[发明专利]用生物转化生产10-羟基喜树碱的方法无效
| 申请号： | 85100520.9 | 申请日： | 1985-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN1012376B | 公开（公告）日： | 1991-04-17 |
| 发明（设计）人： | 朱关平 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海药物研究所 |
| 主分类号： | C12P17/18 | 分类号： | C12P17/18;//;C12R167) |
| 代理公司： | 中国科学院上海专利事务所 | 代理人： | 费开达 |
| 地址： | 上海市岳阳*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生物转化 生产 10 羟基 喜树碱 方法 | ||
1、由生物转化喜树碱生产10-羟基喜树碱的方法，以喜树碱为原料，通过曲霉菌株T-36的生物转化和溶媒提取方法制得10-羟基喜树碱，其特征在于该方法包括下列步骤：A：用黄曲霉菌株T-419(CGMCCO158)生物转化喜树碱；B：发酵液经填充惰性大孔树脂提取；C：从树脂上冼脱10-羟基喜树碱的乙醇冼脱液的浓缩物用乙酸乙酯、甲醇回流提取。
2、根据权利要求1所述方法，其特征在于步骤A所述的黄曲霉菌株T-419的生物转化在葡萄糖2.5%;黄豆粉2.5%;淀粉1%;氯化钠0.1%;硫酸镁0.05%;磷酸氢二钾0.38%;磷酸二氢钾0.04%;消前自然pH的菌丝培养基中进行。
3、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤A中所述的喜树碱的转化是在悬浮菌丝的磷酸缓冲液内进行，磷酸缓冲液的组成磷酸二氢钾0.04%;磷酸氢二钾0.36%。
4、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤A中所述的喜树碱的转化是在温度为26-28℃，通气量为1∶1V/vm;转化的喜树碱浓度为50-150微克/毫升，搅拌情况下进行40小时。
5、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤B中所述的提取是将含有10-羟基喜树碱的发酵液调节pH为6.6-7.2和使含有0.2%氯化纳浓度下通过惰性大孔树脂进行吸附。
6、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤B中所述的提取是以pH9-10.5的蒸馏水为洗脱液。
7、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤C中所述的回流是在醋酸乙酯∶甲醇＝1∶1的混合溶剂中进行。
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