[发明专利]耐酸性提高的β-甘露聚糖酶突变体V337E及其制备和应用

权利要求书

1.一种耐酸性提高的β-甘露聚糖酶突变体V337E，其特征在于，该突变体V337E的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，与氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型β-甘露聚糖酶相比，该突变体在pH为4～6时的耐酸性提高。

2.如权利要求1所述的β-甘露聚糖酶突变体V337E在养殖业中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的应用包括制备动物饲料。

4.如权利要求1所述的β-甘露聚糖酶突变体N186D在β-甘露聚糖工业生产中的应用。

5.如权利要求1所述的β-甘露聚糖酶突变体V337E的编码基因，其特征在于，该编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

6.一种包含如权利要求5所述编码基因的重组质粒。

7.根据权利要求6所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒选用pET-28a(+)。

8.一种包含如权利要求6所述重组质粒的重组表达菌。

9.根据权利要求8所述的重组表达菌，其特征在于，所述重组表达菌选用大肠杆菌BL21(DE3)。

10.如权利要求1所述β-甘露聚糖酶突变体V337E的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：

S1.以含有核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的野生型β-甘露聚糖酶编码基因的载体为模板，以核苷酸序列如SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的位点突变引物进行突变扩增，获得包含核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示突变体编码基因的重组质粒；

S2.将步骤S1所得的重组质粒转入表达菌中，表达并纯化，得到β-甘露聚糖酶突变体V337E。