[其他]纯化的热稳定性酶以及用其进行扩增、检测和/或克隆核酸顺序的方法无效
| 申请号: | 87105787 | 申请日: | 1987-08-21 |
| 公开(公告)号: | CN87105787A | 公开(公告)日: | 1988-05-11 |
| 发明(设计)人: | 亨利·安东尼·欧力契;格伦·霍恩;兰德尔·基切·塞基;卡里·倍克·默立斯;戴维·赫劳·吉尔范特;法兰塞斯·考克·劳尔;苏赛恩·斯托番尔 | 申请(专利权)人: | 塞特斯公司 |
| 主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;C12N9/00;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 上海专利事务所 | 代理人: | 张绮霞 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 纯化 热稳定性 以及 进行 扩增 检测 克隆 核酸 顺序 方法 | ||
1、一种用于催化核苷酸三磷酸酯结合而形成与核酸模板链互补的核酸链的纯化(的)热稳定性酶。
2、根据权利要求1所述的酶,其特征在于所说的酶是DNA聚合酶。
3、根据权利要求1或2所述的酶,其特征在于所说的酶的分子量约为86,000~96,000道尔顿。
4、根据权利要求3所述的酶,其特征在于所说的酶系从栖热菌属aquaticus中得到。
5、根据权利要求1、2、3、或4所述的方法,其特征在于所说的酶在pH6.4时的活性至少为pH8.0时活性的50%。
6、根据权利要求1、2、3、4或5所述的方法,其特征在于所说酶是天然酶。
7、一种为根据权利要求2所述的酶编码的基因。
8、根据权利要求7所述的基因,其特征在于所说基因是从栖热菌属aquaticus基因组中克隆。
9、根据权利要求8所述的基因,其特征在于所说基因对分子量约为86,000-90,000道尔顿的酶编码。
10、根据权利要求8所述的基因,其特征在于所说基因对分子量约为60,000-65,000道尔顿的酶编码。
11、根据权利要求9所述的基因,其特征在于它包含在栖热菌属aquaticus或噬菌体CH35:Taq#4-2的约3∶5千碱基BglⅡ-Asp 718(部分)限制断片中。
12、根据权利要求10所述的基因,其特征在于所说基因包含在栖热菌属aquaticus基因组或质粒pFC85中的约2.8千碱基HindⅢ-Asp 718限制断片内。
13、一种选自pFC85或pFC83的质粒。
14、一种噬菌体CH35:Taq#4-2。
15、一种稳定性酶制剂,它包括根据权利要求1至6条中任一条所述的酶,而这种酶存在于包含一种或一种以上非离子型高分子去污剂的缓冲剂中。
16、根据权利要求15所述的制剂,其特征在于所说去污剂的浓度分别约为总制剂的0.1%至0.5%(以体积计)。
17、根据权利要求15或16所述的制剂,其特征在于所说去污剂是聚氧乙烯化脱水山梨糖醇甘油-月桂酸和乙氧基化壬基酚。
18、根据权利要求15、16或17所述的制剂,其特征在于所说缓冲剂包括丙三醇、三羟甲基氨基甲烷-Cl(pH8.0)、EDTA、二硫苏糖醇、聚氧乙烯化脱水山梨糖醇甘油-月桂酸、乙氧基化壬基酚和白明胶。
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