[发明专利]母育酚在疫苗中用作佐剂

说明书

本发明涉及含有母育酚(tocols)的稳定乳剂的疫苗以及制备该疫苗的方法。

为预防传染性疾病，通常是给人或动物接种含免疫原性物质的疫苗，以产生保护性抗体。

为此目的，例如可使用活的但最好是非感染性的或杀死的病原体，或使用失去了感染性成分的病原体的抗原部分。

在后两种情况下，还须在抗原内加入一种或多种能刺激被保护机体产生免疫反应的成分。这类免疫反应刺激成分通常称为佐剂。弗氏完全佐剂是用矿物油和杀死的分枝杆菌制成的油包水(W/O)型乳剂，其被看作是最强有力的佐剂之一。其他已知佐剂是矿物油乳剂，如弗氏不完全佐剂，以及植物油如花生油、玉米油、棉籽油及葵花籽油，和半合成油，如Miglyol 812N和Myritol油的乳剂。

然而，上述乳剂，特别是其于矿物油的油包水型乳剂，可引起严重的组织刺激、炎性肿胀或在给药部位形成囊泡，所以对人或动物体常规使用这些乳剂不是太理想的，而且在某些情况下忌用这些乳剂。再者，以W/O型乳剂为基础的疫苗粘度大，因此也更难于注射。

降低油含量可使粘度升高，以至不能注射。同时还可影响乳剂的稳定性。

Afzal等人(Veterinary Immunology andImmunopathology7(1984)，293-304)描述了在预防羊布鲁氏杆菌(Brucella ovis)感染的疫苗中，使用α-生育酚乙酸酯作为油包水型乳剂。但该疫苗含有约50％d1-α-生育酚乙酸酯，所以很粘稠，故使用很不方便。

本发明的目的在于提供一种不会对人或动物体引起上述局部不利影响，同时又易于使用的疫苗。

根据本发明的疫苗，特征在于它含有由母育酚作为佐剂在水中形成的稳定乳剂。

已令人惊异地发现，这种类型的母育酚衍生物的水包油型乳剂具有粘度低易于处理的有利特征，同时具有至少与含相应母育酚衍生物之油包水型乳剂一样好的佐剂作用。该结果显然有违于水包油型乳剂作为佐剂不如油包水型乳剂好这一已知事实(Herbert W.J.，The mode of action of mineral-oil emulsionadjuvants on antibody production in mice，Immunology 14(1968)，301-318；Herbert，W.J.，Mineral-oil adjuvants and the immunizationof laboratory animals，in：Hand book of experimen-tal immunology Vol.3，ed.by D.M.Weir，thirdedition，Blackwell.1979)。

可见，根据本发明的疫苗，含有一种具有良好佐剂特性的稳定的水包油型乳剂，其在给药后不会引起不利的局部影响，并且很易于注射。

根据本发明用作佐剂的母育酚类化合物是指母育酚或其衍生物。可用下列通式I代表母育酚和其衍生物：其中R可以是H或选自烷基、烷氧基、酰氧基、羟基、硫酸根或磷酸根

基团的一个或多个相同或不同的取代基；

R₁和R₃各自是H或烷基；

R₂是H或烷基，且在各个单元中可以是不同的；

虚线表示单元中存在或不存在附加的碳-碳键，n为1至10的数值

为。

R、R₁、R₂和R₃中的烷基基团尤其可选自有1-4个碳原子的线性或分支碳链，如甲基、乙基、丁基或异丁基。

可用式II代表母育酚化合物：

母育酚衍生物可以是：5-甲基母育酚、7-甲基母育酚、8-甲基母育酚、5，7-二甲基母育酚、5，8-二甲基母育酚、7，8-二甲基母育酚、5，7，8-三甲基母育酚、8-甲基母育三烯甘油酯(8-methyltocotrienol)、7，8-二甲基母育三烯甘油酯、5，8-二甲基母育三烯甘油酯、5，7，8三甲基母育三烯甘油酯、5，7-二乙基母育酚、5，7-二甲基-8-乙基母育酚、5，7-二乙基-8-甲基母育酚，这些化合物的酯如甲酸酯、乙酸酯、琥珀酸酯、烟酸酯、硫酸酯和磷酸酯，这些化合物的醚如甲醚和乙醚，以及6-脱氧母育酚。

用于本发明的优选母育酚可由下列通式III代表：其中R₄是羟基、酰氧基，所说的基团最好是衍生于有1-8个碳