[发明专利]一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片

权利要求书

1.一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，包括从上到下依次叠置的上层（1）、中间层和下层（3）；上层（1）上设置有细胞悬液灌流通道（101）；细胞悬液灌流通道两端分别设置有第一进液口（102）和第一出液口（103）；下层（3）对应细胞悬液灌流通道（101）位置设置有白细胞趋化分离区（301）和CTC趋化捕获区（302）；中间层包括第一PET膜（201）和第二PET膜（202）；第一PET膜（201）设置于白细胞趋化分离区（301）对应位置，第二PET膜（202）设置于CTC趋化捕获区（302）对应位置；白细胞趋化分离区（301）的第二进液口（305）、第二出液口（306）在上层（1）对应位置均设置有通孔；CTC趋化捕获区（302）的第三进液口（307）和第三出液口（308）在上层（1）对应位置均设置有通孔；第一PET膜（201）微孔尺寸为5 μm，第二PET膜（202）微孔尺寸为10 μm；所述细胞悬液灌流通道（101）流速范围为0.1 μl/min～4 ml/min；

白细胞趋化因子与无血清RPMI-1640培养基混合制备白细胞趋化培养基，CTC趋化因子与含10～15 %血清的甲基丙烯酰化明胶混合制备CTC捕获基质；分别将白细胞趋化培养基、CTC捕获基质注入到芯片的白细胞趋化分离区（301）、CTC趋化捕获区（302）中。

2.根据权利要求1所述一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，所述细胞悬液灌流通道（101）主体为长方形结构，两端为三角形结构；三角形顶点位置分别对应第一进液口（102）和第一出液口（103）。

3.根据权利要求1所述的一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，所述白细胞趋化分离区（301）和第二进液口（305）通过第一进液通道（303）连通，和第二出液口（306）通过第一出液通道（309）连通；CTC趋化捕获区（302）和第三进液口（307）通过第二进液通道（310）连通，和第三出液口（308）通过第二出液通道（304）连通。

4.根据权利要求3所述的一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，所述白细胞趋化分离区（301）主体为长方形结构，两端为三角形结构，三角形顶点位置分别对应第一进液通道（303）和第一出液通道（309）一端；CTC趋化捕获区（302）主体为长方形结构，两端为三角形结构，三角形顶点位置分别对应第二进液通道（310）和第二出液通道（304）一端。

5.根据权利要求3所述的一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，所述第二进液口（305）连通设置在上层（1）的第一通孔（104），第二出液口（306）连通设置在上层（1）的第二通孔（105）；第三进液口（307）连通设置在上层（1）的第四通孔（107），第三出液口（308）连通设置在上层（1）的第三通孔（106）。

6.根据权利要求2所述的一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，所述第一进液口（102）和第一出液口（103）对应三角形顶角均小于45°。

7.根据权利要求4所述的一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，所述第一进液通道（303）和第一出液通道（309）对应三角形顶角均小于45°；第二进液通道（310）和第二出液通道（304）对应三角形顶角均小于45°。

8.根据权利要求1所述的一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，所述第一PET膜（201）覆盖白细胞趋化分离区（301），第二PET膜覆盖CTC趋化捕获区（302）。

9.根据权利要求1所述的一种无标记的高侵袭性循环肿瘤细胞捕获、培养芯片，其特征在于，所述上层（1）和下层（3）为聚二甲硅氧烷制备。