[其他]蛋白质相互分离无效
| 申请号: | 85107875 | 申请日: | 1985-09-26 |
| 公开(公告)号: | CN85107875A | 公开(公告)日: | 1987-04-08 |
| 发明(设计)人: | 加藤光一;山田隆央;河原贤治 | 申请(专利权)人: | 武田药品工业株式会社 |
| 主分类号: | C07K3/16 | 分类号: | C07K3/16;C12N15/00;C12P21/00 |
| 代理公司: | 中国专利代理有限公司 | 代理人: | 罗宏,刘元金 |
| 地址: | 日本大阪府大阪*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 蛋白质 相互 分离 | ||
1、从蛋白质和蛋氨酸-蛋白质(Met-Protein)组成的混合物中分离一种蛋白质或蛋氨酸-蛋白质的方法,该Met-蛋白质由氨基酸链段组成,该链段与第一蛋白质的氨基酸链段非常相似,可以提供由第一蛋白质所能形成的生理活性,而且Met-蛋白质在其氨端基上连接蛋氨酸残基的情况与第一蛋白质相似,可利用第一蛋白质和第二蛋白质之间等电点的不同对组成蛋白质的混合物进行分离。
2、根据权利要求1的方法,其特征在于,分离程序包括:(a)使混合物经过电场迁移,或者(b)根据它们相应的等电点在载体中采用pH值梯度或盐浓度梯度洗提法从载体中把蛋白质和Met-蛋白质洗提出来。
3、根据权利要求2的方法,其特征在于,混合物要通过密度梯度等电电泳、凝胶等电电泳或等速电泳(isotachophoresis)进行电场迁移。
4、根据权利要求2的方法,其特征在于,混合物要采用色谱聚焦法(CF法)、快速蛋白液体色谱法(FPLC法),二乙氨基乙基-离子交换色谱法,羧甲基-离子交换色谱法,或磺丙基-离子交换色谱法从载体中洗提出来。
5、根据权利要求1的方法,其特征在于,Met-蛋白质由在第一种蛋白质的氨端基上连接蛋氨基残基的氨基酸链段所组成。
6、根据权利要求1的方法,其特征在于,Met-蛋白质主要由氨端基上连接蛋氨酸残基的第一种蛋白质的氨基酸链段所组成。
7、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质和Met-蛋白质是通过基因重组工程形成的。
8、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质包括细胞激动素、肽激素,致病微生物抗原蛋白,酶或血红素蛋白。
9、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质具有大约3,000-50,000分子量。
10、根据权利要求9的方法,其特征在于,分子量为5,000-30,000。
11、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质系由30-500个氨基酸组成。
12、根据权利要求11的方法,其特征在于,蛋白质系由50-300个氨基酸组成。
13、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质和Met-蛋白质具有大约4至大约11的等电点。
14、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质和Met-蛋白质具有大约5至大约8的等电点。
15、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质和Met-蛋白质之间的等电点之差至少大约为0.01。
16、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质和Met-蛋白质之间的等电点之差至少大约为0.1。
17、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质和Met-蛋白质之间的等电点之差至少在0.01和0.2之间。
18、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质和Met-蛋白质白质均是非糖基化的。
19、根据权利要求1的方法,其特征在于,蛋白质是一种细胞激动素。
20、根据权利要求19的方法,其特征在于,细胞激动素是一种内白细胞(杀菌)素-2。
21、根据权利要求20的方法,其特征在于,内白细胞(杀菌)素-2是一种具有氨基酸链段的非糖基化蛋白质,如图1所示(X为氢原子)。
22、根据权利要求19的方法,其特征在于,细胞激动素是一种干扰素。
23、根据权利要求22的方法,其特征在于,干扰素是指干扰素-α。
24、根据权利要求23的方法,其特征在于,干扰素-α是由氨基酸链段组成的非糖基化干扰素-αA,如图2所示(X为氢原子)。
25、根据权利要求1的方法,其特征在于,混合物系指纯度不低于大约50%的蛋白质和Met-蛋白质的混合物。
26、根据权利要求1的方法,其特征在于,混合物系指纯度不低于大约99%的蛋白质和Met-蛋白质的混合物。
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