[发明专利]反义多核苷酸

说明书

同一个基因的有意义链或由它转录的mRNA互补并能杂交的核苷酸寡聚物（寡核苷酸）是反义寡聚物。当一个目标基因的有意义链或一个mRNA暴露于它的反义寡聚物，两者将会杂交，其结果是，只要此寡聚物一直杂交着，那么此基因或mRNA的转录将受到封闭。因而，该基因编码的蛋白质（如果该基因是编码调节蛋白的，那就是一组蛋白质）就不会产生。反义寡聚物因其性质有许多用途。例如依靠它们与目标核苷酸结合的能力，可用于诊断。而且，它们对蛋白质合成的影响使得反义寡聚物在治疗上也有用。反义寡核苷酸的概念及其组成与化学性质已总结在Chemical  Reviews  90，544-579（1990）中。

NF-kB转录因子复合物是一个多效激活剂，它参与多种细胞和病毒基因的诱导作用参见：

（Baeuerle，P.A.，和D.Baltimore（1989）Genes  Dev.3：1689-1698;Lenardo，M.J.，和D.Baltimore（1989）Cell  58：227-229）.

此活性复合物是由两个亚基组成的，它们称为P50和p65，参见：

（Baeuerle和Baltimore（supra）;Ghosh，S.和D.Baltimore（1990）Nature（London）344：678-682）.

编码p50的基因已克隆出来，参见：

（Ghosh，S.et  al.（1990）Cell  62：1019-1029（Ref.1）;Kieran，M.et  al.（1990）Cell  62：1007-1018（Ref.2））和p65（Nolan，G.P.et  al.（1991）Cell  64：961-969（Ref.3）;Ruben，S.et  al.（1991）Science  251：1490-1493（Ref.4））;

并且这两个蛋白质的N-末端显示出与癌基因rel的产物有相当大的同源性。上面提到的参考文献1-4在表Ⅰ（实施例1）中以同样的数码被引用。

许多细胞粘合分子，（CAMs），包括ICAM-1

（Voraberger，G.et  al.（1991）Immunol.147：2777-2786），vimentin

（Lilienbaum，A.et  al.（1990）J.Virol.64：256-263）和ELAM-1

（Whelan，J.et  al.（1991）Nucleic  Acids  Res.19：2645-2653）

在它们的5′调控区内有NF-kB结合部位。NF-kB可以通过调节这些粘合分子而影响细胞粘合，从而影响细胞生长。

有可能利用细胞的粘合来检测反义功能，例如用反义寡聚物对公认粘合分子和结肠直肠癌（DCC）中缺失的肿瘤抑制基因进行抑制，导致种种细胞的分离。

（Narayanan，R.et  al.（1992）Oncogene  7：553-561）.

细胞与细胞以及细胞与底质间的粘合是通过几个不同的受体家族介导的，这些受体以特殊的细胞外基质（ECM）蛋白和相邻细胞的配基为靶子。

（Albelda，S.M.和C.A.Buck（1990）FASEB  J.4：2868-2880）.

这些受体也影响细胞生长、分化、细胞连接形成以及细胞极性的各个方面。

1990，supra;Hynes，R.O.（1992）Cell  69：11-25）.

在组织培养细胞中，焦点接触（细胞结合到ECM的特殊膜区）的形成包括蛋白多糖如肝素硫酸盐以及多种一体蛋白分子。一体蛋白是杂二聚体分子，它具有细胞与基质和细胞与细胞粘合的两种受体的功能（Albelda和Buck，1990，supra）。免疫球蛋白超基因家族的粘合分子也参与细胞与细胞间粘合。这些分子在胚胎发生、伤口愈合、炎症反应、血凝固和转移中起着重要的作用。

（Albelda和Buck，1990，supra;Hynes  1992，supra）.

认识到细胞粘合分子与炎症有关已导致新的治疗方法的产生。特殊细胞粘合分子的单克隆抗体已用于抑制脓毒性休克和局部缺血-再灌注操作中皮肤炎症区的嗜中性募集。

根据本发明，与编码NF-kB转录因子的基因的一部分基本互补并杂交以基本阻止由上述基因决定的NF-kB转录因子产生的任何寡聚物，都能用来防止细胞粘合。细胞粘合在诸如炎症、伤口愈合、肿瘤生长的情况中是一个重要的因素。这些寡聚物有减轻这些症状的治疗应用价值。