[其他]农业细菌接种物

说明书

本发明涉及农业细菌产品，包括根瘤菌接种物以及制造和保存这些农业细菌产品的方法。

众所周知，豆科植物在某些条件下可直接从空气“固氮”并将其转变成含有机氮的化合物，因而将氮提供给植物作蛋白质合成并通过将含氮营养物留在土壤中来使豆科植物周围的土壤变肥供以后的作物之用。当然，在实际上，植物本身并不固氮，但固氮发生在根瘤菌中，该菌是在植物根部所形成的根瘤中与豆科植物共生地存在着。能与根瘤菌形成共生关系的豆科植物的例子为豌豆、蚕豆、紫苜蓿、红三叶草、白三叶草、巢菜、羽扁豆等等。

其他在农业上很重要的非豆科植物如禾本科植物和谷物不能从空气直接固氮。非豆科植物一般完全依赖于土壤中的结合氮，如硝酸盐及铵盐来提供进行蛋白质合成所需的氮。在任一给定的田地上已经种过了一系列这类作物之后，在土壤中的结合氮就被消耗掉。因而常常进行作物轮作，从而固氮植物与非固氮植物轮种以补充土壤中的氮。再者，一些豆科植物特别是大豆、豌豆、蚕豆及紫苜蓿作为作物本身在商业上是很重要的，而且这些作物的生长由于能获得丰富的结合氮而大为便利。

某一固氮植物所需的特定的根瘤菌可能并不普遍存在于土壤之中。不同的根瘤菌种仅适用于在专门的豆科植物中形成根瘤。因而十分普遍的做法是用适当的根瘤菌的培养物对豆科植物的种子接种。人工接种可以在种子上涂上、在种植的种子或作物上撒上接种物或可在种植的豆科种子的沟中撒上接种物来进行。

对豆科种子接种的一种方法是通过将细菌的潮湿培养物与诸如腐殖质或泥炭之类的载体相混合以使根瘤菌培养物维持在活的状态。这种载体维持细菌在潮湿生活状态。然而，这样的活的细菌培养物的货架寿命（贮藏寿命）相对较短，因为在贮存条件下由于在其环境中食物及潮气的相对短缺而使细菌死亡。在授予爱雷克生（Erickhson）的美国专利第2，726，948号中，描述有潮湿类型的接种混合物的例子，其中活性潮湿细菌的培养物是与泥炭、木炭及石灰石的混合物相混合，因而水是在约为混合物总重量的38%的水平上。

另一种制备豆科植物种子接种物的方法是将细菌培养物转变到休眠状态。如在授予斯考特（Scott）等的美国专利第3，168，796号中所描述的那样，用以产生休眠细菌的一种已知方法是冷冻-干燥。在斯考特专利中，将根瘤菌在-35～-70℃的温度范围中进行冷冻-干燥。然后将干燥了的细菌饼进行磨碎，并与粉状载体混合，该载体是一种尺寸小于40微米的非吸湿性的惰性粉末。在斯考特专利中，细菌对载体的重量比为5～400毫克细菌/英两载体。根据斯考特专利，在将细菌与载体进行混合的步骤期间，排除掉水是至关重要的。

尽管在与载体混合之前，冷冻-干燥根瘤菌通常可得到高的起始回收率，但细菌在长保存期间中并不总是保持稳定的。因而提供一种干燥且休眠的细菌接种物是有利的，而且这种接种物可以很容易制备出来并在相当长的保存时间内是很稳定的，且在重新曝露到潮气中后，有活力的根瘤菌的数量也大。

有人已提出看法认为其它的非根瘤菌的细菌可能对一些作物是有利的。许多陆地上的细菌菌种是已知的很可能是由于在植物与细菌之间所形成的共生关系，其中一些细菌对田间作物的栽培是特别有用。结果是这类共生关系被确定了，那么为了利用此共生现象就需有效地将细菌施加到田地之中去。

本发明可概述为一种制造在农业上有用的在惰性粒状载体上含有休眠细菌培养物的干燥的组成物的方法。根瘤菌或其它种细菌的菌落是成批培养的，并将其从培养基中分离出来，在无菌的条件下温度为约0～30℃的范围内，保持约0到96小时。然后将细菌与在化学上呈惰性的多孔的粒状载体相混合，以致使细菌对培养物的重量比是在约0.5～1.5的范围。然后细菌与载体的混合物在无菌条件下，在室温下，空气干燥约2～10天。

本发明的目的是提供一种制造在农业上有用的包括有活力的休眠细菌（或是根瘤菌或其他有用的细菌菌种）的组成物的方法。

本发明的进一步目的是为豆科植物提供一种种子涂层，该涂层包括根瘤菌接种物，其中涂层与种子在长的保存期间内将是稳定的。

本发明的另一目的是提供一种细菌接种物，其中细菌是休眠的容易处理，而且在持久的保存期间，细菌将是稳定和活的。

本发明的其他目的、优点及特征从下面的详细说明中可很明显地看出。