[发明专利]南方红豆杉标准汤剂特征图谱的构建和质量检测方法

说明书

本发明公开一种南方红豆杉标准汤剂特征图谱的构建和质量检测方法，在本技术方案中，基于高效液相色谱仪建立HPLC特征图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012年版)对15批次以上南方红豆杉标准汤剂的HPLC特征图谱进行合成，建立南方红豆杉标准汤剂的对照特征图谱。并对未知汤剂进行特征图谱的检测，用于鉴别未知汤剂的真伪。该方法能整体控制南方红豆杉标准汤剂中的特征成分，所得特征图谱中的特征峰信息量丰富、精密度高、重现性好、分离度高、准确度高，能有效保证南方红豆杉标准汤剂的整体质量的稳定性，为中药材汤剂的质量鉴别提供有效依据。

技术领域

本发明涉及质量检测技术领域，尤其涉及一种南方红豆杉标准汤剂特征图谱的构建和质量检测方法。

背景技术

南方红豆杉为红豆杉科植物南方红豆杉的栽培品的干燥枝叶，具有通经散结、利水消肿的功能；主治癥瘕积聚、风湿痹痛、水肿、小便不利等症。南方红豆杉标准汤剂是由南方红豆杉饮片经水提、浓缩、干燥等而成的冻干粉，与药材和饮片相比，已失去原有的性状，对应的活性成分含量也有相应的变化，因此仅采用药材或饮片质量标准下的含量指示性成分进行定量分析，难以全面反映其内在质量，而目前对于南方红豆杉标准汤剂的定性检测技术几乎没有。

特征图谱是一种体现中药化学成分整体特征的质量评价方法，对中药及其制剂的真实性、质量的一致性和稳定性均可有效地加以检测和控制。因此，有必要建立一种快速鉴别南方红豆杉标准汤剂真伪的方法。

相关技术中，《中医肿瘤学杂志》中“南方红豆杉水煎液HPLC特征图谱方法的初步建立”公开了一种南方红豆杉水煎液HPLC特征图谱的建立方法，其采用ZORBAX SB-Aq色谱柱；流动相为甲醇-水(梯度洗脱)；检测波长为310nm；柱温为25℃；流速为1.0ml·min^-1测定了4批南方红豆杉水煎液的HPLC特征图谱，此方法从梯度洗脱程序、检测波长以及所用色谱柱来看，主要考察了非紫杉烷类和非黄酮类化合物的特征图谱，而红豆杉中主要含量指标成分为10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ此成分为紫杉烷类化合物，同时对于其他具有药效学价值的紫杉烷类和黄酮类化合物并未做考察，因此，该特征图谱并不能准确且稳定的评价南方红豆杉标准汤剂的质量。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种南方红豆杉标准汤剂特征图谱的构建和质量检测方法，特征峰信息量丰富、精密度高、重现性好、分离度高、准确度高，能有效保证南方红豆杉标准汤剂的整体质量的稳定性。

为达到上述技术目的，本申请采用以下技术方案：

第一方面，本申请提供一种南方红豆杉标准汤剂HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：

M1.取10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ对照品溶液、7-木糖10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液、对照药材溶液Ⅰ、供试品溶液Ⅰ注入高效液相色谱，测定，建立HPLC特征图谱Ⅰ，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012年版)对15批次以上供试品溶液Ⅰ的HPLC特征图谱Ⅰ进行合成，建立南方红豆杉标准汤剂特征图谱Ⅰ的对照图谱Ⅰ；其中，所述对照药材溶液Ⅰ的制备过程为：取南方红豆杉对照药材粉末，加入甲醇超声后过滤，滤液减压蒸干，再加入水与二氯甲烷的混合溶液进行萃取，萃取液蒸干后用甲醇溶解，即得所述对照药材溶液Ⅰ；

所述供试品溶液Ⅰ的制备过程为：取供试品加入水与二氯甲烷的混合溶液进行萃取，萃取液蒸干后用甲醇溶解，即得所述供试品溶液Ⅰ，所述供试品为南方红豆杉标准汤剂。

步骤M1所述高效液相色谱的条件：以十八烷基硅烷键合硅胶柱为色谱柱，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；流动相A为纯水、流动相B为乙腈，梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序为：

0～12min，流动相A：80％、流动相B：20％；

12～22min，流动相A：从80％到70％、流动相B：从20％到30％；

22～30min，流动相A：70％、流动相B：30％；