[发明专利]一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法在审
申请号: | 202310478703.4 | 申请日: | 2023-04-28 |
公开(公告)号: | CN116396870A | 公开(公告)日: | 2023-07-07 |
发明(设计)人: | 舒黎黎;仇志恒;崔崚岫;李洪鹏;任树华;蔡诺;赵嘉智 | 申请(专利权)人: | 沈阳农业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N3/00;C12N1/02;C12N15/01;C12R1/645 |
代理公司: | 北京京标立权专利代理事务所(普通合伙) 16143 | 代理人: | 张宏闯 |
地址: | 110866 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高产 绣球 诱变 菌株 培育 方法 | ||
1.一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1:接种培养:首先将绣球菌原始菌株分为7-10组,然后将分组后的绣球菌原始菌株接种于培养基的内部,然后将培养基放置在恒温箱的内部进行培养,一段时间后,向培养基内部注入无菌生理盐水,并采用振荡器对培养基进行振荡,然后进行过滤稀释,得到孢子悬液;
S2:孢子悬液处理:取孢子悬液并向其内部加入缓冲液,并在振荡器对孢子悬液进行振荡,振荡的同时采用紫外线进行诱变,一段时间后终止诱变,取诱变后孢子悬液于无菌生理盐水中逐级稀释,得到稀释液,将稀释液重新导入培养基的内部,然后培养基放置在恒温箱的内部进行培养;
S3:菌株筛选:用灭菌的镊子筛选生长迅速的菌株;
S4:菌株培养:将筛选的生长较迅速的菌落放置到有培养基的摇瓶中,并将摇瓶放置在摇床顶部进行摇晃培养;
S5:离心菌丝体:将诱变得到的突变菌株保存于试管斜面培养基中,并将试管放置在离心装置的内部,离心完毕后进行水洗,然后将菌丝体铺于平板冻干,冻干粉末称重,并通过球磨装置进行粉碎,过60目筛,测定其胞内多糖含量,筛选高产的绣球菌菌株。
2.根据权利要求1所述的一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法,其特征在于:所述培养基的成分为:复合糖蛋白30克、蛋白1克、大豆粉1克、KH2PO4(磷酸二氢钾)1克、琼脂粉20克和水1000毫升。
3.根据权利要求1所述的一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法,其特征在于:所述S1接种培养步骤中绣球菌原始菌株培养基在恒温箱中培养的温度为24-26℃,且培养时间为5-7天。
4.根据权利要求1所述的一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法,其特征在于:所述S2孢子悬液处理步骤中缓冲液的成分为NaNO2溶液和醋酸。
5.根据权利要求1所述的一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法,其特征在于:所述S2孢子悬液处理步骤中紫外线诱变的时间为1h。
6.根据权利要求1所述的一种高产绣球菌诱变菌株及培育方法,其特征在于:所述S4菌株培养步骤中摇床对摇瓶的摇晃速度为5000rpm,且离心时间为10min。
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