[发明专利]溶液和生物体液中多肽和蛋白质的定性定量测定方法无效
| 申请号: | 91104059.5 | 申请日: | 1991-06-12 |
| 公开(公告)号: | CN1058846A | 公开(公告)日: | 1992-02-19 |
| 发明(设计)人: | 弗朗西斯科·德拉·瓦莱;兰弗兰科·卡列加罗 | 申请(专利权)人: | 菲迪安股份公司 |
| 主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;A61B10/00 |
| 代理公司: | 上海专利事务所 | 代理人: | 张恒康 |
| 地址: | 意大利阿*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 溶液 生物 体液 多肽 蛋白质 定性 定量 测定 方法 | ||
1、对生物体液或溶液中的多肽或蛋白质待测成分进行定性或定量分析的一种方法,其特征在于,包括以下步骤:
(a)生产对上述多肽或蛋白质某一肽段的抗体;
(b)将上述生物体液或溶液样品与上述抗体进行反应,同时要加标记的上述肽段,从而能够检测上述抗体与上述标记肽段所形成的复合物;
(c)从b步骤的反应混合物中去除未起反应的生物体液或溶液样品及标记肽段;
(d)将剩余的抗体与能够检测抗体-标记肽段复合物的试剂一起保温;
(e)对d步骤的上述抗体复合物进行定性和定量检测和测定。
2、如权利要求1所述的方法,其特征在于上述多肽、蛋白质或肽段的氨基酸序列由上述多肽或蛋白质的核苷酸序列获得。
3、如权利要求1所述的方法,其特征在于上述抗体可以游离于溶液中,也可以结合或吸附在载体上。
4、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述抗体复合物在接受检测和测定之前即结合在载体上,或从溶液中沉淀出来。
5、如权利要求1所述的方法,其特征在于上述抗体对上述待测成分有专一性。
6、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述抗体是通过所述待测成分的氨基酸序列所含的一个肽段进行免疫反应而获得的。
7、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述抗体是通过不用佐剂,只用所述待测成分的氨基酸序列中所含的一个肽段进行免疫反应而获得的。
8、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述肽段存在于所述多肽或蛋白质待测成分中的亲水区域中。
9、如权利要求8所述的方法,其特征在于上述肽段的确定需借助于可描绘所述多肽或蛋白质待测成分的水合趋势图的计算机程序。
10、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述待测成分为一种可溶性细胞激动素。
11、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述待测成分是一种生长因子。
12、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述待测成分为人体来源的神经生长因子。
13、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述抗体为多克隆抗体。
14、如权利要求1所述的方法,其特征在于使用一种通过酶反应可以测定的半抗原-肽段复合物作为竞争物和检测试剂。
15、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述抗体对人体神经生长因子有专一性。
16、如权利要求15所述的方法,其特征在于所述抗体结合在固相载体上。
17、如权利要求15所述的方法,其特征在于所述固相载体为微量滴定板。
18、如权利要求16所述的方法,其特征在于使用非离子型去垢剂从所述抗体中去除所述未反应的生物体液或溶液及标记肽段。
19、如权利要求18所述的方法,其特征在于所述非离子型去垢剂为吐温20。
20、如权利要求1所述的方法,其特征在于所述生物体液或溶液选自如血清、隙间流液、淋巴液、关节液、水性体液、尿液、脑背髓液、汗液、泪液、唾液、胃分泌液、肠分泌液、胆汁、乳汁和培养溶液等类型的液体。
21、用于对生物体液或溶液中多肽或蛋白质待测成分进行定性或定量测定的试剂系统,包括:
抗待测成分的抗体,对所述多肽或蛋白质待测成分的某一肽段有专一性,并能识别所述多肽或蛋白质的待测成分。
某一肽段,能被所述抗体识别并由检测系统加以检测。
22、如权利要求21所述的试剂系统,其特征在于所述抗待测成分抗体通过其氨基酸顺序位于所述待测成分序列中的某一肽段的免疫作用而获得。
23、如权利要求22所述的试剂系统,其特征在于所述肽段为所述待测成分的亲水区域中的序列。
24、如权利要求23所述的试剂系统,其特征在于上述肽段的确定需借助于描绘所述待测成分的水合趋势图的计算机程序。
25、如权利要求21所述的试剂系统,其特征在于所述抗待测成分的抗体通过不需佐剂的免疫作用而获得。
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