[其他]人红血球生成素基因在稳定转染的哺乳动物细胞中的高水平表达

权利要求书

1、主要包含相当于人红血球生成素基因的ApaI限制片段的基本纯的DNA或RNA。

2、权利要求1中的DNA或RNA，其ApaⅠ限制片段主要包含如图1所示的意义链的核苷酸序列，或其互补的RNA序列。

3、权利要求1中的DNA或RNA序列，它们有效地与能够使其表达的第二核酸序列相连接。

4、权利要求3的DNA或RNA，其中第二核酸序列由下列中选择一种或数种：启动子序列、增强子序列、多聚腺苷酸序列、选择性标记序列、质粒、病毒或逆病毒表达载体、以及逆病毒的跨染色体作用因子。

5、含有权利要求3的DNA或RNA的细胞。

6、用权利要求3的DNA或RNA稳定转染的细胞。

7、权利要求6的细胞，它们从包括真核细胞、酵母和细菌的一组中选出。

8、权利要求7的细胞，其中真核细胞来源于肾脏。

9、权利要求8的细胞，其中肾脏细胞是上皮细胞。

10、一种表达有生物活力的重组人红血球生成素的方法，包括用主要含有人红血球生成素基因的ApaⅠ限制片段的DNA、RNA或核苷酸序列转染宿主细胞，使转染细胞与培养基相接触，使细胞表达红血球生成素，并回收表达的红血球生成素。

11、权利要求10的方法，其中ApaⅠ限制片段携带在质粒或病毒上。

12、权利要求10的方法，其中宿主细胞系从包括真核细胞、酵母和细菌的一组中选出。

13、一种通过与保温的培养基接触的细胞系表达有生物活力的重组人红血球生成素的方法，做出的改进包括在所说的方法中加入能在保温培养基中产生红血球生成素的细胞系，所说的细胞系通过用主要含有人红血球生成素基因的ApaⅠ限制片段的DNA、RNA或核苷酸序列转染宿主细胞系产生。

14、按照权利要求13的在与保温培养基接触的细胞系中表达有生物活力的重组人红血球生成素的方法，其中所说的细胞系能够使每升保温的培养基中有至少二百万单位的红血球生成素的名义产量。

15、权利要求13的方法，其中ApaⅠ限制片段为质粒所携带。

16、权利要求13的方法，其中ApaⅠ限制片段为病毒所携带。

17、权利要求13的方法，其中宿主细胞系从包括真核细胞、酵母和细菌的一组中选出。

18、通过权利要求5，6，7，8或9中的细胞所表达的人红血球生成素。

19、通过权利要求10，11，12，13，14，15，16或17中的宿主细胞系所表达的人的红血球生成素。

20、通过重组DNA方法生产的有生物活力的人红血球生成素。