[其他]白细胞三烯A4水解酶放射免疫测定药盒及制备工艺无效
| 申请号： | 87102689 | 申请日： | 1987-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN87102689A | 公开（公告）日： | 1988-11-30 |
| 发明（设计）人： | 富继义;欧罗夫·洛德马克 | 申请（专利权）人： | 白求恩医科大学 |
| 主分类号： | C12N9/14 | 分类号： | C12N9/14;G01N33/534 |
| 代理公司： | 吉林省专利服务中心 | 代理人： | 刘玉璠 |
| 地址： | 吉林省长春市*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 白细胞 a4 水解 放射 免疫测定 制备 工艺 | ||
【权利要求书】：
1、白细胞三烯A4水解酶放射免疫测定药盒的制备工艺，其特征在于：
(1)由人全血中提取白细胞。
(2)由白细胞中提纯白细胞三烯A4水解酶(LTA4H)。
(3)制备抗LTA4H抗血清。
(4)125I标记LTA4H。
(5)纯化125I-LTA4H。
(6)建立放射免疫测定方法。
2、如权利要求1所述的工艺，其特征在于制取白细胞粗提液后，用白细胞悬浮液和红细胞溶解液提纯白细胞;
3、如权利要求1所述的工艺，其特征在于由白细胞中提纯LTA4H时，用硫酸铵分段盐析，DEAE纤维素离子交换层析，凝胶过滤层析，高压液相离子交换层析，高压液相羟基磷灰石柱层析，分离蛋白质，提纯LTA4H;
4、如权利要求1所述的工艺，其特征在于在LTA4H抗血清的制备时，将LTA4H凝胶电泳纯化后的凝胶，经快速染色，脱色，显示LTA4H的位置，取下，制成凝胶匀浆，再免疫家兔，获得高特异性抗血清;
5、如权利要求1所述的工艺，其特征在于125I标记LTA4H时，使用适当比例的LTA4H，Na〔125I〕和氯胺-T，以获得比放射性高的125I-LTA4H。
6、如权利要求1所述的工艺，其特征在于将125I-LTA4H电泳后的凝胶进行放射自显影定位，显示125I-LTA4H在凝胶上的位置，将其裁割下来，用透析袋电泳洗脱，获得高纯度的125I-LTA4H。
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