[发明专利]基于镧系MOF和纸针的病原菌快速、准确检测方法

权利要求书

1.一种基于镧系MOF和纸针的非疾病诊断和治疗目的的病原菌检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备镧系MOF溶液：将四氯化锆、六水硝酸铕、2,6-萘二羧酸和2-氟苯甲酸溶于有机溶剂中，110-120℃下热处理40-60h，收集产物后经洗涤和复溶后即得；

S2、制备纸针器件：将吸水纸修剪成“T”字形器件；

S3、病原菌检测：将病原菌待测样品溶液、特异性捕获靶标病原菌的核酸适配体溶液和镧系MOF溶液混合，静置反应20-30min后将纸针器件的针状端插入混合溶液中进行信号输出，再通过荧光激发观察荧光条带的扩散距离，与阴性对照相比扩散距离更短即为阳性结果。

2.根据权利要求1所述的一种基于镧系MOF和纸针的非疾病诊断和治疗目的的病原菌检测方法，其特征在于，所述病原菌为副溶血性弧菌，所述核酸适配体具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

3.根据权利要求2所述的一种基于镧系MOF和纸针的非疾病诊断和治疗目的的病原菌检测方法，其特征在于，所述核酸适配体为氨基修饰的核酸适配体，序列为5'-NH₂-TCTAAAAATGGGCAA AGA AACAGTGACTCGTTGAGATACT-3'。

4.根据权利要求1所述的一种基于镧系MOF和纸针的非疾病诊断和治疗目的的病原菌检测方法，其特征在于，还可以通过红色荧光强度R计算病原菌浓度。

5.根据权利要求1所述的一种基于镧系MOF和纸针的非疾病诊断和治疗目的的病原菌检测方法，其特征在于，以扩散距离D和红色荧光强度R相耦合的双信号N_Dual-P_Dual作为可视化结果的输出方式：N_Dual-P_Dual的计算参照公式(2)-(4)：

ΔR＝normalized R_Negative–normalized R_Positive(2)；

ΔD＝normalized D_Negative–normalized D_Positive(3)；

N_Dual-P_Dual＝(normalized D_Negative+normalized R_Negative)–(normalized D_Positive+

normalized R_Positive)(4)。

6.根据权利要求1所述的一种基于镧系MOF和纸针的非疾病诊断和治疗目的的病原菌检测方法，其特征在于，S3中，核酸适配体溶液的浓度为0.4-0.6μM，镧系MOF溶液的浓度为8-9mg/mL，病原菌待测样品溶液、核酸适配体溶液、镧系MOF溶液的体积比为20：10：15。

7.根据权利要求1所述的一种基于镧系MOF和纸针的非疾病诊断和治疗目的的病原菌检测方法，其特征在于，S1所述四氯化锆、六水硝酸铕、2,6-萘二羧酸、2-氟苯甲酸的质量比为2-3、10-15：6-7：30-35。

8.根据权利要求1所述的一种基于镧系MOF和纸针的非疾病诊断和治疗目的的病原菌检测方法，其特征在于，S1所述有机溶剂为DMF和HNO₃的混合水溶液，水、DMF、HNO₃的体积比为3-4：14-15：0.2-0.5。

9.一种用于病原菌检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括镧系MOF溶液、特异性捕获靶标病原菌的核酸适配体溶液和纸针器件。

10.根据权利要求9所述的一种用于病原菌检测的试剂盒，其特征在于，所述核酸适配体具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。