[发明专利]MDA5结合蛋白、制备方法和应用

权利要求书

1.MDA5结合蛋白，其特征在于，具有重链可变区和/或轻链可变区；

所述重链可变区包括互补决定区VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3；所述轻链可变区包括互补决定区VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；

所述VH-CDR1的氨基酸序列为G-Y-X1-I-K-X2-Y-L，其中X1为A或T，X2为N或S，如SEQ IDNO：1～4所示；

所述VH-CDR2的氨基酸序列为I-X3-T-Y-X4-G-N-T，其中X3为N或S，X4为S或G，如SEQ IDNO：5～8所示；

所述VH-CDR3的氨基酸序列为A-R-R-X5-P-E-X6-A-Y，其中X5为G或L，X6为F或G，如SEQID NO：9～12所示；

所述VL-CDR1的氨基酸序列为Q-S-I-V-X7-S-N-G-N-T-Y，其中X7为A或I，如SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：14所示；

所述VL-CDR2的氨基酸序列为K-X8-S，其中X8为A，氨基酸序列为KAS；或X8为V，氨基酸序列为KVS；

所述VL-CDR3的氨基酸序列为Q-Q-S-X9-H-F-P-X10-T，其中X9为S或T，X10为P或Q，如SEQ ID NO：17～20所示。

2.根据权利要求1所述的MDA5结合蛋白，其特征在于，所述MDA5结合蛋白与MDA5具有K_d≤2.2×10^-6mol/L的亲和力。

3.根据权利要求1所述的MDA5结合蛋白，其特征在于，所述MDA5结合蛋白中各互补决定区的突变位点选自下述突变组合1～32中的任意一种：

优选地，各互补决定区的突变位点选自突变组合1～5，7～8，10～17，19～20，22～23，25～26或29～32中的任意一组；

优选地，各互补决定区的突变位点选自突变组合14、16、19、23、30中的任意一组。

4.根据权利要求1所述的MDA5结合蛋白，其特征在于，所述MDA5结合蛋白还包括骨架区；

优选地，所述重链可变区还包括骨架区WH-FR1、WH-FR2、WH-FR3和WH-FR4；所述轻链可变区还包括骨架区VL-FR1、VL-FR2、VL-FR3和VL-FR4；

WH-FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示；WH-FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO：22所示；WH-FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO：23所示；WH-FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO：24所示；

VL-FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：25所示；VL-FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO：26所示；VL-FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO：27所示；VL-FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO：28所示；

优选地，所述重链可变区的氨基酸序列选自SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：33或SEQ ID NO：35；

优选地，所述轻链可变区的氨基酸序列选自SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：34或SEQ ID NO：36。

5.根据权利要求1～4任一项所述的MDA5结合蛋白，其特征在于，还包括恒定区；

优选地，所述MDA5结合蛋白中的重链恒定区来源于人；

优选地，来源于人的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO：37所示；

优选地，所述MDA5结合蛋白中的轻链恒定区来源于鼠；

优选地，来源于鼠的轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO：38所示。

6.根据权利要求5所述的MDA5结合蛋白，其特征在于，所述MDA5结合蛋白为人鼠嵌合抗体，其重链包括氨基酸序列如SEQ ID NO：37所示来源于人的重链恒定区，其轻链包括氨基酸序列如SEQ ID NO：38所示的鼠的轻链恒定区。