[发明专利]一种培养免疫细胞的方法在审
申请号: | 202310654785.3 | 申请日: | 2023-06-05 |
公开(公告)号: | CN116463286A | 公开(公告)日: | 2023-07-21 |
发明(设计)人: | 杨振亚 | 申请(专利权)人: | 昕慕(江苏)生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 215600 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 培养 免疫 细胞 方法 | ||
1.一种培养免疫细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)准备新鲜外周血150ml,培养瓶、灭活后的血浆、复合培养基、离心管、离心机、培养箱;
2)将步骤1)中的新鲜外周血放入离心管内,再将离心管放入离心机内进行离心,离心完成后对外周血中的单个核细胞进行采集得到单个核细胞;
3)将复合培养基注入培养瓶内;
4)将步骤2)中制得的单个核细胞放入含有复合培养基的培养瓶内;
5)将培养瓶放入培养箱内。
2.根据权利要求1所述培养免疫细胞的方法,其特征在于,所述步骤2)中含有新鲜外周血的离心管在放入离心机后,将离心机的转速保持在2500转每分钟,离心时间为十分钟到二十五分钟。
3.根据权利要求1所述培养免疫细胞的方法,其特征在于,所述步骤2)中制得的单个核细胞需放入生理盐水中清洗2-3次。
4.根据权利要求1所述培养免疫细胞的方法,其特征在于,所述步骤5)中,培养箱内的温度需保持在36摄氏度,培养箱内二氧化碳的浓度需保持在百分之五,培养箱内的饱和湿度保持在百分之六。
5.根据权利要求1所述培养免疫细胞的方法,其特征在于,所述步骤3)中,复合培养基的体积与培养瓶的容积之比为0.5-0.55。
6.根据权利要求1所述培养免疫细胞的方法,其特征在于,所述步骤5)中,培养瓶需在培养箱内放置3-6天。
7.根据权利要求1所述培养免疫细胞的方法,其特征在于,所述复合培养基中含有基础培养基、抗体因子和辅助培养因子。
8.根据权利要求1所述培养免疫细胞的方法,其特征在于,所述步骤5)中,在培养到第四天时,需要在培养瓶加入60ml的复合配培养基和5ml灭活后的血浆。
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