[其他]新的重组基因及其应用无效
| 申请号： | 86107809 | 申请日： | 1986-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN86107809A | 公开（公告）日： | 1987-07-15 |
| 发明（设计）人： | 菊地正和;中浜一雄;丸本龙二 | 申请（专利权）人： | 武田药品工业株式会社 |
| 主分类号： | C12N15/00 | 分类号： | C12N15/00;C12P21/02;A61K37/02 |
| 代理公司： | 中国专利代理有限公司 | 代理人： | 罗宏,曹恒兴 |
| 地址： | 日本大阪*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 基因 及其 应用 | ||
【说明书】：
本发明涉及一些编码像药剂等一样适用的沙雷胃蛋白酶（国际非专利名称）的或编码具有像沙雷胃蛋白酶一样的具有抗炎性的多肽的DNA及其使用。
常规生产像抗炎剂等一样适用的沙雷胃蛋白酶的方法包括培养沙雷氏（Serratia）菌在内的方法（参阅美国专利3691014号）然而沙雷胃蛋白酶基因未曾被克隆，故一直采用基因技术生产沙雷胃蛋白酶。
使用基因增殖作用可望在用培养沙雷氏菌生产沙雷胃蛋白酶时会提高沙雷胃蛋白的酶的产量。另外有人认为减少用沙雷氏菌生产沙雷胃蛋白酶同时产生的像DNA酶之类的蛋白质可简化沙雷胃蛋白酶的纯化过程。
本发明者发现，带有含有从产生沙雷胃蛋白酶的沙雷氏菌Serratia染色体DNA而得的沙雷胃蛋白酶基因的克隆DNA的质粒的一个转化株，能生产显著数量的沙雷胃蛋白酶和一种具有像沙雷胃蛋白一样的抗炎性的多肽。
本发明人根据这些发现作了进一步的研究，并推进了本发明。
本发明提供一种编码沙雷胃蛋白酶多肽或编码具有像沙雷胃蛋白酶一样的抗炎剂性的一种多肽的一种DNA，一种含有上述DNA的质粒，一种带有上述质粒的转化株，一种具有图3（Ⅶ）所示的，从第（1）-（470）位的氨基酸顺序的、其N末端可能有蛋氨酸的多肽，以及提供了它们的生产过程和使用情况。本发明还进一步提供出一种DNA，它具有的碱基顺序表示如下式：
ATG TCT ATC TGT CTG ATT GAT ATC AAT
CAG GTA ATG AGT GGA ATC GAA CCA ATG
CAA TCT ACT AAA AAG GCA ATT GAA ATT
ACT GAA TCC AAC TTC GCG [Ⅷ]
或上述碱基顺序的一部分，
一种以下式表示的多肽：
蛋-丝-异-半-亮-异-天-异-天酰-谷酰-缬-蛋-丝-甘-异-谷-脯-蛋-谷酰-丝-苏-赖-赖-丙-异-谷-异-苏-谷-丝-天酰-苯-丙 〔Ⅸ〕
上述多肽的一部分，或是一种在上述多肽或上述部分多肽取代，插入，添加或者消去某些氨基残基而成的多肽，以及利于用它来生产像蛋白酶之类的重组蛋白质的生产及其使用情况。
至于编码沙雷胃蛋白酶多肽密码的或者编码具有像上述沙雷胃蛋白酶一样的抗炎性的多肽密码的DNA，可以列举的有：一种DNA是与具有式（Ⅰ）碱基顺序的DNA杂交;或者还有另一种DNA是与具有式（Ⅱ）碱基顺序的DNA杂交，
5′ACTTTGTAX1CCGTCCCAX2G
TTTGGTTTTC3′[Ⅰ]
式中，X1表示T或G，X2表示T或G，
5′TCY1TGY2CCY3TGCCA3′[Ⅱ]
式中，Y1代表T或C，Y2代表A，G，T或C，Y3代表T或C。
还可作实例说明的是具有图3所示，其5′-末端上有ATG及其3′-末端上有TAA，TAG及TGA三种以外的一种或两种终止密码子〔Ⅲ〕的第731至2236位碱基顺序的一种DNA，以及另一种具有图3所示的其中 5′-末端上有ATG或氢原子及其3′-末端上有TAA，TAG及TGA三种以外的一种或二种终止密码子〔Ⅳ〕的第827～2236位碱基顺序的DNA。这种DNA〔Ⅳ〕亦可有其5′-及3′-末端碱基顺序如在图3〔Ⅴ〕所示的第1-2570位一样的碱基顺序。这些DNA也可是上述碱基顺序的一部分，或是从上述碱基顺序中，或其中的一部分的碱基顺序中取代，插入，添加或消去某些碱基获得的一碱基顺序。
上述这种DNA可以编码含有下式的一个氨基酸顺序的多肽的密码：组-谷-异-甘-组-丙-亮-35至45氨基酸残基-甘-天-天酰-甘-甘-组-酪--70至80氨基酸残基-亮-天酰-谷-赖-丝-苯-丝-天-缬-甘-甘，
或可编码含有从上述氨基酸顺序中取代，插入，添加或消去某些氨基酸残基而得的一个氨基酸顺序。
前面指出的这种取代，插入，添加和消去作用是例如以下的方法：
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