[发明专利]南方红豆杉标准汤剂特征图谱的构建和质量检测方法

权利要求书

1.一种南方红豆杉标准汤剂HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

M1.取10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ对照品溶液、7-木糖10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液、对照药材溶液Ⅰ、供试品溶液Ⅰ注入高效液相色谱，测定，建立HPLC特征图谱Ⅰ，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012年版)对15批次以上供试品溶液Ⅰ的HPLC特征图谱Ⅰ进行合成，建立南方红豆杉标准汤剂的对照特征图谱Ⅰ；

其中，所述对照药材溶液Ⅰ的制备过程为：取南方红豆杉对照药材粉末，加入甲醇超声后过滤，滤液减压蒸干，再加入水与二氯甲烷的混合溶液进行萃取，萃取液蒸干后用甲醇溶解，即得所述对照药材溶液Ⅰ；

所述供试品溶液Ⅰ的制备过程为：取供试品加入水与二氯甲烷的混合溶液进行萃取，萃取液蒸干后用甲醇溶解，即得所述供试品溶液Ⅰ，所述供试品为南方红豆杉标准汤剂；

步骤M1所述高效液相色谱的条件：以十八烷基硅烷键合硅胶柱为色谱柱，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；流动相A为纯水、流动相B为乙腈，梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序为：

0～12min，流动相A：80％、流动相B：20％；

12～22min，流动相A：从80％到70％、流动相B：从20％到30％；

22～30min，流动相A：70％、流动相B：30％；

30～36min，流动相A：从70％到68％、流动相B：从30％到32％；

36～39min，流动相A：从68％到60％、流动相B：从32％到40％；

39～65min，流动相A：60％、流动相B：40％；

M2.取芦丁对照品溶液、金松双黄酮对照品溶液、对照药材溶液Ⅱ、供试品溶液Ⅱ注入高效液相色谱，测定，建立HPLC特征图谱Ⅱ，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012年版)对15批次以上供试品溶液Ⅱ的HPLC特征图谱Ⅱ进行合成，建立南方红豆杉标准汤剂的对照特征图谱Ⅱ；

其中，所述对照药材溶液Ⅱ的制备过程为：取南方红豆杉对照药材粉末加入甲醇超声处理，补足超声损失的甲醇后过滤，即得所述对照药材溶液Ⅱ；

所述供试品溶液Ⅱ的制备过程为：取供试品加入甲醇超声处理，补足超声损失的甲醇后过滤，即得所述供试品溶液Ⅱ，所述供试品为南方红豆杉标准汤剂；

步骤M2所述高效液相色谱的条件：以十八烷基硅烷键合硅胶柱为色谱柱，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；流动相A为纯水，流动相B为甲醇，梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序为：

0～5min，流动相A：从65％到45％、流动相B：从35％到55％；

5～12min，流动相A：45％、流动相B：55％；

12～16min，流动相A：从45％到0％、流动相B：从55％到100％；

16～20min，流动相A：0％、流动相B：100％；

20～25min，流动相A：从0％到65％、流动相B：从100％到45％；

M3.将所述HPLC特征图谱Ⅰ及HPLC特征图谱Ⅱ合并，即得所述南方红豆杉标准汤剂特征图谱；

将所述对照特征图谱Ⅰ及对照特征图谱Ⅱ合并，即得所述南方红豆杉标准汤剂的对照特征图谱。

2.根据权利要求1所述的南方红豆杉标准汤剂HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述HPLC特征图谱Ⅰ包括八个特征峰，各特征峰与对照药材溶液Ⅰ参照物特征峰保留时间相对应，与10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ参照物相应的峰为峰2即S峰，与7-木糖10-去乙酰基紫杉醇参照物相应的峰为峰6，计算峰1-8与S峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±10％之内，峰1规定值为0.352，峰3规定值为1.182，峰4规定值为1.238；峰5规定值为1.468，峰6规定值为1.946，峰7规定值为2.024，峰8规定值为2.449。