株选自SG22094、SG21163和SG21173。

12、根据权利要求1的方法，其中，该表达载体还含有g10和微型顺反子序列(SEQ ID NO.28)调节元件。

13、权利要求1的方法，其中该重组表达载体还含有：

a)一个trc启动子，作为可诱导细菌启动子；

b)一个核糖体结合位点；

c)一个转录终止子；

d)一个lacIts调节基因序列；

e)一个pBR322复制起始点；和

f)一个四环素抗性基因。

14、权利要求13的方法，其中该重组表达载体选自pKTBi-Vβ5.3和pKBi-Vβ5.3。

15、权利要求13的方法，其中该重组表达载体还含有前导序列。

16、权利要求15的方法，其中该重组表达载体选自pK-Vβ5.3、pKT-Vβ5.3、pKTB-Vβ5.3和pKB-Vβ5.3。

17、一种表达载体，含一个在lacIts基因控制下可诱导细菌启动子，其中所述lacIts基因控制编码全长T细胞抗原受体V区域蛋白的区域的表达。

18、权利要求17的表达载体，其中该可诱导细菌启动子选自lac启动子、tac启动子和trc启动子。

19、权利要求17的表达载体，其中该可诱导细菌启动子是trc启动子。

20、权利要求19的表达载体，它还包括前导序列。

21、一种表达载体，它从5′至3′方向包括：

a)一个trc启动子；

b)一个核糖体结合位点；

c)一个编码全长T细胞抗原受体V区域蛋白的区域；

d)一个转录终止子；

e)一个lacIts调节基因序列；

f)一个pBR322复制起始点；和

g)一个四环素抗性基因。

22、用权处要求17的表达载体转化的细菌细胞。

23、权利要求1 7的表达载体，其中所述载体选自pK-STII-Vβ5.3，pKT-Vβ5.3，pKTB-Vβ5.3，pKTBi-Vβ5.3和pKBi-Vβ5.3。

24、由权利要求13的方法生产的全长T细胞抗原受体V区域蛋白。

25、含有全长T细胞抗原受体V区域蛋白的药物组合物。