[发明专利]一株高产蛋白的裂褶菌菌株及其选育方法在审
申请号: | 202310731290.6 | 申请日: | 2023-06-20 |
公开(公告)号: | CN116590156A | 公开(公告)日: | 2023-08-15 |
发明(设计)人: | 魏荷芬;应汉杰;陈勇;薛施锦;徐雯晖;刘庆国;温庆仕 | 申请(专利权)人: | 南京高新工大生物技术研究院有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N13/00;C12N15/01;C12N1/00;C12P21/00;A23K10/16;A23K20/147;C12R1/645 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 肖明芳 |
地址: | 210032 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高产 蛋白 裂褶菌 菌株 及其 选育 方法 | ||
1.一株高产蛋白的裂褶菌菌株,分类命名为裂褶菌Schizophyllum commune,菌株号GXGD-EF-68-R-1,已于2023年04月17日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为GDMCCNo:63362。
2.权利要求1所述的裂褶菌菌株的选育方法,其特征在于,所述的高产蛋白的裂褶菌菌株,是将原始裂褶菌活化后培养得到的菌丝体制备成菌丝体悬液,再将制备得到的菌丝体悬液酶解制备原生质体,原生质体经再生培养后再进行ARTP诱变、初筛、复筛得到的。
3.根据权利要求3所述的选育方法,其特征在于,所述的原始裂褶菌为裂褶菌EF-68。
4.根据权利要求3所述的选育方法,其特征在于,所述的菌丝体悬液酶解制备原生质体,其所用的酶体系为M2酶体系,配方为:牛血清蛋白50mg、蜗牛酶50mg、崩溃酶50mg、Lysing enzymes 50mg、Yatalase 50mg、β-glucuronidase 100μL、果胶酶100mg、纤维素酶200μL、稳定剂30mL,pH 5.0-6.0;其中,所述的稳定剂配方为:10mM NaH2PO4、0.8M NaCl,pH6.0。
5.根据权利要求3所述的选育方法,其特征在于,所述的菌丝体悬液酶解,其酶解条件为:20-30℃,50-250rpm条件下,酶解1-4h。
6.根据权利要求3所述的选育方法,其特征在于,所述的再生培养,其再生培养基配方如下:0.6mol/L蔗糖、抗生素50mg/L、土豆汁200g/L、葡萄糖20g/L、磷酸二氢钾3g/L、硫酸镁1.5g/L、VB1 0.1g/L;其中,所述的抗生素为链霉素、青霉素、青霉素钾盐中的任意一种。
7.根据权利要求3所述的选育方法,其特征在于,所述的ARTP诱变,其诱变过程使用了诱变保护剂;其中,所述的诱变保护剂,配方为:2%维生素C、1%超氧化物歧化酶、5%甘油,余量为稳定剂;其中,所述的稳定剂配方为:10mM NaH2PO4、0.8M NaCl,pH6.0。
8.权利要求1所述的裂褶菌菌株在高产蛋白中的应用。
9.根据权利要求8所述的裂褶菌菌株,其特征在于,所述的裂褶菌菌株,其生物量干重高达26.21g/L,蛋白含量高达48.13%。
10.权利要求1所述的裂褶菌菌株在制备畜牧饲料添加剂中的应用。
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