[发明专利]一种细胞表面抗原的检测方法及其应用在审
| 申请号: | 202310582761.1 | 申请日: | 2023-05-22 |
| 公开(公告)号: | CN116500257A | 公开(公告)日: | 2023-07-28 |
| 发明(设计)人: | 马岚;叶雷 | 申请(专利权)人: | 清华大学深圳国际研究生院 |
| 主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/533;G01N21/64 |
| 代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 马俊 |
| 地址: | 518000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 细胞 表面抗原 检测 方法 及其 应用 | ||
1.一种细胞表面抗原的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:将脂质体化待测细胞与捕获微球、荧光微球混合反应,检测荧光强度,分析细胞表面抗原表达情况;
所述捕获微球表面包被有抗靶标细胞表面特异性抗原的第一抗体;
所述荧光微球表面包被有抗靶标细胞表面目标抗原的第二抗体。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述脂质体化待测细胞与所述捕获微球、所述荧光微球的数量比为(5~15):1:(4000~6000)。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述脂质体化待测细胞的制备方法包括以下步骤:
将含待测细胞的溶液通过挤出技术制备得到所述脂质体化待测细胞。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述含待测细胞的溶液中还包括蛋白酶抑制剂。
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述脂质体化待测细胞的直径为200nm~500nm。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述捕获微球和所述荧光微球的材质分别独立选自聚苯乙烯和二氧化硅中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述含待测细胞的溶液的细胞密度为1000个细胞/μL~3000个细胞/μL。
8.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述荧光微球中的荧光素选自FTIC、Alexa Fluor 488、PE、PE-Cy5、PE-Cy5.5、PE-Cy7、PerCP-Cy5.5、APC-Cy7、PI/7-AAD、APC、Cy5和Alexa Fluor 647。
9.一种用于细胞表面抗原检测的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:
捕获微球,所述捕获微球表面包被有抗靶标细胞表面特异性抗原的第一抗体;
荧光微球,所述荧光微球表面包被有抗靶标细胞表面目标抗原的第二抗体。
10.权利要求1至8任一项所述的检测方法或权利要求9所述的检测试剂盒在生物医学中的应用。
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