[发明专利]一种菜心恢复系材料的选育方法

说明书

本发明公开了一种菜心恢复系材料的选育方法，属于菜心育种技术领域。该选育方法包括杂交、自交分离：以携带恢复基因的油菜材料为母本，未携带恢复基因的菜心材料为父本，经杂交、自交分离获得F2代植株；分子标记筛选：将获得的F2代植株通过特异性扩增方法筛选出含有恢复基因的F2代植株；再重复回交、自交分离和分子标记筛选6‑8次进行选育，最终获得菜心恢复系材料。本发明利用分子标记技术结合传统育种技术，辅助选育菜心Ogu CMS恢复系，解决了菜心OguCMS恢复系选育困难的问题，同时本发明提供的选育方法节约时间人力成本，为菜心OguCMS恢复系材料的高效选育提供了新途径。

技术领域

本发明涉及菜心育种技术领域，特别是涉及一种菜心恢复系材料的选育方法。

背景技术

Ogu CMS自出现以来，在油菜、白菜等作物的花期表现出不育性稳定、彻底，不受温度影响等优良特性，广受十字花科雄性不育选育者欢迎。由于Ogu CMS恢复系基因仅在油菜中出现，与菜心的亲缘关系较远，传统的回交育种技术通常为：油菜Ogu CMS恢复系第1次与菜心自交系杂交获得F1代、分离获得大群体F2代，选择一定数量的F2代单株作父本分别与Ogu CMS测交获得杂交种，同时父本自交；测交获得的杂交种进行花期育性调查、花粉活力检测等技术，获得育性恢复单株，即所获得的对应父本为恢复性单株；然后该恢复性单株再与第1次的菜心自交系进行回交，后代继续进行以上操作，至少经过6代回交，筛选出农艺性状与菜心相似，并保留有于Ogu CMS恢复系基因的植株。上述传统选育技术存在诸多缺点：恢复性单株与菜心自交系杂、分离交获得的F₂代，选择一定数量的F₂单株作父本分别与OguCMS测交获得杂交种，获得的后代要在花期进行育性田间检查，生育期较长，且花粉在逆境(特别是低温)条件下，会出现雄蕊退化或花粉发育不正常的现象，不利于恢复性单株的筛选；同时采用传统选育方法人工投入大，需要的时间长，筛选较为困难。

本发明利用分子标记辅助传统选育技术，开发出与恢复基因相关的特异性引物标记，每代的F2代群体不需要选择单株与Ogu CMS测交，直接对F2代单株进行苗期DNA检测，即可确定恢复性单株，再与菜心进行6代回交，获得菜心Ogu CMS恢复系。

发明内容

本发明的目的是提供一种菜心恢复系材料的选育方法，以解决上述现有技术存在的问题，本发明利用分子标记技术结合传统育种技术，辅助选育菜心Ogu CMS恢复系，解决了菜心Ogu CMS恢复系选育困难的问题，且显著节约时间人力成本，为菜心恢复系材料的高效选育提供了新途径。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种菜心恢复系材料的选育方法，包括以下步骤：

(1)杂交、自交分离：以携带恢复基因的油菜材料为母本，未携带恢复基因的菜心材料为父本，经杂交获得F1代植株，再经自交分离获得F2代植株；

(2)分子标记筛选：将步骤(1)获得的F2代植株通过特异性扩增方法筛选出含有恢复基因的F2代植株；

(3)以步骤(2)筛选出的含有恢复基因的F2代植株为母本，重复步骤(1)-(2)经回交、自交分离和分子标记筛选6-8次进行选育，最终获得菜心恢复系材料。

进一步地，在步骤(1)中，所述母本为携带Rfo基因的甘蓝型油菜；所述父本为未携带Rfo基因的菜心自交系或菜心Ogu CMS胞质不育系。

进一步地，所述甘蓝型油菜的的品系包括16C；所述菜心自交系的品种或品系包括油绿703、油绿702或油绿501；所述菜心Ogu CMS胞质不育系的材料包括玉田2号菜心或玉田3号菜心。

进一步地，在步骤(2)中，所述分子标记筛选具体为：以所述F2代植株的DNA为模板，利用如SEQ ID NO：1-2所示的引物对进行特异性扩增，若扩增结果显示出特异性条带，则为含有恢复基因的F2代植株。