[发明专利]一种牛黄解毒片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

说明书

本发明属于中药制剂分析技术领域，具体涉及一种牛黄解毒片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。本发明采用高效液相色谱法，对牛黄解毒片制剂的水提取溶液进行梯度洗脱检测，记录120分钟的色谱图；运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版）软件，建立牛黄解毒片制剂的指纹图谱。本发明实现了将牛黄解毒片中诸多化学成分同时直观显示在色谱上，并建立了特征显著的指纹图谱；突破了牛黄解毒片现有的隔离式质量分析技术，建立了整体性质量分析方法,具有新颖性、科学性、准确性、实用性；可以作为牛黄解毒片中多药材中多组分质量控制的鉴别方法，并为牛黄解毒片的全面的质量评价提供科学依据。

技术领域

本发明涉及中药制剂分析技术领域，具体涉及一种牛黄解毒片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。

背景技术

牛黄解毒片是由人工牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片和甘草8味药材组成的中药制剂，具有清热解毒之功效；主治火热内盛，咽喉肿痛，牙龈肿痛，口舌生疮，目赤肿痛。长期以来，牛黄解毒片在社会上具有巨大的市场需求，并呈现出生产厂家多、产量大、用途广等特点。

牛黄解毒片收载于《中国药典》2020年版一部，但其现行标准只规定了黄芩中黄芩苷的定量分析方法，人工牛黄、大黄、冰片等药材中有效成分的定性分析方法，目前尚无甘草所含有效成分的定性定量方法和人工牛黄、大黄等药材中有效成分的定量分析方法。

牛黄解毒片制剂为多组分复杂体系，其所含化学成分的种类与数量诸多。但现有技术中质量控制还只限于对诸多组分中某个有效成分或指标成分进行单独隔离式的定性、定量分析。因此，评价牛黄解毒片制剂的质量应采用与之相适应的且能提供丰富化学成分信息的检测方法，方能实现对牛黄解毒片质量的整体性评价与控制。

中药指纹图谱技术是一种针对中药及其制剂复杂性质的定性、定量分析方法，可以将诸多化学成分在同一张色谱图上直观反映出来。因此，建立牛黄解毒片的指纹图谱，可以科学、准确得将牛黄解毒片中诸多复杂化学成分同时检测出来；经过指纹图谱的相似度评价，可以对牛黄解毒片的整体质量进行整体性评价。该法具有新颖性、科学性、准确性、实用性，可以作为牛黄解毒片整体性质量控制的分析测试方法，亦可为进一步研究牛黄解毒片的药效成分提供参考。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种牛黄解毒片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种牛黄解毒片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，步骤如下：

1.供试品溶液的制备：取牛黄解毒片10片（包衣片除去包衣），研细，取约2.5g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入水50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率400W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得供试品溶液。

2.对照品溶液的制备：分别取黄芩苷对照品、甘草苷对照品约1mg，精密称定，分别置10ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。

3.高效液相色谱法测定牛黄解毒片的指纹图谱：吸取供试品溶液与对照品溶液各10ul，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版）软件，建立指纹图谱。

高效液相色谱法色谱分析条件： Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5um) 为色谱柱；流动相为0.15%磷酸水溶液和乙腈；流速为1.0ml/min；检测波长为280nm；进样量为10ul。

高效液相色谱法中流动相采用梯度洗脱，流动相A组分为0.15%磷酸水溶液，流动相B组分为乙腈，具体洗脱程序见表1：

表1