[发明专利]一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法

说明书

本发明公开了一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法，包括接种培养、孢子悬液处理、菌株筛选、菌株培养和离心菌丝体五个步骤。通过高产绣球菌诱变株的特征为：绣球菌诱变菌株菌丝体干重和胞内多糖含量与原始菌株相比均有显著提高，其中菌丝体干重高，较原始菌株提高，而且胞内多糖含量高，较原始菌株提高了，并且经过10次以上的连续传代培养不退化，具有遗传稳定性，并且发酵产物菌丝体产量和胞内多糖含量远远高于原始菌株。

技术领域

本发明属于绣球菌生产技术领域，具体涉及一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法。

背景技术

绣球菌Sparassis crispa是非褶孔菌目、绣球菌科、绣球菌属。其发酵培养得到的菌丝体产物可抗肿瘤、提高免疫力、恢复疲劳、祛斑美白，治疗糖尿病、高血压、脑血栓等疾病，均取得显著疗效。

现有的绣球菌产量较低，在培养过程中需要浪费大量的人力物力，另外由于绣球菌的食用价值较大，但因为产量较低，导致市场价格较高，对其深入研究和广泛应用具有严重的影响。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明目的是提供一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法，解决了现有的绣球菌产量较低，在培养过程中需要浪费大量的人力物力，另外由于绣球菌的食用价值较大，但因为产量较低，导致市场价格较高，对其深入研究和广泛应用具有严重的影响的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法，包括以下步骤：

S1：接种培养：首先将绣球菌原始菌株分为7-10组，然后将分组后的绣球菌原始菌株接种于培养基的内部，然后将培养基放置在恒温箱的内部进行培养，一段时间后，向培养基内部注入无菌生理盐水，并采用振荡器对培养基进行振荡，然后进行过滤稀释，得到孢子悬液。

S2：孢子悬液处理：取孢子悬液并向其内部加入缓冲液，并在振荡器对孢子悬液进行振荡，振荡的同时采用紫外线进行诱变，一段时间后终止诱变，取诱变后孢子悬液于无菌生理盐水中逐级稀释，得到稀释液，将稀释液重新导入培养基的内部，然后培养基放置在恒温箱的内部进行培养。

S3：菌株筛选：用灭菌的镊子筛选生长迅速的菌株。

S4：菌株培养：将筛选的生长较迅速的菌落放置到有培养基的摇瓶中，并将摇瓶放置在摇床顶部进行摇晃培养。

S5：离心菌丝体：将诱变得到的突变菌株保存于试管斜面培养基中，并将试管放置在离心装置的内部，离心完毕后进行水洗，然后将菌丝体铺于平板冻干，冻干粉末称重，并通过球磨装置进行粉碎，过60目筛，测定其胞内多糖含量，筛选高产的绣球菌菌株。

优选的，所述培养基的成分为：复合糖蛋白30克、蛋白1克、大豆粉1克、KH2PO4(磷酸二氢钾)1克、琼脂粉20克和水1000毫升。

优选的，所述S1接种培养步骤中绣球菌原始菌株培养基在恒温箱中培养的温度为24-26℃，且培养时间为5-7天。

优选的，所述S2孢子悬液处理步骤中缓冲液的成分为NaNO2溶液和醋酸。

优选的，所述S2孢子悬液处理步骤中紫外线诱变的时间为1h。

优选的，所述S4菌株培养步骤中摇床对摇瓶的摇晃速度为5000rpm，且离心时间为10min。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

通过高产绣球菌诱变株的特征为：绣球菌诱变菌株菌丝体干重和胞内多糖含量与原始菌株相比均有显著提高，其中菌丝体干重高，较原始菌株提高，而且胞内多糖含量高，较原始菌株提高了，并且经过10次以上的连续传代培养不退化，具有遗传稳定性，并且发酵产物菌丝体产量和胞内多糖含量远远高于原始菌株。

附图说明

图1为本发明的流程框图示意图。

具体实施方式