[发明专利]一种菜心恢复系材料的选育方法

权利要求书

1.一种菜心恢复系材料的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)杂交、自交分离：以携带恢复基因的油菜材料为母本，未携带恢复基因的菜心材料为父本，经杂交获得F1代植株，再经自交分离获得F2代植株；

(2)分子标记筛选：将步骤(1)获得的F2代植株通过特异性扩增方法筛选出含有恢复基因的F2代植株；

(3)以步骤(2)筛选出的含有恢复基因的F2代植株为母本，重复步骤(1)-(2)经回交、自交分离和分子标记筛选6-8次进行选育，最终获得菜心恢复系材料。

2.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述母本为携带Rfo基因的甘蓝型油菜；所述父本为未携带Rfo基因的菜心自交系或菜心Ogu CMS胞质不育系。

3.根据权利要求2所述的选育方法，其特征在于，所述甘蓝型油菜的品系包括16C；所述菜心自交系的品种包括油绿703、油绿702或油绿501；所述菜心Ogu CMS胞质不育系的材料包括玉田2号菜心或玉田3号菜心。

4.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述分子标记筛选具体为：以所述F2代植株的DNA为模板，利用如SEQ ID NO：1-2所示的引物对进行特异性扩增，若扩增结果显示出特异性条带，则为含有恢复基因的F2代植株。

5.根据权利要求4所述的选育方法，其特征在于，所述特异性扩增的反应体系为：2μL10×PCR reaction Buffer、1.6μL MgCl₂、引物对各1μL、0.15μL Taq酶、0.4μL dNTP、0.5μL模板DNA、ddH₂O补充至20μL。

6.根据权利要求4所述的选育方法，其特征在于，所述特异性扩增的程序为：95℃、3min；94℃、30s，55℃、30s，72℃、40s，33个循环；72℃、8min。