[发明专利]用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系的构建方法及应用

说明书

本发明属于抗生素检测技术领域，公开了用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系的构建方法及应用。以硒化镉量子点的荧光作为传感信号，通过羧基与氨基的脱水缩合反应在适配体上标记硒化镉量子点荧光，加入可以与适配体通过疏水键和π‑π堆积作用结合的氧化石墨烯，硒化镉量子点的荧光被氧化石墨烯猝灭。当目标物氟喹诺酮类抗生素暴露时，适配体与目标物的特异性结合，并使适配体与氧化石墨烯解吸，硒化镉量子点重新分散在体系溶液中，荧光恢复。由此构建以荧光强度为转导信号，以适配体为识别元件的传感体系用于食品和环境中氟喹诺酮类抗生素检测，灵敏度高、简便快速，成本低，利于推广。

技术领域

本发明涉及抗生素检测技术领域，具体涉及用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系的构建方法及应用。

背景技术

近年来，随着农业和畜牧业的快速发展，氟喹诺酮类(Fluoroquinolones，FQs)被广泛应用于规模化养殖，特别是家禽饲养过程，由于不受控制的使用，已经在各种食品和环境中检测到FQs残留。FQs对环境次区域生物的生态毒理学效应已被广泛关注和研究。在液态肥料、土壤和地表水等多种环境介质中均发现了高浓度的FQs成员——环丙沙星(Ciprofloxacin，CIP)。FQs不易溶于水，易于积累，在环境中长期存在。研究表明，约70％的FQs存在于污水污泥中，传统的污水处理技术不能将其有效去除。因此，FQs残留是人类面临的重要健康安全问题，开发食品和环境中FQs的快速、高灵敏分析方法具有紧迫性。

目前，有多种用于检测FQs的分析方法，如高效液相色谱、气相色谱-质谱、分子印迹聚合物法等，然而，这些方法中样品处理程序复杂、需要昂贵仪器。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

为解决背景技术中的问题，本发明提供了一种用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系的构建方法及应用。

为达到上述目的，本发明采用的第一个技术方案为：

用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系的构建方法，包含：

以3-巯基丙酸为稳定剂合成了表面含有羧基的硒化镉量子点(CdSe QDs)；

使用表面含有羧基的硒化镉量子点通过-CO-NH-将氨基修饰的适配体(Apt)与其结合，得到荧光标记的适配体(CdSe QDs-Apt)；

在荧光标记的适配体溶液中加入浓度为60μg·mL^-1的氧化石墨烯(GO)，氧化石墨烯与所述荧光标记的适配体非共价吸附发生荧光猝灭；

目标物氟喹诺酮类抗生素出现时，荧光标记的适配体与目标物特异性结合，竞争性地使荧光标记的适配体与氧化石墨烯解吸，氧化石墨烯的荧光猝灭效应消失，荧光恢复；

以荧光强度为传感信号，构建了所述用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系；

其中，所述适配体的序列如SEQ ID NO.1所示。

进一步的，所述表面含有羧基的硒化镉量子点(CdSe QDs)的制备方法为：

将1.09g无水CdCl₂溶解于100mL水中得到CdCl₂溶液，向CdCl₂溶液中加入2.5mL3-巯基丙酸(MPA)混合反应得到Cd-MPA，调节pH后，再与20mL含0.5mmol的NaHSe混合，在惰性气体氛围条件下反应，经加热、干燥处理后得到含羧基的硒化镉量子点。

进一步的，所述pH为7.3。

进一步的，所述加热处理为在150℃下加热165min。

进一步的，所述使用表面含有羧基的硒化镉量子点通过-CO-NH-将氨基修饰的适配体(Apt)与其结合的方法包含：