[发明专利]用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系的构建方法及应用在审

专利信息
申请号: 202310682651.2 申请日: 2023-06-09
公开(公告)号: CN116609312A 公开(公告)日: 2023-08-18
发明(设计)人: 刘振平;罗强祖;廖欣;陈建伟;王华雨;龙金辉 申请(专利权)人: 四川丁点儿食品开发股份有限公司
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64;G01N33/531;G01N33/53
代理公司: 成都中亚专利代理有限公司 51126 代理人: 赵婷
地址: 611730 四川省成都市郫都*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 用于 喹诺酮类 抗生素 检测 适配体 传感 体系 构建 方法 应用
【权利要求书】:

1.用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系的构建方法,其特征在于,包含:

以3-巯基丙酸为稳定剂合成了表面含有羧基的硒化镉量子点;

使用表面含有羧基的硒化镉量子点通过-CO-NH-将氨基修饰的适配体与其结合,得到荧光标记的适配体;

在荧光标记的适配体溶液中加入浓度为60μg·mL-1的氧化石墨烯,氧化石墨烯与所述荧光标记的适配体非共价吸附发生荧光猝灭;

目标物氟喹诺酮类抗生素出现时,荧光标记的适配体与目标物特异性结合,竞争性地使荧光标记的适配体与氧化石墨烯解吸,氧化石墨烯的荧光猝灭效应消失,荧光恢复;

以荧光强度为传感信号,构建了所述用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系;

其中,所述适配体的序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的适配体传感体系的构建方法,其特征在于,所述表面含有羧基的硒化镉量子点的制备方法为:

将1.09g无水CdCl2溶解于100mL水中得到CdCl2溶液,向CdCl2溶液中加入2.5mL 3-巯基丙酸混合反应得到Cd-MPA,调节pH后,再与20mL含0.5mmol的NaHSe混合,在惰性气体氛围条件下反应,经加热、干燥处理后得到表面含有羧基的硒化镉量子点。

3.如权利要求2所述的适配体传感体系的构建方法,其特征在于,所述pH为7.3。

4.如权利要求2所述的适配体传感体系的构建方法,其特征在于,所述加热处理为在150℃下加热165min。

5.如权利要求1所述的适配体传感体系的构建方法,其特征在于,所述使用表面含有羧基的硒化镉量子点通过-CO-NH-将氨基修饰的适配体与其结合的方法包含:

将1.0mg·mL-1含羧基的硒化镉量子点的溶液与1mL 20mM 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺、1mL 200mM N-羟基琥珀酰亚胺混合,在室温下超声2h,加入33μg 1OD适配体,在4℃孵育24h后,进行离心清洗,得到荧光标记的适配体。

6.如权利要求5所述的适配体传感体系的构建方法,其特征在于,所述表面含有羧基的硒化镉量子点的溶液制备方法为:

将表面含有羧基的硒化镉量子点溶解于pH为7.3的PBS缓冲液中。

7.采用如权利要求1-6任一所述构建方法得到的用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系。

8.如权利要求7所述的用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系在食品安全或环境安全检测中的应用。

9.如权利要求7所述的用于氟喹诺酮类抗生素检测的适配体传感体系在检测蜂蜜中氟喹诺酮类抗生素含量中的应用,其特征在于,所述用于氟喹诺酮类抗生素检测的传感体系中荧光标记的适配体浓度为4μg·mL-1,荧光猝灭反应时间为5min。

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