[发明专利]细胞生长抑制因子

说明书

本发明涉及抑制细胞增生，尤其是抑制人体乳房癌细胞增生的蛋白质生长因子。

在不断探索改进治疗癌症方法方面，防治肿瘤细胞生长而对宿主有机体无严重副作用已成为人们长期以来的研究目标。人们早就认为，造成赘生细胞增生的部分原因可能是由于多肽生长因子的畸形表达。从而导致赘生细胞群体的自刺激。因此，能够抑制生长因子的天然细胞抑制因子的鉴定可能对了解和控制赘生细胞的发展来说是必不可少的。

由于肿瘤细胞的异质性，即肿瘤内的所有细胞对所给药物的反应可能不全相同，所以肿瘤对治疗药物的反应各有不同。细胞生长调节肽往往具有多重生物活性，包括生长刺激活性和生长抑制活性，这两种活性决定于靶细胞的类型。具体而言，各种生长调节多肽，如干扰素、肿瘤坏死因子α、白细胞间素和转移生长因子α和转移生长因子β，均具有抑制某些肿瘤细胞增生的活性。这些多肽可以单独的、相加的和协同的作用方式对肿瘤细胞增生产生抑制作用。

在体外具有相加和协同作用的细胞生长抑制因子的结合，在体内对肿瘤块中或不同转移部位的肿瘤细胞亚群具有选择性抑制作用，从而从整体上大大减少肿瘤细胞的数量，其疗效远远超过目前治疗用的药物。为此，引起了人们对研究生长调节分子结合的兴趣，这些分子结合使用，可以抑制肿瘤细胞的生长，从而可以降低个别多肽的有效剂量和减少可能同个别多肽的较高浓度有关而引起的不需要的副作用。

本申请的对比文献有：Hirano等报导的BSF-2的DNA序列（Nature（186）324，73-76;Proc.Natl.Acad.Sci.USA（1987）84，228-231）。Billiau介绍的IFN-β2的性质，尤其是其能促进β细胞的生长和分化的性质（Immunology    Today（1987）8，84-87。May等报导的β2-IFN序列（Proc.Nat1.Acad.Sci.USA（1986）83，8957-8961）。Sehgal等介绍的β-INF和BSF-2的一致性（Scicnce（1987）235，731-732）。

本发明提供的名为BCIF的细胞生长抑制因子可用作赘生细胞，尤其是人体乳房癌细胞增生的抑制因子。BCIF可单独使用或者与具有抗赘生活性的其他生长因子结合使用。BCIF的特征可从人体肺癌细胞得到，其分子量约21000道尔顿，能抑制赘生细胞的生长。生长因子的片段可用于产生抗体，这种抗体具有降低抑制作用或其本身就能用于产生具有生长抑制活性的抗个体基因型抗体。

图1表示提高BCIF在乳房癌细胞系中的浓度可增加对细胞生长的抑制作用。

图2表示使用TBF    β和BCIF相结合与仅用其中的一个多肽进行比较，显示它们对抑制人体黑素瘤细胞增生的作用。

本发明提供了包括BCIF及其片段的组合物以及制备和使用这些组合物的方法。细胞生长抑制因子BCIF的特征是由人体肺癌细胞系H-2981产生的。BCIF的进一步特征是：经SDS-PAGE凝胶电泳分析测定，其分子量约为21000道尔顿，具有单独或至少与一个其他能抑制赘生细胞增生的生长因子结合来抑制赘生细胞的生长。这种结合对抑制细胞生长的作用可以是相加作用，也可以是协同作用。

BCIF的部分氨基酸顺序如下：

V-P-P-G-E-D-S-K-D-V                    10

A-A-P-H-R-Q-P-L-T-S                    20

S-E-R-I-D-K-Q-I-R-Y                    30

L-L-D-G                                            34

上述顺序系使用各个氨基酸的一个字母的氨基酸缩写符号。BCIF的这个氨基酸顺序与Hirano等报导的BSF-2成熟蛋白质因子的氨基末端的氨基酸残基2-35相同（Nature（1986）324，73-76），其与May等报导的氨基酸30-63的IFN-β2顺序相同（Proc.Natl.Acad.Sci.USA（1986）83，8957-8961）。

BCIF可通过各种途径得到。它从天然发生源可以获得，例如从癌细胞系可以得到。这种细胞系的一个实例是H-2981，这是一个人体肺癌细胞系，大量出版物已有介绍，例如Hellstrom等在Proc.Natl.Acad.Sci    USA（1986）83，7059-7063中所作的介绍。癌细胞在已知支承它们增生的生长培养基中生长，从培养基中分离得到BCIF。