[发明专利]一种人抗体试剂、包括人抗体试剂的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种人抗体试剂，其特征在于包括：CD45、CD3、CD19、CD14、CD16、CD56、CD8a、CD4、CD45RO、CCR7、CD127和CD25中的至少一种。

2.如权利要求1所述的人抗体试剂，其特征在于，所述人抗体试剂包括按重量份计的抗体：CD45 0.1-3.6份、CD3 0.1-3.6份、CD19 0.1-3.6份、CD 14 0.1-3.6份、CD16 0.1-3.6份、CD56 0.1-3.6份、CD8a 0.1-3.6份、CD40.1-3.6份、CD45RO 0.1-3.6份、CCR7 0.1-3.6份、CD127 0.1-3.6份和CD 25 0.1-3.6份。

3.如权利要求2所述的人抗体试剂，其特征在于，所述人抗体试剂包括按重量份计的抗体：CD45 0.15份、CD3 0.15份、CD19 0.15份、CD14 0.15份、CD16 0.15份、CD56 0.15份、CD8a 0.15份、CD4 0.15份、CD45RO 0.6份、CCR7 0.6份、CD127 0.6份和CD25 0.6份。

4.如权利要求1所述的人抗体试剂，其特征在于，所述人抗体试剂CD45、CD3、CD19、CD14、CD16、CD56、CD8a、CD4、CD45RO、CCR7、CD127和CD25对应偶联的荧光标记分别为：APC/Cy7、BV510、BV785、BV711、Pe rCP/Cy5.5、PE/Cy5、Alexa700、BV605、BV421、BB515、BUV737和PE。

5.一种试剂盒，其特征在于，包括检测部和分析部；所述检测部中设有如权利要求1所述的人抗体试剂。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述分析部包括数据分析模板，所述数据分析模板的逻辑为：

细胞门内去除细胞碎片，再去除黏连细胞；设置CD45+细胞门，再设置多种门，检测多群细胞的表达情况：从CD45+的门内，设置CD14+和CD16+细胞门，看粒细胞和单核细胞的表达情况；从CD14-和CD16-的细胞门中，设置CD 19+细胞门，看B细胞的表达情况；从CD19-的细胞门中，再设置CD3+和CD56+细胞门，其中CD3+和CD56-检测T细胞表达情况，CD56+CD3-细胞门检测NK细胞表达情况,CD3+和CD56+检测NKT细胞表达情况；从CD3+和CD56-门中，再设置CD4+和CD8a+细胞门，其中CD4+CD8a-检测Th细胞表达情况，CD8a+CD4-检测Tc细胞表达情况；从Th细胞门中，再设置CD127+和CD25+细胞门，检测Treg细胞表达情况；从Th细胞门中，再设置CCR7和CD45RO细胞门，其中CCR7+CD45RO+检测Memory Treg细胞表达情况；CCR7+CD45RO-检测 Treg细胞表达情况。

7.一种如权利要求5所述的试剂盒的应用，其特征在于，所述试剂盒用于检测细胞的表达；所述细胞包括Th细胞、Tc细胞、Treg细胞、粒细胞、单核细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞、Memory Treg和 Treg中的至少一种。

8.如权利要求7所述的试剂盒的应用，其特征在于，检测细胞的表达的方法包括检测步骤和分析步骤；所述检测步骤包括：

细胞重悬和FC Block步骤：待测细胞用无蛋白无叠氮化物的DPBS重悬；用Human FcBlock的Stained Buffer进行RT孵育；

外标步骤：在经细胞重悬和FC Block步骤处理的细胞中加入外标抗体；RT处理、洗涤、室温离心；弃上清，重悬得到待检试剂，上机检测。

9.如权利要求8所述的试剂盒的应用，其特征在于，细胞重悬和FC Block步骤中，待测细胞用1×DPBS洗涤一次，每管细胞浓度在1-10×10⁶cells/mL，然后重悬。

10.如权利要求8所述的试剂盒的应用，其特征在于，所述外标步骤中：将待检试剂在四激光355nm、405nm、488nm、640nm的全光谱流式细胞仪上进行检测。